2022年医学实验动物学考试重点总结.docx

；名词说明：试验动物 （ laboratoryanimal ）：指经人工培育,对其携带的微生物、寄生虫进行严格掌握,遗传背景明确,可用于科学试验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物；试验用动物： 是指一切用于试验的动物,除了符合严格要求的试验动物外,仍包括家畜和野生动物等；试验动物与试验用动物：遗传掌握不同, 微生物掌握等级不同 , 培育的形质和目标不同；人类疾病的动物模型：是指医学讨论中建立的具有人类疾病模拟表现的动物试验对象和相关材料；试验动物标准化：遗传质量标准化微生物质量标准化环境标准化 养分标准化按遗传掌握标准, 试验动物分为： 近交系（ CH3）,突变系 （裸鼠）,杂交系 （ F1）,封闭群 （远交系）（ KM小鼠, wister大鼠）按基因型分： 1、同基因型动物（如近交系、 F1 代） 2、不同基因型动物（如封闭群）按微生物掌握程度分级：一般级,清洁级,SPF级,无菌级 （ 2001 年版的国家标准中,大小鼠取消一般级动物,犬、猴只分一般级和SPF级,豚鼠、地鼠和兔仍旧分4 级）SPF动物定义： 除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学试验干扰大的病原； （屏障环境中饲养, 种子群来源于无菌动物或剖腹产动物；饲养治理同清洁动物）无菌动物的特点：形状学及生理学特点： 形状学：盲肠肥大（增大5 6 倍）,肠壁薄,易发肠扭转；心脏、肝脏、脾脏相对较小； 生理学 :血中无抗体,巨噬细胞吞噬才能弱；体内不能合成维生素B 和 K；无菌鸡生长较快、无菌豚鼠和无菌兔生长较慢；无菌大小鼠与一般大小鼠生长速度相同；（3 饲养要求：隔离环境中饲养, 种子群来源于剖腹产动物或无菌卵的孵化；由于肠道无菌, 饲养困难,应留意添加各种维生素；每2 4 周检查一次动物的生活环境和粪便标本；悉生动物 ：概念： 悉生动物是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物；又称已知菌动物；植入一种细菌的动物叫单菌动物；植入两种细菌的动物叫双菌动物；植入三种细菌的动物叫 三菌动物；植入多种细菌的动物叫多菌动物；（由于肠道接种有利于消化吸取的细菌,故饲养较无菌动物简单 ,形状学和生理学方面与一般动物无异；）近交系：经至少连续20 代的全同胞兄妹交配培育而成,品系内全部个体都可追溯到起源于第 20 代或以后代数的一对共同祖先；特点：1、其基因纯合度达到98.6%,个体差异小,似同卵双生反应一样重复性好,用少量动物即可获得精确度很高的试验结果,个体相互之间可以接受皮肤、器官移植；2、隐性基因纯合使很多病态性状得以暴露,可获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型. 如高血压、白内障、糖尿病. 动物模型；缺点： 显现近交衰退； 近交衰退是近交过程中动物群体由于基因分别与纯合发生一系列不利于个体或群体发育的变化和现象；10F1 代动物：两个无关近交系杂交形成的第一代动物；特点： 虽然基因杂合, 但个体之间基因杂合的一样, 个体差异小； 除具有近交系的优点 , 仍具有生命力强耐受性强 , 可长期进行观看,具有杂交优势,个体相互之间可以接受皮肤、器官移植；封闭群动物（远交系） ：以非近亲交配方式繁衍生产的一个试验动物种群,5 年以上不从外部引新血缘或 至少繁衍四代以上 ,在封闭条件下交配繁衍, 保持了肯定杂合性和群体遗传特点；每代近交系数增加量<1 ；在人类遗传讨论、 药物挑选、 毒物试验等方面起着不行代替的作用等；突变系动物：指正常染色体的基因发生了变异,动物具有一种或多种遗传缺陷；例如：无胸腺裸鼠、严峻联合免疫缺陷动物SCID 小鼠；为肿瘤、免疫疾病的讨论供应了抱负的材料；试验动物生产与动物试验环境标准化：1、一般级环境：一级动物（一般级）2、屏障系统：二级动物（清洁级）三级动物（ SPF级）（亚屏障系统现已取消） 3、隔离系统：四级动物（无菌级）试验动物的挑选,如：对血压的影响,狗、猫、鼠易复制高血压模型；过敏反应,变态反应：豚鼠呕吐反应：狗对皮肤的局部作用：家兔、豚鼠、猪致热反应：兔,不能用狗（无汗腺或汗腺不发达） 动脉粥样硬化：鸽、鸡、家兔致癌作用：小鼠、大鼠考虑到品种品系放射病：狗（不用兔,特别敏锐）免疫： C57BL/6 国际通用小鼠；人类疾病动物模型的设计原就：相像性：复制的模型尽可能近似与人类疾病；重复性,牢靠性适用性和可控性易行性和经济性动物模型的复制方法：物理诱发方法：放射线（萎缩性胃炎）、机械损耗化学诱发方法：致癌剂（氨基半乳糖致大鼠肝硬化）化学毒物、强酸强碱烧伤等生物诱发方法：细菌、病毒、寄生虫、生物毒素等复合方法：如用细菌加冰冷方法复制豚鼠慢性支气管炎遗传工程方法： AIDS、老年痴呆症的动物模型试验动物中常见的人兽共患病有狂犬病、B 病毒病、流行性出血热、 淋巴细胞脉络丛脑膜炎、沙门氏菌病、结核、布氏杆菌病等；动物福利普遍认同的五大标准： 享有不受饥渴的自由 生理福利 享有生活舒服的自由 环境福利 试验动物福利和伦理的基本原就： 坚决防止没有科学目的的动物试验 享有不受痛楚损害和疾病的自由 卫生福利 享有生活无惧怕和哀痛感的自由 心理福利 享有表达天性的自由 行为福利 如有可能的替代方法,尽量应用替代方法,削减动物的使用量如动物试验可引起试验动物的疼痛,应在试验前实行必要的措施以防范或减轻疼痛对于一次性的动物试验,试验终止后,应当快速实行相应措施,使其“安乐死”在引起慢性疼痛的试验中,应尽可能地减轻其疼痛或排除其惧怕,试验终止后, 必需进行特殊照管试验动物的处死须采纳比较人道的方式；要求尽量采纳使试验动物短时间无痛楚死亡的方式主要有：颈椎脱臼处死法断头处死法放血处死法空气栓塞处死法过量麻醉处死法CO2 处死法“ 3R”原就：Reduction （削减）尽可能少用试验动物,不应盲目增大动物样品数量或重复试验Replacement （替代）使用发育级别较低的动物、使用细胞、细菌、离体器官等Refinement （优化）改善试验条件、提高试验技术、提高仪器水平,以减轻动物痛楚小鼠特点：小鼠的下颌骨的喙状突较小,髁状突发达,胃容量小（ 1.0-1.5ml）（豚鼠胃容量 2030ml ,大鼠胃容量 4-7ml ）；小鼠尾巴负责散热和维护平稳,小鼠无汗腺肺由 5 叶组成,右肺 4 叶（上、中、下和心后叶）,左肺为一整叶,雌鼠为双子宫、呈“Y”形, 新生小鼠赤裸无毛,全身为红色,闭眼,两耳与皮肤粘连,体重仅. g 体长 mm左右, 试验中最常用 18g 22g 的成年小鼠 ；妊娠期 19 21d,哺乳期 20 22d,交配后 10-12h ,雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓,可以利用阴道栓的显现作为运算妊娠起始时间的依据；：年育成,年由日本国立肿瘤讨论所引进我国；黑色；乳腺癌发病率低,对放射物质耐受力强；是肿瘤学、生理学、遗传学讨论常用品系；有学者统计, 是使用率最高的小鼠近交系；封闭群：白化小鼠,ICR 白化小鼠, NIH 