9组织培养第九章植物脱毒技术(1).pptx

危害一些植物的病毒数目危害一些植物的病毒数目植物种植物种类类感染病感染病毒种类毒种类植物种植物种类类感染病感染病毒种类毒种类植物种植物种类类感染病感染病毒种类毒种类菊花菊花19矮牵牛矮牵牛5苹果苹果36康乃馨康乃馨11百合百合6柑橘柑橘23水仙水仙4马铃薯马铃薯17葡萄葡萄26唐菖蒲唐菖蒲5大蒜大蒜24草莓草莓24风信子风信子3豌豆豌豆15桃桃23月季月季10樱桃樱桃44梨梨11酒精擦拭手酒精擦拭手外植体消毒外植体消毒浸泡浸泡5min器械消毒器械消毒酒精灯灼烧酒精灯灼烧酒精擦拭培养皿酒精擦拭培养皿 酒精擦拭酒精擦拭旋转灼烧旋转灼烧显微镜下显微镜下获取茎尖获取茎尖接种接种盖好瓶塞盖好瓶塞脱毒马铃薯试管苗脱毒马铃薯试管苗 用于脱毒的适宜茎尖大小用于脱毒的适宜茎尖大小植物植物病毒名称病毒名称剥离茎尖大剥离茎尖大小小（mm）植物植物病毒名称病毒名称剥离茎尖大剥离茎尖大小小（mm）马铃薯马铃薯马铃薯卷叶病毒马铃薯卷叶病毒马马1.03.0百合百合花叶病花叶病0.21.0铃薯铃薯Y病毒病毒1.03.0鸢尾鸢尾花叶病花叶病0.20.5马铃薯马铃薯X病毒病毒0.20.5菊花菊花各种病毒各种病毒0.21.0马铃薯马铃薯G病毒病毒0.20.3康乃馨康乃馨 各种病毒各种病毒0.20.8马铃薯马铃薯S病毒病毒0.2以下以下大丽花大丽花花叶病花叶病0.6甘薯甘薯斑纹花叶病毒斑纹花叶病毒1.02.0大蒜大蒜花叶病毒花叶病毒0.31.0缩叶花叶病毒缩叶花叶病毒1.02.0甘蔗甘蔗花叶病花叶病0.73.0羽毛状花叶病毒羽毛状花叶病毒0.31.0草莓草莓各种病毒各种病毒0.21.0一些常见病毒病引起的可见病症一些常见病毒病引起的可见病症症状症状病毒病名称病毒病名称症状症状病毒名称病毒名称褪绿、黄褪绿、黄化化小麦黄矮病小麦黄矮病斑点斑点十字花科黑斑病十字花科黑斑病花叶、斑花叶、斑驳驳烟草花叶病、菜豆花叶病、烟草花叶病、菜豆花叶病、黄瓜花叶病黄瓜花叶病猝倒、猝倒、立枯立枯棉花立枯病、瓜苗猝棉花立枯病、瓜苗猝倒病、水稻烂秧病倒病、水稻烂秧病溃疡溃疡杨树溃疡病、柑桔溃疡病，杨树溃疡病、柑桔溃疡病，番茄溃疡病番茄溃疡病萎蔫萎蔫棉花枯萎病、茄科植棉花枯萎病、茄科植物青枯病物青枯病枯死枯死马铃薯晚疫病、水稻白叶枯马铃薯晚疫病、水稻白叶枯病病矮化矮化玉米矮化病、泡桐丛玉米矮化病、泡桐丛枝病、小麦丛矮病枝病、小麦丛矮病穿孔穿孔桃细菌性穿孔病桃细菌性穿孔病徒长徒长水稻恶苗病水稻恶苗病疮痂疮痂柑桔疮痂病、梨黑星病、马柑桔疮痂病、梨黑星病、马铃薯疮痂病铃薯疮痂病卷叶卷叶马铃薯卷叶病马铃薯卷叶病几种马铃薯病毒的指示植物及表现症状几种马铃薯病毒的指示植物及表现症状病毒种病毒种类类指示植物指示植物表现症表现症状状马铃薯马铃薯X X病病毒（毒（PVXPVX）千红日、曼陀罗、辣千红日、曼陀罗、辣椒、心叶烟椒、心叶烟脉间花叶脉间花叶马铃薯马铃薯S S病病毒（毒（PVSPVS）苋色藜、千日红、曼苋色藜、千日红、曼陀罗、昆诺阿藜陀罗、昆诺阿藜叶脉深陷，粗缩叶脉深陷，粗缩马铃薯马铃薯Y Y病病毒（毒（PVYPVY）野生马铃薯、洋酸菜、野生马铃薯、洋酸菜、曼陀罗曼陀罗随品种而异，有些轻随品种而异，有些轻微花叶或粗缩，敏感微花叶或粗缩，敏感品种反应为坏死品种反应为坏死马铃薯卷马铃薯卷叶病毒叶病毒（PLRVPLRV）洋酸菜洋酸菜叶尖呈浅黄色，有些叶尖呈浅黄色，有些品种呈紫色或红色品种呈紫色或红色（一）草本植物鉴定（一）草本植物鉴定1、汁叶涂抹法、汁叶涂抹法 