试卷B-现代生物分析仪器原理与实验-试卷与答案(共6页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上姓名 学号 学院 专业 座位号 ( 密 封 线 内 不 答 题 )密封线线_ _ 诚信应考,考试作弊将带来严重后果！ 华南理工大学期末考试 现代生物分析仪器原理与实验 试卷B注意事项：1. 考前请将密封线内各项信息填写清楚； 2. 所有答案请直接答在试卷上(或答题纸上)； 3考试形式：闭卷； 4. 本试卷共 四 大题，满分100分，考试时间120分钟。题 号一二三四五总分得 分评卷人一、单项选择题（每小题2分，共30分。请填在下面表格中，否则不计分）12345678910DAABC A CCDB1112131415CBBBB1、某带一个电荷的化合物经质谱检测出分子离子峰的 m/z 为 67。从分子离子峰的质荷比可以判断分子式可能为 A. C4H3O B. C5H8 C. C4H7N D. C3H3N22、电磁辐射的微粒性表现在下述哪种性质上 A. 能量 B. 频率 C. 波长 D. 波数3、在使用热导检测器时，为了提高检测器的灵敏度，常使用的载气为 A. 氮气 B. 氢气 C. 氧气 D. 氦气4、俄国植物学家茨维特用石油醚为冲洗剂，分离植物叶子的色素时是采用 A. 液液色谱法 B. 液固色谱法 C. 凝胶色谱法D. 离子交换色谱法5、在紫外-可见分光光度计中，用于紫外波段的光源是 A. 钨灯 B. 卤钨灯 C. 氘灯 D. 能斯特光源6、在气相色谱法中,用于定性的参数是 A. 保留时间 B. 分配比 C. 半峰宽 D. 峰面积7、下列气体中, 不能用做气相色谱法载气的是 A. 氮气 B. 氢气 C. 氧气 D. 氦气 8、对聚苯乙烯相对分子质量进行分级分析，应采用下述哪一种色谱方法? A. 离子交换色谱法 B. 液-固色谱法 C. 空间排阻色谱法 D. 液-液色谱法 9、在液相色谱中,梯度洗脱适用于分离的是 A. 异构体 B. 沸点相近，官能团相同的化合物 C. 沸点相差大的试样 D. 极性变化范围宽的试样10、紫外-可见吸收光谱主要决定于 A. 分子的振动、转动能级的跃迁 B. 分子的电子结构 C. 原子的电子结构 D. 原子的外层电子能级间跃迁11、如果试样比较复杂，相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳定，要准确测量保留值有一定困难时，宜采用的定性方法为 A. 利用相对保留值定性 B. 利用文献保留值数据定性 C. 加入已知物增加峰高的办法定性 D. 与化学方法配合进行定性12、用气相色谱测定农作物中有机氯农药残留量，应选用哪种检测器 A. 热导 B. 电子捕获 C. 火焰光度 D. 氢火焰离子化13、在气相色谱法中，调整保留值实际上反映了哪些部分分子间的相互作用? A. 组分与载气 B. 组分与固定相C. 组分与组分 D. 载气与固定14、在气相色谱中，可以利用文献记录的保留数据定性，目前最有参考价值的是 A. 调整保留体积 B. 相对保留值 C. 保留体积 D. 调整保留时间15、CO2应有四种基本振动形式它的红外光谱图应有几个峰 A、1个 、2个 、3个 、4个二、填空题（每空1分，共20分）1、生物分析技术是对天然和合成生物产物中有效成分进行分离（英文：Separation）、辨别（英文：Identification）和定量（英文：Quantification）的一门技术学科。2、气相色谱仪的检测器包括：热导检测器、火焰离子化检测器、火焰光度检测器和电子捕获检测器。 3、依据固定相和流动相的相对极性强弱，把固定相极性大于流动相的极性的色谱法称为正相分配色谱法。4、根据液相色谱的用途不同，液相色谱可分为：制备型液相色谱和分析型液相色谱。5、质谱分析技术中，常见的质量分析器为： 四级杆 、离子阱 和飞行时间 。6、多原子分子振动的基本模式是：对称伸缩振动、不对称伸缩振动、剪式振动、平面摇摆振动、非平面摇摆振动和扭动振动。7、根据荧光物质的激发能量形式或发射荧光光谱的差异，分子荧光可分为：光致荧光、化学荧光和生物荧光。三、简答题（每题6分，共30分）1、什么是离心机？其测量单位RCF和rpm各代表什么物理意义？ 离心技术是利用强大的离心力将物理性质（如质量、浮力、沉降系数等）不同的悬浮液内微粒进行分离、浓缩的技术。离心技术特别适用于溶液量较小或沉淀黏稠的生物样品的分离。能产生强大离心力的机械装置就是离心机。RCF: 相对离心力rpm：角速度也常用转速n(r/min)来表达2、在生物样品制备中，经常用到的真空浓缩仪和冻干机，它们的用途是什么？在原理上有什么不同？ 真空浓缩仪和冻干机都是用来将样品中的溶剂去除，可以有效地保存样品的仪器。 