白化小鼠突变系小鼠：突变系小鼠是指正常染色体的基因发生了突变,这种遗传变异造成后代的某个性状或生物反应与亲本不同,具有某种特殊性状表型的各种遗传缺陷的品系；突变品系： ob 肥胖小鼠：这种小鼠是由于 ob 基因单个基因缺陷所致,引起肥胖；体重可达60g, 诞生46 周就显示肥胖症 , 与人肥胖症相像；裸鼠（无胸腺, 细胞功能的缺失, 细胞功能基本正常,成年裸鼠有较高水平的 细胞活性,但幼鼠的细胞活性低下）小鼠 （严峻联合免疫缺陷小鼠、淋巴细胞自身不能分化成特异性功能淋巴细胞）糖尿病小鼠大鼠：大鼠皮肤缺少汗腺（小鼠皮肤无汗腺） ,汗腺仅分布于爪垫上,主要通过尾巴散热； 大鼠对养分缺乏特别敏锐 ,特殊是维生素 A 和氨基酸供应不足时, 可发生典型的缺乏症状； 大鼠胃容量 4-7ml , 胃中有一条皱褶,收缩时会堵住贲门口, 这是大鼠不会呕吐的缘由对饲养环境中湿度极为敏锐,相对湿度低于 40%时,易患坏尾病（坏尾病：空气干燥,相对湿度小于 40%结合高温,可引起大鼠尾部皮肤环状缩小） ,仍会引起哺乳母鼠食仔现象发生；大鼠 肝脏 共分 6 叶, 再生才能强,无胆囊；Y 型双角子宫, 胸部和腹部各有 3 对乳头；（小鼠 5 对,胸腹分别是 3 对和 2 对）新鼠体重约 5.510g, 周身无毛 , 耳贴连皮肤 , 耳孔闭合 . 一般用体重为 180g 220g 的大鼠做试验（试验中最常用 18g 22g 的成年小鼠） ,大鼠妊娠期为 1923 天,平均 21 天（小鼠妊娠期 19 21d,哺乳期 20 22d）常用的封闭群大鼠： SD大鼠, Wistar大鼠, long E 大鼠,其余为近交系大鼠,突变系大鼠中最闻名的的是SHR大鼠（自发性高血压大鼠） ,最适合挑选高血压药物的模型在生物医学讨论中,大鼠的用量仅次于小鼠,药物,行为学,老年病学,心血管（大鼠是讨论高血压的首选动物）,养分代谢讨论（ 大鼠对养分物质缺乏很敏锐）,口腔医学讨论（建立龋齿动物模型 ）,老年病学讨论；豚鼠：豚鼠胆小、温驯、对 外界刺激极为敏锐 ,豚鼠喜活动、爱群居,干燥清洁环境；体型短粗,无尾,头大颈粗两眼光明,耳壳教薄,对抗生素极为敏锐；由于缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶,因此不能合成维生素C, 胃容量 2030ml ,（小鼠胃容量小1.0-1.5ml）妊娠期为 5972d, 啮齿类动物中妊娠期最长者,哺乳期 23 周,新生鼠诞生后既能活动,新生仔体重约80g,生后即能活动,有被毛,眼耳张开,有门齿,几小时后即可自己采食； 一般用体重为 200g250g 的豚鼠做试验；FMMU白化豚鼠（南方医） ： 全身白色,眼睛红色,由于这种豚鼠血管和免疫反应较好, 因此在 皮肤急、慢性毒性试验和皮肤刺激反应肯定要用白化豚鼠；这种豚鼠仍广泛用于药理和毒理学的讨论；豚鼠生物医学讨论应用：1）药物学讨论1 、 皮肤刺激试验2 、致畸讨论3 、药效评判试验：平喘药和抗组胺药（ 2）免疫学讨论（ 3）传染病讨论（ 4）耳科学讨论 （5）养分代谢讨论豚鼠在生物医学讨论中的作用：1. 免疫学讨论：过敏反应及皮肤刺激试验；2. 药物讨论； 3.传染病讨论； 4. 耳科学讨论5. 