《医学微生物学》第一篇　细菌学 第二十一章螺旋体.pptx

第二十一章 螺旋体螺旋体 序 言 第一节 钩端螺旋体属钩端螺旋体属第二节 密螺旋体属密螺旋体属 一、苍白密螺旋体苍白亚种一、苍白密螺旋体苍白亚种 二、其它密螺旋体二、其它密螺旋体 第三节 疏螺旋体属疏螺旋体属 一、伯氏疏螺旋体一、伯氏疏螺旋体 二、其它二、其它疏疏螺旋体螺旋体 重点难点熟悉了解掌握主要致病性螺旋体种类与结构特点及其所致疾病主要致病性螺旋体种类与结构特点及其所致疾病1. 钩端螺旋体病传染源与流行特点及标本采集与检查钩端螺旋体病传染源与流行特点及标本采集与检查2. 梅毒临床和病理特征及实验室诊断梅毒临床和病理特征及实验室诊断3. 莱姆病传播媒介与临床特征及实验室诊断莱姆病传播媒介与临床特征及实验室诊断螺旋体概念与分类及其它致病性螺旋体所致疾病螺旋体概念与分类及其它致病性螺旋体所致疾病 螺旋体分类及致病性螺旋体分类及致病性序言 螺旋体螺旋体 (spirochete) 是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物，生物学地位介于细菌与原虫之间。微生物，生物学地位介于细菌与原虫之间。概念与定义概念与定义生物学特性生物学特性 基本结构及生物学性状与细菌相似，有原始核质、类似革兰阴性菌的基本结构及生物学性状与细菌相似，有原始核质、类似革兰阴性菌的细胞壁、二分裂方式繁殖、对多种抗生素敏感。细胞壁、二分裂方式繁殖、对多种抗生素敏感。 分布与致病分布与致病 分布广泛，种类繁多，部分螺旋体可引起人类疾病。分布广泛，种类繁多，部分螺旋体可引起人类疾病。 分类及依据分类及依据 分类依据：菌体大小、螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距。分类依据：菌体大小、螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距。 钩端螺旋体钩端螺旋体 (Leptospira)：螺旋细密规则，一端或两端弯曲成钩状，螺旋细密规则，一端或两端弯曲成钩状，部分钩端螺旋体等对人和动物致病。部分钩端螺旋体等对人和动物致病。 密螺旋体属密螺旋体属 (Treponema)：螺旋较为细密规则，两端尖细，苍白密螺螺旋较为细密规则，两端尖细，苍白密螺旋体苍白亚种、苍白密螺旋体极细亚种和品他螺旋体对人致病。旋体苍白亚种、苍白密螺旋体极细亚种和品他螺旋体对人致病。 疏螺旋体属疏螺旋体属 (Borrelia)：3-10个稀疏不规则螺旋，伯氏疏螺旋体、回个稀疏不规则螺旋，伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体、赫姆疏螺旋体和奋森疏螺旋体对人致病。归热螺旋体、赫姆疏螺旋体和奋森疏螺旋体对人致病。形态与结构特点形态与结构特点 菌体菌体细长细长、弯曲弯曲有有螺旋螺旋，内外膜之间有，内外膜之间有内鞭毛内鞭毛 (endoflagella)。螺旋体与螺形螺旋体与螺形菌形态学比较菌形态学比较钩端螺旋体第一节生物学性状生物学性状 形状形状：一或两端弯曲呈一或两端弯曲呈C、S或问号状。或问号状。 结构结构：柱形原生质体、内鞭毛、外膜。：柱形原生质体、内鞭毛、外膜。 动力动力：旋转状活泼运动，暗视野显微镜观察。：旋转状活泼运动，暗视野显微镜观察。 染色染色：镀银染色法，菌体呈金黄色或棕褐色。：镀银染色法，菌体呈金黄色或棕褐色。 培养培养：Korthof 或或EMJH培养基培养基28培养。培养。 基因组基因组：有大、小两个染色体。：有大、小两个染色体。 