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    干细胞技术与牙齿再生的研究进展.docx

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    干细胞技术与牙齿再生的研究进展.docx

    干细胞技术与牙齿再生的研究进展 牙齿是一个困难的生物器官,由多种组织组成,包括牙釉质、牙本质、牙骨质和牙髓,牙齿脱落是最常见的器官衰竭1。牙齿及其支持组织是由上下颌突和额鼻突的外胚层及外胚间叶细胞发育而来,其发育是一个长期、困难的生物学过程,包括细胞与细胞、上皮与间充质的相互作用,细胞分化,形态发生,组织矿化和牙齿的萌出,而牙胚的分化和发育过程是依靠于特定牙齿发生部位的上皮组织及其下方的间充质组织相互作用而形成的,故对于再生的牙齿来说,其发育至少须要两种细胞,即牙源性上皮细胞及牙源性间充质细胞,而牙齿再生探讨的方向多半是找寻这两种细胞的替代物。 干细胞是一类特别的细胞,其生物学特征既具有自我更新的实力,又具有多向分化的潜能,可以在机体生命过程中无限期分裂,并在合适的条件或赐予恰当的条件后,能分化产生多种不同的细胞类型;依据干细胞的不同发育阶段,目前可将其划分为:胚胎干细胞;成体干细胞,包括造血干细胞、骨髓间质干细胞、肌肉干细胞、脂肪干细胞等。某些干细胞可定向分化,发育成熟为一种特定细胞或限于某种功能的细胞,如:心肌细胞、皮肤细胞、神经细胞等;某些干细胞定向性不强,但具有分化成多种类型细胞的潜能2。干细胞技术,又称为再生医疗技术,是指通过对干细胞进行分别、体外培育、定向诱导、甚至基因修饰等过程,在体外繁育出全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官,并最终通过细胞组织或器官的移植实现对临床疾病的治疗。本文就几个典型的干细胞在牙齿再生中的应用作一综述,为牙齿再生探讨供应新的思路。 1 胚胎干细胞与牙齿再生 胚胎干细胞是早期胚胎或原始性腺中分别出来的一类细胞,它具有一种内在的自我更新实力并能分化成各种各样的功能性组织细胞,它具有体外培育无限增殖、自我更新和多向分化的特性3。无论在体外还是体内环境,ESc都能被诱导分化为机体几乎全部的细胞类型。人类ESc是由美国生物学家Thomson4第一次所分别出来。ESc是一种多能性细胞,来源于三个胚胎层的衍生物。考虑到将来的临床应用,ESc可分化为神经元,心肌细胞和很多其他类型的细胞5。大量的探讨证明小鼠的ESc可以分化为心肌细胞、造血细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞6-10等。在上皮分化方面,ESc可分化为角膜上皮细胞、肾上皮细胞、色素上皮细胞11-13等。人类ESc对于人类疾病的细胞治疗也有着巨大的潜力,如:糖尿病,神经元退化性紊乱等14。 ESc在牙齿再生方面的探讨早期主要是集中在诱导其形成神经嵴样细胞,由于其广泛的潜力,已有胜利从人类ESc中产生出神经嵴样细胞的报道,神经嵴样细胞已成为一个探讨干细胞生物学和疾病发展的志向的模型系统15。神经嵴细胞是一个多能的ESc细胞群,它对颅面部的各种结构包括牙齿的形成有重要作用,现在已经普遍认为牙釉质是它外胚层的衍生物,而牙髓牙本质复合体以及其四周的支持组织是源自神经嵴细胞衍生物的间质16。故ESc对于牙齿的形成与再生有着重要的意义。而ESc对于牙周组织的再生也有重要作用,牙周组织须要牙根表面新的牙骨质的形成,新的牙槽骨以及能使两矿化组织之间进行功能连接的牙周韧带纤维17-18。 上皮和间充质是牙齿器官再生所需的组分。