其他应用：豚鼠剪断迷走神经引起肺水肿试验较其他动物更佳；是讨论维生素 C生理功能的最好模型； 豚鼠血管反应敏锐是讨论出血性炎症和血管通透性试验常用模型；豚鼠对缺氧耐受力强,是讨论缺氧耐受性及耗氧量测试常用模型；豚鼠饲养： 豚鼠的饲养主要是饲料中肯定要有足量的纤维素和维生素C（ 4-5mg/100g ）,有清洁寂静的环境,温度掌握在1之间；地鼠：有颊囊,具有贮藏食物的习性, 地鼠颊囊是缺少组织相容性抗原的免疫学特殊区, 是进行组织培育、人类肿瘤移植和观看微循环转变的良好区域；颊囊具有极强的贮藏才能；妊娠期为 14-17天, 是啮齿类动物中妊娠期最短者；哺乳期 20-25 天；雄鼠成熟时体重为100g 左右,雌鼠 120g 左右；易产生真性糖尿病, 易培育成糖尿病模型动物 （高脂高糖饮食） ；皮肤移植反应特殊 ,非近交系封闭群地鼠个体之间的皮肤相互移植均可存活,不同种群动物之间皮肤移植,就不能存活并被排斥；生物医学讨论应用： 1、肿瘤移植、挑选、诱发和治疗等讨论2、细菌、病毒和寄生虫的讨论 3、生殖生理和遗传学讨论4、糖尿病讨论兔：喜爱独居,群居性差,喜干厌湿,食粪特性,体温变化特别灵敏：兔正常体温在38.0-39.6之间 ,兔的体温变化特别灵敏,最易产生发热反应,表皮薄,真皮厚；兔生长发育快速,仔兔初生无毛,全身暴露,眼睛紧闭,耳闭塞无孔,脚趾相连,体重约为 50g；兔在正常生命活动中有两次换毛现象,一种是年龄性换毛,一种是季节性换毛；兔是刺激性排卵动物, 妊娠期为 29-36天,哺乳期40-45 天, 一年四季均可交配繁衍；兔的胸腔构造很特殊,暴露心脏时不需要做人工呼吸；饲养：兔舍温度应维护在16-29,相对湿度应维护在40%-70%,噪声 60dB 以下兔的常用品系：新西兰兔,大耳白兔,中国白兔,青紫蓝兔生物医学讨论应用： 1、 胆固醇代谢和动脉粥样硬化症的讨论2、发热讨论及热原试验3、眼科学 和免疫学试验4、皮肤反应 试验5、心血管和肺心病讨论6、生殖生理及胚胎学讨论7、微生物讨论8、失血性休克、肠毒素休克等急性动物试验、遗传性疾病和生理代谢紊乱等方面的研究小型猪：小型猪的妊娠期114 天左右,哺乳期 60 天左右；四肢坚实、鬃毛长,被毛下着生绒毛；一般成年个体体重30 40kg ,具有体型小、体质牢固紧凑、抗病力强、生长缓慢的特点, 特别适合于动物试验讨论；生物医学应用： 1、皮肤烧伤讨论2、 肿瘤讨论美洲辛克莱小型猪课作为黑素瘤的良 好模型 3、免疫学讨论无菌猪没有任何抗体4、心血管病的讨论 5、糖尿病讨论 6、产期生物学和畸形学讨论7、遗传性和养分性疾病的讨论8、悉生猪和猪心脏瓣膜的应用9、口腔学科讨论 10 、药理学讨论 11、器官移植方面的讨论12、外科学讨论遗传工程动物的定义：人为地运用如下技术等有目的地在基因水平改造动物的遗传物质组成,导致动物新性状的显现,并使其能有效地遗传下去,形成新的可供生命科学讨论和其他目的所用的动物模型,这类动物可被称为“遗传工程动物”（ Geneticallymodifiedanimals,GMAs）1. 转基因技术2. 基因敲除（同源重组技术,ZFNs, TALEN,CRISPR/Cas9）3. 转基因体细胞核移植技术4. ENU大规模诱变技术5. 其他基因敲除：指外源 DNA与受体细胞染色体上的DNA靶序列之间发生序列依靠的同源重组, 替代靶序列并整合在预定的特异位点,从而转变细胞遗传特性的遗传操作方法；基因敲除是在小鼠胚胎干细胞和同源重组技术基础上进展起来的,能依据预期方式转变生物活体遗传信息的技术手段；基因敲除技术已被广泛用于基因功能讨论和人类疾病动 物模型研制等；遗传工程动物的主要用途：基因功能讨论,人类疾病动物模型,生物活性物质生产, 异种移植器官的生产；转基因技术：用物理的,化学的或生物的手段将外源转基因倒入受体并使之表达的一种技术；转基因动物：指染色体上整合有外源性基因并能遗传给后代的一类动物；人类疾病动物模型：人类疾病动物模型animal model of human