A：暗视野显微镜；：暗视野显微镜；B：镀：镀银染色银染色BA分类及依据分类及依据 基因型分类基因型分类：近：近年根据年根据DNA-DNA杂交结果和杂交结果和16S rRNA序列，将钩端序列，将钩端螺旋体分为螺旋体分为致病性致病性、中间型中间型和和腐生性腐生性三大类三大类。 1. 致病性钩端螺旋体致病性钩端螺旋体：10个基因种个基因种 (genospecies)，其中，其中问号钩端螺旋问号钩端螺旋体体(L. interrogans) 基因种流行最广。基因种流行最广。 2. 中间型钩端螺旋体中间型钩端螺旋体：5个基因种，偶对人和动物致病。个基因种，偶对人和动物致病。 3. 腐生性钩端螺旋体腐生性钩端螺旋体：6个基因种，不致病。个基因种，不致病。 血清学分类血清学分类：根据抗原性差异分类，可将基因：根据抗原性差异分类，可将基因种进一步种进一步分为分为血清群血清群及及其其血清型血清型，临床上主要采用血清学分类法。，临床上主要采用血清学分类法。流行特征流行特征致病性钩端螺旋体动物宿主众多，其中致病性钩端螺旋体动物宿主众多，其中野鼠和家野鼠和家畜畜危害较大。危害较大。 动物感染后病情轻微或不发病，但持续从尿液排动物感染后病情轻微或不发病，但持续从尿液排出钩端螺旋体，直接或经土壤间接污染水形成出钩端螺旋体，直接或经土壤间接污染水形成疫水疫水，人接触疫水感染后均发病。人接触疫水感染后均发病。根据流行特征和传染源差异分为稻田型（根据流行特征和传染源差异分为稻田型（鼠鼠）、）、雨水型（雨水型（家畜家畜）和洪水型（）和洪水型（鼠与家畜鼠与家畜）。我国以）。我国以稻稻田型田型和和洪水型洪水型为主，为主，7-9月月为高发季节。为高发季节。我国钩端螺旋体病分布我国钩端螺旋体病分布红色红色和和粉红色粉红色为高流行区域为高流行区域绿色绿色为中等程度流行区域为中等程度流行区域兰色兰色为无该病流行的区域为无该病流行的区域致病性致病性黏附素、内毒素、溶血素、侵袭性酶。黏附素、内毒素、溶血素、侵袭性酶。 皮肤或黏膜皮肤或黏膜钩端螺旋体血症（钩端螺旋体血症（发热发热、头痛头痛、肌痛肌痛、眼结膜充血、浅表淋巴结肿大等）眼结膜充血、浅表淋巴结肿大等） 侵入多种脏器，侵入多种脏器，因主要受损脏器不同，临床上有多种病型。因主要受损脏器不同，临床上有多种病型。 主要依赖于特异性体液免疫，对同一血清型钩端螺旋体有持久免主要依赖于特异性体液免疫，对同一血清型钩端螺旋体有持久免疫力，但不同血清群之间无明显的交叉保护作用。疫力，但不同血清群之间无明显的交叉保护作用。 1. 致病物质致病物质2. 所致疾病所致疾病免疫性免疫性微生物学检查微生物学检查 病原学检查病原学检查：发病发病710天取外周血，两周后取尿液，离心集菌天取外周血，两周后取尿液，离心集菌后暗视野显微镜检查。后暗视野显微镜检查。 血清学检查：血清学检查：单份血清显微镜凝集试验单份血清显微镜凝集试验 (MAT) 效价效价1：400、双双份血清份血清MAT效价呈效价呈4倍及以上增长为阳性。倍及以上增长为阳性。防治原则防治原则 预防：预防：各血清群交叉保护作用有限，故采用多价疫苗。口服强力各血清群交叉保护作用有限，故采用多价疫苗。口服强力霉素可用于紧急预防。霉素可用于紧急预防。 治疗：治疗：首选青霉素，过敏者用庆大霉素或强力霉素。首选青霉素，过敏者用庆大霉素或强力霉素。密螺旋体密螺旋体第二节致病性密螺旋体致病性密螺旋体 苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种 (T. pallidum subsp. pallidum)：人类梅毒病原体，人类梅毒病原体，故又称梅毒螺旋体。梅毒（故又称梅毒螺旋体。梅毒（syphilis）是我国人群中危害较为严重的性传播疾）是我国人群中危害较为严重的性传播疾病病 (sexual transmitted disease, STD) 。 