被鉴定植物取被鉴定植物取13克幼叶克幼叶加加10毫升水及少量磷酸缓冲液毫升水及少量磷酸缓冲液-研碎过滤研碎过滤-加金钢砂作麾加金钢砂作麾擦剂擦剂-汁液在叶面上涂抹汁液在叶面上涂抹23次接种次接种2、小叶嫁接法、小叶嫁接法 指示植物作砧木，被鉴定植物小指示植物作砧木，被鉴定植物小叶作接穗，常用劈接法。叶作接穗，常用劈接法。（二）木本指示植物鉴定（二）木本指示植物鉴定1、直接在指示植物上嫁接待检植株的芽片、直接在指示植物上嫁接待检植株的芽片2、双重芽嫁接、双重芽嫁接 3、双芽嫁接法、双芽嫁接法部分病毒的木本指示植物及相应症状部分病毒的木本指示植物及相应症状病毒种类病毒种类木本指示植物木本指示植物表现症状表现症状苹果褪绿叶斑病苹果褪绿叶斑病毒毒苏俄苹果苏俄苹果叶片出现褪绿斑点，叶小，植株矮叶片出现褪绿斑点，叶小，植株矮化，长势弱化，长势弱苹果茎痘病毒苹果茎痘病毒司派司派227227或光辉或光辉叶片反卷，植株矮化，皮层坏死叶片反卷，植株矮化，皮层坏死苹果茎沟病毒苹果茎沟病毒弗吉尼亚小苹果弗吉尼亚小苹果植株矮小，接合部内有深褐色坏死植株矮小，接合部内有深褐色坏死环纹，木质部产生深褐色纵向条沟环纹，木质部产生深褐色纵向条沟苹果花叶病毒苹果花叶病毒兰蓬王、红玉和兰蓬王、红玉和金冠金冠叶片上产生黄斑、沿叶脉条斑叶片上产生黄斑、沿叶脉条斑苹果锈果类病毒苹果锈果类病毒国光国光叶和茎干锈斑、坏死斑叶和茎干锈斑、坏死斑葡萄扇叶病毒葡萄扇叶病毒葡萄茎痘病毒葡萄茎痘病毒沙地葡萄圣乔治沙地葡萄圣乔治叶片出现褪绿斑点、线纹斑及环斑、叶片出现褪绿斑点、线纹斑及环斑、局部坏死、畸形；叶脉间出现星状局部坏死、畸形；叶脉间出现星状透明斑透明斑葡萄卷叶病毒葡萄卷叶病毒欧亚种葡萄欧亚种葡萄叶片下卷、叶脉间变红叶片下卷、叶脉间变红葡萄茎沟病毒葡萄茎沟病毒KoberKober 5BB 5BB仅在仅在Kober5BBKober5BB上会产生茎沟上会产生茎沟葡萄栓皮病毒葡萄栓皮病毒LN33LN33节间肿大，部分叶片背面出现栓皮节间肿大，部分叶片背面出现栓皮葡萄金黄病毒葡萄金黄病毒BacoBaco 22A 22A植株矮化，叶片下卷、黄化植株矮化，叶片下卷、黄化葡萄脉坏死病葡萄脉坏死病110R110R叶片背面沿叶脉出现坏死斑，卷须叶片背面沿叶脉出现坏死斑，卷须和嫩梢坏死和嫩梢坏死葡萄脉斑驳病葡萄脉斑驳病河岸葡萄河岸葡萄褪绿斑，沿脉斑驳，叶片畸形褪绿斑，沿脉斑驳，叶片畸形柑橘碎叶病柑橘碎叶病腊斯克枳橙、特洛腊斯克枳橙、特洛亚枳橙、卡里佐枳亚枳橙、卡里佐枳橙和厚皮来檬橙和厚皮来檬新叶上出现叶片扭曲，叶缘残缺呈新叶上出现叶片扭曲，叶缘残缺呈破碎状破碎状 第三节第三节 无病毒苗的保存和繁殖无病毒苗的保存和繁殖 通过不同脱毒方法所获得的脱毒植株，经鉴通过不同脱毒方法所获得的脱毒植株，经鉴定确系无特顶病毒者，既是无病毒原种。定确系无特顶病毒者，既是无病毒原种。 无病毒植株并不是有额外的抗病性，它们有无病毒植株并不是有额外的抗病性，它们有可能很快又被重新感染。所以一旦培育得到无病可能很快又被重新感染。所以一旦培育得到无病毒苗，就应很好保存，这些原原种或原种材料保毒苗，就应很好保存，这些原原种或原种材料保管得好可以保存利用管得好可以保存利用510年。