disease是指生物医学讨论而建立的、具有人类疾病模拟性表现的动物疾病模型和相关的模型系统材料；动物疾病模型：以动物整体作为讨论对象相关的模型系统材料：以器官、组织、细胞为讨论对象人类疾病动物模型的意义： 一 人类疾病动物模型在生物医学进展中的奉献 二 人类疾病动物模型在医学科学讨论中的重要作用 三 人类疾病动物模型在医学讨论中的特殊优越性： 防止了在人类身上进行试验所带来的风险临床上平常不易看到的疾病可以用动物复制发病率低、埋伏期长的疾病讨论可增加方法学上的可比性便利取材、简化试验方法 有助于全面熟悉疾病的本质人类疾病动物模型的分类： 按系统范畴分类： 1. 疾病的基本病理过程动物模型：是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型；如发热、缺氧、水肿、炎症等疾病基本病理过程的动物模型 ；2各系统疾病动物模型： 是指与人类各系统疾病相应的动物模型；如心血管、呼吸、消化、造血、泌尿、生殖等系统疾病模型,仍包括传染病、寄生虫病的动物模型； 按发生缘由分类： 1、自发性动物模型2、诱发性动物模型3、阴性动物模型 4、孤立动物模型 5、基因工程动物模型 : 指通过基因重组技术,转变动物的基因或基因组,使动物的遗传特性表现与人类疾病表现相像的动物模型； 按模型的性质分类1. 同源性模型（ homologous ）：动物的症状和疾病过程和人的相同；2. 同形性模型（ isomorphic）：动物的症状和人的相同,但诱因不同；3. 部分性模型 （partial）：虽然不能模拟人类疾病的全部过程,却可用于讨论的疾病某些方面或者用于疾病的防治作用；小 结 人类疾病动物模型设计原就1. 与人类疾病的相像性；2. 重复性； 不能重复试验结果的试验动物模型是没有意义的；3. 牢靠性； 复制的动物模型应力求牢靠地反应人类疾病,应具有该病的主要症状和体征, 简单自发地产生某些相应病变或易产生与待复制疾病相混淆疾病的动物就不宜选用； 4适用性和可控性； 复制动物模型时仍应考虑到临床的适用性和疾病的可控性,否就达不到试验目的；大、小鼠是最常用的试验动物,可用于多种药理毒理的试验讨论；但不肯定适合于全部试验讨论； 有的动物对某一样病因子特殊敏锐,试验中无法掌握, 极易死亡, 也不适用；5易行性和经济性；小结：试验动物模型设计留意事项1、留意模型要尽可能再现所要求的人类疾病2、留意所选用动物的有用价值3、留意环境因素对模型动物的影响4、不能盲目地使用近交系动物：近交系遗传背景清楚,个体差异小、反应均一,但在设计中要充分考虑以下因素：繁衍方法与自然状态不同,“有害”的隐形基因暴露和一些多基因掌握性状平稳被破坏 -近交衰退； 如：自发性糖尿病BB wistarRat ,常并发四周神经系统疾病,即使已形成的模型的品系也有可能（环境）发生基因突变（变种或断种）,国外常用两种近交系的杂交一代（F1）作为模型；个体间均一性好,试验的耐受性强,繁衍率高、抗病率强、可大量生产；封闭群动物 （远交系） 的遗传特性及反应性也相对稳固,可以大量生产, 但个体间的重复性和一样性没有近交系和F1 代动物好；5、动物进化程度高并不意味着全部器官和功能越接近于人6、正确地评估动物疾病模型试验动物环境： 定义： 指试验动物生长发育、繁衍交配、试验处理等赖以生存的全部外部条件的总和；试验动物环境包括外环境和内环境：外环境 outside environment 指试验动物饲育和动物试验设施以外的环境；外环境的变化直接影响内环境,因此应重视对外环境的掌握；内环境 inside