苍白密螺旋体地方亚种苍白密螺旋体地方亚种 (T. pallidum subsp. endemicum)：地方性梅毒地方性梅毒(endemic syphilis)或称非性病梅毒病原体，非洲、西亚和中东地区流行，我或称非性病梅毒病原体，非洲、西亚和中东地区流行，我国无病例报道。国无病例报道。 苍白密螺旋体苍白密螺旋体极细亚种极细亚种 (T. pallidum subsp. pertenue)：雅司病雅司病 (yaws) 病病原体，中非、南美、东南亚热带地区流行，目前我国无此病。原体，中非、南美、东南亚热带地区流行，目前我国无此病。 品他品他密螺旋体密螺旋体 (T. carateum)：品他病品他病 (pinta) 病原体，中美和南美地区病原体，中美和南美地区流行，我国无病例报道。流行，我国无病例报道。苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种梅毒螺旋体梅毒螺旋体 生物学性状生物学性状形状形状：两端尖直。：两端尖直。结构结构：与钩端螺旋体相似，但螺旋较少。：与钩端螺旋体相似，但螺旋较少。 动力动力：移行、曲伸、滚动等方式运动。：移行、曲伸、滚动等方式运动。 染色法染色法：与钩端螺旋体相同。：与钩端螺旋体相同。培养培养：不能在无生命的人工培养基上生长繁殖。：不能在无生命的人工培养基上生长繁殖。抵抗力抵抗力：干燥：干燥2小时、小时、505分钟、分钟、43天即死亡。天即死亡。 A：暗视野显微镜；：暗视野显微镜；B：镀银染色：镀银染色BA致病性致病性1. 致病物质致病物质荚膜样物质、黏附因子、侵袭性酶。荚膜样物质、黏附因子、侵袭性酶。 获得性梅毒获得性梅毒 I 期期梅毒：梅毒：外生殖器外生殖器硬下疳硬下疳(hard chancre)，传染性强。，传染性强。 II期期梅毒：梅毒：皮肤及粘膜皮肤及粘膜梅毒疹梅毒疹 (syphilid)，传染性强、组织破坏小。，传染性强、组织破坏小。 III期期梅毒：梅毒：皮肤和黏膜皮肤和黏膜结节性梅毒疹结节性梅毒疹 (nodular syphilid) 和和树胶肿树胶肿 (gumma) 、心血管梅毒和神经梅毒、心血管梅毒和神经梅毒 ，传染性小，组织破坏大。，传染性小，组织破坏大。2. 所致疾病所致疾病获得性梅毒、先天性梅毒。获得性梅毒、先天性梅毒。 梅毒疹梅毒疹硬硬下下疳疳梅梅毒毒瘤瘤先天性梅毒先天性梅毒 流产、早产或死胎，新生儿皮肤病变、马鞍鼻、锯齿牙、骨软骨炎、先流产、早产或死胎，新生儿皮肤病变、马鞍鼻、锯齿牙、骨软骨炎、先天性耳聋等体征，俗称梅毒儿。天性耳聋等体征，俗称梅毒儿。 骨骨软软骨骨炎炎锯齿牙锯齿牙免疫性免疫性 传染性免疫或有菌性免疫传染性免疫或有菌性免疫：已感染梅毒螺旋体的个体对梅毒螺旋体：已感染梅毒螺旋体的个体对梅毒螺旋体再感染有抵抗力，若体内梅毒螺旋体被清除，免疫力也随之消失。再感染有抵抗力，若体内梅毒螺旋体被清除，免疫力也随之消失。 迟发型超敏反应为主的细胞免疫迟发型超敏反应为主的细胞免疫：抗梅毒螺旋体感染。抗梅毒螺旋体感染。 自身抗体自身抗体：常出现抗淋巴细胞抗体、类风湿因子、冷凝集素等。常出现抗淋巴细胞抗体、类风湿因子、冷凝集素等。 微生物学检查微生物学检查 病原学检查病原学检查：硬下疳、梅毒疹渗出液标本用暗视野显微镜、直接免硬下疳、梅毒疹渗出液标本用暗视野显微镜、直接免疫荧光法或疫荧光法或ELISA检查。检查。 血清学检查：血清学检查：RPR或或TRUST初筛，初筛，TPHA或或TPPA确诊。确诊。防治原则防治原则 预防：预防：加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。 