有探讨表明,小鼠的ESc和小鼠骨髓细胞可以分化为成釉样细胞。这些小鼠干细胞的探讨表明,人类ESc可成为牙源性上皮细胞再生的一个可行的细胞来源。探讨的确定因素包括了人牙源性间质可以促进ESc来源的上皮细胞进一步分化,并将进一步促进ESc在牙齿组织再生中的作用19。探讨者Fang Ning20开发了一种有效的培育方式诱导小鼠ESc分化为牙源性上皮细胞。通过将小鼠ESc放入无造釉细胞血清培育液中培育,可以诱导分化出牙源性上皮细胞;并可视察到将小鼠ESc植入免疫功能不全小鼠中会显示出组织再生的实力,形成牙源性上皮样结构。还有国内学者Jiang21探讨通过在体外将ESc诱导分化为成牙本质样细胞, 发觉将ESc诱导分化为拟胚体后, 再将拟胚体细胞与牙髓成纤维细胞共培育,可以促进拟胚体细胞向成牙本质样细胞分化。 从理论上讲, ESc比ASc更具有分化潜能, 在肯定的诱导条件下, 即可发育分化为全部组织器官具有特定功能的细胞, 这一成就将会给移植治疗、药物的发觉与筛选、基因治疗和生物发育等基础探讨等带来深远的影响, 打开在体外生产人体全部类型可供移植治疗的细胞、组织乃至器官的大门22。但是ESc的伦理争议,在疾病治疗中存在的免疫排斥问题以及形成畸胎瘤的风险制约着它的应用。 2 诱导多能干细胞与牙齿再生 随着干细胞技术的发展,早在2022年,日本的两位科学家Kazutoshi Takahashi和Shinya Yamanaka23发觉向小鼠皮肤成纤维细胞里转入四个基因后,这些细胞能被诱导成为具有ESc特征的细胞,因其具有多能性,能分化产生体内任何类型的细胞,故称之为诱导多能干细胞。其具有自我复制、自我更新和多向分化的实力,现已有探讨证明,iPSc可以向人体内三个胚层的细胞分化,如外胚层分化为神经细胞、中胚层分化为心血管和造血细胞、内胚层分化为肝、肾等细胞。至此,揭开了体细胞重编程的序幕,即从任何一个胚层发育分化而来的细胞都可重编程成为iPSc,而且不同阶段的细胞重编程的难易程度不同24。由于平安、易获得以及有大量的细胞来源,外周血的运用促进了iPSc的探讨。现在iPSc已经被用于细胞疗法,疾病模型和药物发觉。小鼠iPSc能够分化成任何类型的细胞,甚至具有种系传播的实力25。这一技术是干细胞探讨领域的一项重大突破,它回避了ESc的伦理争议,使干细胞向临床应用又迈进了一大步。 随着iPSc探讨在医学各个领域的兴起和发展26-28,2022年以来口腔医学领域也起先关注iPSc。现在把成体牙源细胞诱导成iPSc的技术相对成熟,Oda等29从拔牙后被丢弃的智齿中得到间充质干细胞,通过反转录OCT3/4, SOX2, KLF4这三个基因而获得了iPSc,在不运用原癌基因c-Myc基因的状况下,其产生的效率高于皮肤的成纤维细胞,使得这一探讨在获得iPSc上又有了新的突破。另外,Xing Yan等30把牙齿干细胞,如:脱落乳牙干细胞、根尖牙乳头干细胞和牙髓干细胞进行细胞核重组而诱导成iPSc,因牙髓干细胞和脱落乳牙干细胞能低水平地表达与胚胎干细胞有关的基因,故和诱导成纤维细胞相比,显示出更高的效率。人牙龈纤维细胞和牙周膜纤维细胞衍生出的iPSc与人ESc表现出相像的特性,这些结果说明牙龈纤维细胞、牙周膜纤维细胞31、口腔黏膜纤维细胞32也可被诱导成iPSc。很多类型的细胞已经胜利地在鼠身上完成了向iPSc的重组;然而重组人类细胞却变得更加困难。 第5页 共5页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页第 5 页 共 5 页

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