真空离心浓缩仪应用于DNA/RNA、核苷、蛋白、药物、代谢物、酶或类似样品的浓缩合成物的溶剂去除，具有浓缩效率高，样品活性留存高的特点。 冷冻干燥机（简称冻干机）就是将含水物质，先冻结成固态，而后使其中的水分从固态升华成气态，以除去水分而保存物质的方法。在压缩空气干燥过程中，其冷冻干燥是通过降低压缩空气温度，使压缩空气中的水份析出。 3、什么是吸收光谱？电子跃迁所需吸收的能量是量子化的。当物质的分子在两个能级间跃迁所需的能量满足下面的关系式时，电子的跃迁将会产生吸收光谱。4、在质谱的分析过程中，谱图是如何产生的？ 将带电原子、分子或分子碎片按其质量或质荷比（mass-to-charge ration, m/z）的大小依次排列形成的图谱5、在质谱分析过程中，样品的离子化非常重要，决定了测试是否能顺利进行。请举出现在最常用于两种生物样品离子化的方法。如果你要得到某种蛋白抗体的质谱图，需要使用什么离子源？ 最常用于生物样品离子化的方法是：电喷雾电离（Electrospray Ionization-ESI）和基质辅助激光解吸电离(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization, MALDI) 由于蛋白抗体是一种带多个电荷的大分子，因此要有效电离这一类的离子，通常采用电喷雾电离。四、问答题（每题10分，共20分） 1、请将下段英文翻译成中文，并根据你所到知识，说明这种生物分析仪器的基本组成部分。简单地举例说明它在现代医药研发领域的重要作用。A spectrometer (spectrophotometer, spectrograph or spectroscope) is an instrument used to measure properties of light over a specific portion of the electromagnetic spectrum, typically used in spectroscopic analysis to identify materials. Electromagnetic radiation (EMR) is a form of energy emitted and absorbed by charged particles which exhibits wave-like behavior as it travels through space. The nature of EMR presents waveparticle duality，which postulates that all particles exhibit both wave and particle properties. 光谱仪是一种用于测定某些电磁光谱中光波性质的仪器，特别是用于光谱分析来鉴定物质。电磁辐射是一种由带电粒子发射或吸收的能量形式，在穿过空间的运动中可呈现出类似波的特征。电磁辐射的本质为波粒二象性，其特征为所有粒子都既有波的物理性质又有粒子的物理性质。以紫外可见光谱仪为例：它的仪器组成为：光源、色散系统、吸收池、检测器和信号显示系统注：这部分，学生可以结合课堂中讲述的光谱仪在现在医药研发的各个阶段的使用，来阐述其重要性。例如，在药物研发过程中，临床前和临床试验阶段，药物在合成和后期的检测中，会大量用到高效液相色谱和光谱联用，来检测药物的含量及纯度等。2、请设计一个实验，使用你所学过的生物分析仪器来测定所收集的1x106 HeLa细胞中蛋白含量。实验设计中要包括从细胞破碎到仪器测定的基本步骤，可能用到的实验试剂、实验仪器等（提示：使用BCA蛋白定量测定法）实验材料：含0.05%胰酶的PBS缓冲液，BCA试剂盒，96孔板实验仪器：细胞超声破碎仪，高速离心机（带温控），涡旋仪，酶标仪实验过程：1. 细胞收集：1）弃去细胞培养液。用PBS缓冲液清洗贴壁的细胞若干次。2）加入适量含有0.05%胰蛋白酶的PBS缓冲液，使细胞脱壁悬浮。3）用离心管收集细胞悬液。2. 细胞破碎：1）4低速离心，弃去上清液，沉淀为细胞。2）根据后续分析加入适量缓冲液。3）使用涡旋仪使细胞悬浮于缓冲液中。4）使用超声波细胞破碎仪破碎：选择合适的破碎能量、破碎时间和破碎次数。（选择的破碎条件要使细胞质膜及核膜破碎）3. 蛋白样品收集：4高速离心已破碎的细胞悬液，收集上清液（即待测液）。4. 蛋白浓度测定：1）根据BCA试剂盒的操作说明，配制合适梯度的标准样品，按照一定比例加入BCA工作反应液，于37孵育30min。2）在酶标仪上测定样品于562nm处的吸光值。3）绘制标准曲线，得到线性拟合方程，计算出样品蛋白浓度。注：本答案为标准答案。考虑到学生实践经验的缺乏等因素，需酌情给分。专心-专注-专业