年。一、无病毒苗的保存一、无病毒苗的保存（一）隔离保存（一）隔离保存 通常无病毒苗应种植在隔虫网内，使用通常无病毒苗应种植在隔虫网内，使用300目，目，即网眼为即网眼为0.40.5mm大小的网纱，也可用盆栽钵。大小的网纱，也可用盆栽钵。栽培用的土壤也应进行消毒，周围环境也要整洁，栽培用的土壤也应进行消毒，周围环境也要整洁，并及时喷施农药防治虫害，以保证植物材料在与并及时喷施农药防治虫害，以保证植物材料在与病毒严密隔离的条件下栽培。病毒严密隔离的条件下栽培。 另一种更便宜的另一种更便宜的方法，是把由茎尖得到的并已经过脱毒检验的植方法，是把由茎尖得到的并已经过脱毒检验的植物通过离体培养进行繁殖和保存。物通过离体培养进行繁殖和保存。（二）长期保存（二）长期保存1 1、低温保存、低温保存 将无病毒苗原种的器官或幼小植株接种到培将无病毒苗原种的器官或幼小植株接种到培养基上，低温下离体保存，是长期保存无病毒苗养基上，低温下离体保存，是长期保存无病毒苗及其他优良种质的方法。只需半年或一年更换培及其他优良种质的方法。只需半年或一年更换培养基，也叫最小生长法。养基，也叫最小生长法。2 2、冷冻保存（超低温保存）、冷冻保存（超低温保存） 用液氮（用液氮（-196-196）保存植物材料的方法。常）保存植物材料的方法。常用冷冻保护剂为用冷冻保护剂为DMSODMSO（5-8%5-8%）、甘油、脯氨酸）、甘油、脯氨酸（10%10%）、各种可溶性糖、聚乙二醇等。（见十二）、各种可溶性糖、聚乙二醇等。（见十二章）章）二、无病毒苗的繁殖二、无病毒苗的繁殖（一）无病毒苗的繁殖方法（一）无病毒苗的繁殖方法1、嫁接繁殖、嫁接繁殖2、扦插繁殖、扦插繁殖3、压条繁殖、压条繁殖4、匍匐茎繁殖、匍匐茎繁殖5、微型薯块繁殖、微型薯块繁殖 （二）无病毒苗繁育生产体系（二）无病毒苗繁育生产体系 我国农作物无病毒苗繁育生产体系归结我国农作物无病毒苗繁育生产体系归结为以下模式：为以下模式： 国家级（或省级）脱毒中心国家级（或省级）脱毒中心无病毒无病毒苗繁育基地苗繁育基地无病毒苗栽培示范基地无病毒苗栽培示范基地作作物无病毒化生产物无病毒化生产三、无病毒苗的利用三、无病毒苗的利用 无病毒苗在生产中的利用也要防止病毒的再无病毒苗在生产中的利用也要防止病毒的再感染。感染。 生产场所应隔离病毒感染途径，生产场所应隔离病毒感染途径， 做好土壤做好土壤消毒或防蚜等工作。在此种植区及种植规模小的消毒或防蚜等工作。在此种植区及种植规模小的地方，要较长时间才会感染。而在种植时间长、地方，要较长时间才会感染。而在种植时间长、轮作及种植规模大的产地则在短期内就可感染。轮作及种植规模大的产地则在短期内就可感染。 一旦感染，影响产量质量的，就应重新采用一旦感染，影响产量质量的，就应重新采用无病毒苗，以保证生产的质量。无病毒苗，以保证生产的质量。思考：思考：1、说明植物茎尖培养脱毒技术原理及其影、说明植物茎尖培养脱毒技术原理及其影响因素响因素2、热处理脱毒原理是什么、热处理脱毒原理是什么?3、分别说明植物指示植物法和抗血清鉴定、分别说明植物指示植物法和抗血清鉴定法原理法原理4、写出我国的脱毒苗繁育生产体系、写出我国的脱毒苗繁育生产体系5、查阅资料，了解我国脱毒马铃薯生产状、查阅资料，了解我国脱毒马铃薯生产状况况