治疗：治疗：青霉素类药物长程治疗。青霉素类药物长程治疗。疏螺旋体疏螺旋体第三节致病性疏螺旋体致病性疏螺旋体 伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体 (Borrelia burgdorferi)：莱姆病莱姆病 (Lyme disease) 病原体，病原体，我国北方林区为该病主要疫源地，我国北方林区为该病主要疫源地，20余个省和自治区证实有该病存在。余个省和自治区证实有该病存在。 回归热螺旋体回归热螺旋体：引起引起回归热回归热 (relapsing fever)，病原体有，病原体有回归热疏螺旋回归热疏螺旋体体 (Borrelia recurrentis)、杜通疏螺旋体杜通疏螺旋体 (Borrelia duttonii) 和和赫姆斯疏螺旋体赫姆斯疏螺旋体 (Borrelia hermsii)，我国流行虱传回归热。，我国流行虱传回归热。 奋森疏螺旋体奋森疏螺旋体 (Borrelia vincentii)：与与梭形梭杆菌梭形梭杆菌(Fusobecteriurn fusiforme) 协同引起协同引起奋森咽峡炎奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等疾病。、牙龈炎、口腔坏疽等疾病。一、伯氏疏螺旋体一、伯氏疏螺旋体 生物学性状生物学性状 形状形状：两端稍尖。：两端稍尖。 结构结构：与钩端螺旋体相似，但螺旋少且不规则。：与钩端螺旋体相似，但螺旋少且不规则。 动力动力：扭转、翻滚、抖动等方式运动。：扭转、翻滚、抖动等方式运动。 染色法染色法：镀银染色法、：镀银染色法、Giemsa或或Wright染色法。染色法。 培养培养：微需氧，：微需氧，BSK-II培养基培养基32-35培养。培养。 A：荧光显微镜；：荧光显微镜；B：镀银染色：镀银染色BA抗原构造及分类抗原构造及分类抗原构造抗原构造：外膜表面的外表蛋白：外膜表面的外表蛋白(outer surface protein，Osp) OspA、OspB和和OspC为主要表面抗原。为主要表面抗原。分类分类：目前根据：目前根据DNA-DNA杂交结果和杂交结果和5-23S rRNA序列将莱姆病病原体分序列将莱姆病病原体分为为19个基因种个基因种 (genospecies)，已确定对人致病的有，已确定对人致病的有伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体、伽氏疏螺伽氏疏螺旋体旋体 (B. garinii) 和和埃氏疏螺旋体埃氏疏螺旋体 (B. afelii) 三个基因种。三个基因种。我国主要为伽氏疏螺旋体，其次为埃氏疏螺旋体，伯氏疏螺旋体少见。我国主要为伽氏疏螺旋体，其次为埃氏疏螺旋体，伯氏疏螺旋体少见。 目前将伯氏疏螺旋体作为莱姆病病原体的统称，为广义的伯氏疏螺旋体。目前将伯氏疏螺旋体作为莱姆病病原体的统称，为广义的伯氏疏螺旋体。流行特征流行特征动物宿主：动物宿主：宿主众多，以野鼠和鹿较为重要。宿主众多，以野鼠和鹿较为重要。 传播媒介：传播媒介：多种硬蜱多种硬蜱 ，如亚洲全沟硬蜱，如亚洲全沟硬蜱 。流行地区和高发季节：流行地区和高发季节：我国东北和内蒙古等林我国东北和内蒙古等林区，区，5-6月为高发季节。月为高发季节。亚洲全沟硬蜱亚洲全沟硬蜱 致病性致病性1. 致病物质致病物质OspB等黏附和侵袭因子、内毒素样物质等黏附和侵袭因子、内毒素样物质 。 2. 所致疾病所致疾病慢性全身性感染，病程分三期。慢性全身性感染，病程分三期。 早期局部性感染早期局部性感染：疫蜱叮咬处出现疫蜱叮咬处出现移行性红斑移行性红斑 (erythema chronicum migrans，ECM)，伴有发热、肌肉和关节疼痛、局部淋巴结肿大。