environment指试验动物饲育和动物试验设施内的环境,即动物直接生活的环境,如温度、湿度、噪音和光照等；它又分为：内部大体环境和局部微环境；国标规定：试验动物相宜的相对湿度为40-70%,湿度过低时,室内干燥、灰尘飞扬,易引起试验动物呼吸系统疾病 ; 大鼠发生“环尾病” ,湿度低于 40%时适当的换气次数可以为动物供应充分的新鲜空气； 国标规定： 最小换气次数在 15 次/h ；风速为3<0.2m/s （屏障环境） ；换气次数越多,干净程度越高温度：屏障环境和隔离环境多数是：20-26 度氨浓度：小于等于14mg/mo最大日温差小于等于4 C噪声国标要求掌握在60 分贝以下；光照国标要求光照时间为：12h 明: 12h暗 或 10h 明: 14h暗啮齿类动物照度为： 15-20Lux饲养室每平方米面积收容的成年动物最大密度是小鼠100 只、大鼠 50 只、豚鼠 20 只、 兔 4只、狗 1 只、猴 1 只动物生物安全 试验室与生活区的距离应符合 GB19489和 GB50346 要求（最少 50 米） 烈性传染病、致癌、剧毒等试验应在负压系统 P3/P4 或有防护的设备内进行阴阳角均为圆弧形走廊净宽度应不小于1.5m；门净宽度不小于1m屏障环境（ Barrier environment）：进入系统的空气应经过初、中、高效三级过滤适用于饲育清洁级及无特定病原体SPF 试验动物；空气干净度要求达到7 级（屏障环境） ；隔离环境（ Isolation environment）：采纳无菌隔离装置以保持无菌状态或无外来污染物;隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌,动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统 ; 该设施适用于饲育SPF、悉生及无菌动物；空气干净度要求达到5 级或 7 级（隔离环境）试验动物设施的分类：依据空气净化的掌握程度不同分为三类：一般环境 Conventional environment:一般级试验动物,干净等级未作要求,但换气次数要求不低于 8 次/h ；屏障环境 （ Barrier environment）：进入系统的空气应经过初、中、高效三级过滤适用于饲育清洁级及无特定病原体SPF 试验动物； 空气干净度要求达到7 级；隔离环境 （ Isolationenvironment）：隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无 菌,动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统; 该设施适用于饲育SPF、悉生及无菌动物；空气干净度要求达到5 级或 7 级试验动物设施按设施的平面布局分类： 无走廊式（ No Corridors）单走廊式（ Single Corridor）双走廊式 （最常用）（ Double Corridors） 三走廊式 （最抱负）（ Three Corridors）按设施使用功能分类：试验动物生产设施试验动物试验设施试验动物特殊试验设施按试验动物设施内气流组织形式分类：乱流式（非单向流式） ,单向流式（层流室）进行科研动物试验前必需填写： 南方医科高校医学动物试验申请单南方医科高校试验动物讨论方案（伦理审查表）饲料的贮存：通风、干燥、凉快,存放时间不宜过长：原料贮存3 6 个月、粉状饲料 1 2 个月、动物性饲料13 个月、 颗粒料不超过3 个月；欢迎您的下载,资料仅供参考！致力为企业和个人供应合同协议, 策划案方案书, 学习资料等等打造全网一站式需求