，伴有发热、肌肉和关节疼痛、局部淋巴结肿大。 早期播散性感染早期播散性感染：继发性红斑、面神经麻痹、脑膜炎。继发性红斑、面神经麻痹、脑膜炎。 晚期持续性感染晚期持续性感染：慢性关节炎、神经炎和萎缩性肌皮炎。慢性关节炎、神经炎和萎缩性肌皮炎。 erythema chronicum migrans (ECM) 移行性红斑移行性红斑ECM初为红色斑疹初为红色斑疹或丘疹，继而扩大为或丘疹，继而扩大为圆形皮损，边缘鲜红，圆形皮损，边缘鲜红，中央呈退行性变，多中央呈退行性变，多个个ECM重叠在一起重叠在一起可形成枪靶形可形成枪靶形微生物学检查微生物学检查 病原学检查病原学检查：体内螺旋体数量较少，难以分离培养，可用体内螺旋体数量较少，难以分离培养，可用PCR检测检测皮损及血液、关节液等标本中皮损及血液、关节液等标本中DNA片段，但阳性率不高。片段，但阳性率不高。 血清学检查：血清学检查：常用常用ELISA和免疫荧光法，但结果仍需用免疫印迹法和免疫荧光法，但结果仍需用免疫印迹法 (immunoblotting assay) 确定其特异性。确定其特异性。防治原则防治原则 预防：预防：避免蜱叮咬，目前尚无疫苗。避免蜱叮咬，目前尚无疫苗。 治疗：治疗：强力霉素、青霉素和头孢菌素类药物。强力霉素、青霉素和头孢菌素类药物。二、回归热疏螺旋体二、回归热疏螺旋体 生物学性状生物学性状：细长有疏松螺旋：细长有疏松螺旋 ，运动活泼。，运动活泼。 致病性致病性：回归热，反复周期性急起急退高热。：回归热，反复周期性急起急退高热。 虱传虱传回归热：回归热：病原体为病原体为回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体。 蜱传蜱传回归热回归热：病原体为：病原体为杜通疏螺旋体杜通疏螺旋体和和赫赫姆斯疏螺旋体姆斯疏螺旋体。 免疫性免疫性：主要依赖特异性体液免疫。主要依赖特异性体液免疫。 微生物学检查微生物学检查：发热期外周血标本涂片：发热期外周血标本涂片Giemsa染色镜检。染色镜检。 防治原则防治原则：避免虱和蜱叮咬，青霉素、红霉素、多西环素治疗。目前：避免虱和蜱叮咬，青霉素、红霉素、多西环素治疗。目前尚无疫苗产品尚无疫苗产品 。回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体u螺旋体为原核细胞型微生物，根据螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋螺旋体为原核细胞型微生物，根据螺旋数目、螺旋规则程度和螺旋间距等可分为钩端间距等可分为钩端螺旋体螺旋体属属、密密螺旋体螺旋体属属和和疏螺旋体属，其中疏螺旋体属，其中少数少数螺旋体可引起人类疾病螺旋体可引起人类疾病。u致病性钩端螺旋体经疫水传播，引起人兽共患钩端螺旋体病致病性钩端螺旋体经疫水传播，引起人兽共患钩端螺旋体病。u苍白密螺旋体苍白亚种引起人类性传播疾病苍白密螺旋体苍白亚种引起人类性传播疾病梅毒梅毒。u伯氏疏螺旋体是人类莱姆病病原体，硬蜱为主要传播媒介伯氏疏螺旋体是人类莱姆病病原体，硬蜱为主要传播媒介。u螺旋体结构特点、主要致病性种类及其所致疾病。螺旋体结构特点、主要致病性种类及其所致疾病。u钩端螺旋体病传染源、流行特点及标本采集、实验室诊断主要方法。钩端螺旋体病传染源、流行特点及标本采集、实验室诊断主要方法。u梅毒临床和病理特征及实验室初筛、确诊主要方法。梅毒临床和病理特征及实验室初筛、确诊主要方法。 u莱姆病传播媒介、临床特征及实验室诊断主要方法。莱姆病传播媒介、临床特征及实验室诊断主要方法。