生物分析化学简答题(共13页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上简述原子吸收分光光度计与紫外可见分光光度计的相同之处和不同之处。答：相同点: (1). 均属于光吸收分析方法，且符合比尔定律；      (2). 仪器装置均由四部分组成（光源，试样架，单色器，检测及读数系统）。两种光谱分析方法对光源要求的相同点是光源要稳定，操作简便且耐用。  不同点: (1). 光源不同。分光光度法是分子吸收（宽带吸收），采用连续光源，原子吸收是锐线吸收（窄带吸收），采用锐线光源；(2). 吸收池不同，且排列位置不同。分光光度法吸收池是比色皿，置于单色器之后，原子吸收法则为原子化器，置于单色器之前。光源：激发光源强度比吸收测量中的光源强度大；单色器：两个单色器，激发单色器和发射单色器；检测器：荧光强度很弱，检测器有较高的灵敏度；试样池：荧光分析中要求用石英材料。由于荧光强度与透过光强度相比小得多，在测量荧光时必须严格消除透过光的影响，在测量荧光计的仪器中，是在与入射光和透过光垂直的方向上来测量荧光。什么叫锐线光源？原子吸收光谱分析中为什么要用锐线光源？ 答：（1）能发射出谱线强度大、宽度窄而又稳定的辐射源叫锐线光源。（2）原子吸收法的定量依据是比尔定律，而比尔定律只适应于单色光，并且只有当光源的宽带比吸收峰的宽度窄时，吸收光和浓度的线性关系才成立。然而即使使用一个质量很好的单色器，其所提供的有效宽带也更明显大于原子吸收线的宽度。若采用连续光源的单色器分光的方法测定原子吸收则不可避免的出现非线性校正子曲线，且灵敏度也很低。故原子吸收光谱分析中要用锐线光源。3用玻璃电极测量溶液的pH前为何需用标准缓冲溶液进行校正？答：从理论上说，用玻璃电极测量溶液的pH时，可将玻璃电极和饱和甘汞电极组成原点池，测量原电池电动势，直接算出pH。实际上，由于玻璃电极常数随电极不同，溶液组成不同，使用时间的长短而发生微小变动，其变动值又不易测定，所以pH测定时，应先用一已知pH的缓冲溶液与玻璃电极组成原点池，测电动势。4. 简述偏离朗伯比尔定律的因素及避免方法答：非单色光；测定时，入射光必须是单色光，应选用最大吸收峰处的波长为入射光波长样品液浓度过高；一般测定浓度应小于0.01mol/l胶体，乳状液、悬浊液等产生光散射；可通过选择适合要求的仪器来避免，并定期进行保养和校正化学因素，被测组分发生解离、缔合、溶液间作用等因素使物质改变或浓度变化而发生偏离；可通过控制溶液的条件设法避免透光率测量误差；配置适当浓度的溶液，使其吸收度值在0.2-0.7。溶剂：溶剂可对样品溶液中待测组分的生色团的吸收峰高度、波长位置产生影响5.什么是光谱分析法，它包括哪些主要方法？答：当物质高温产生辐射或当辐射能与物质作用时，物质内部能级之间发生量子化的跃迁，并测量由此而产生的发射，吸收或散射辐射的波长和强度，进行定性或定量分析，这类方法就是光谱分析法。主要有原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光法、紫外可见分光光度法、分子荧光法法等。6.简述在电位分析法中TISAB的中文名称，组成及其作用。 答：TISAB为总离子强度调节缓冲剂 一般由NaCl,NaAc-HAc,柠檬酸钠组成；其作用有：确保试样溶液和标准溶液的离子强度一致；控制溶液的pH；掩蔽干扰离子。7.简述用电导滴定法测定溶液中HCl的浓度时溶液中电导值变化的趋势及其原因（用NaOH滴定）。（0OH-=198，0Cl-=76.34，0H+=349.8，0Na+=50.11） 答：在滴定开始前，由于氢离子的极限摩尔电导值较大，测定的溶液电导值也较大； 随着滴定的进行，溶液中H+和OH-不断结合成水，水不导电，在H+浓度不断下降的同时不断增加同等数量的Na+，但由于钠离子的电导能力小于氢离子，所以溶液的电导值不断下降； 在达到化学计量点后，随着过量的NaOH加入，溶液中增加了具有较强导电能力的OH-因而溶液的电导值又会不断增加。 8.简要谈谈你对仪器分析方法的看法及仪器分析与本专业的联系。答：仪器分析方法是化学、物理学、电子学等多种学科相互渗透的产物。因它在确定物质组成、状态和结构的测试中具有较高的灵敏度和快速等优点，因此，科研、生产及社会生活等诸多领域有广泛应用。作为检验系生物技术专业的学生，仪器分析方法成为了我们未来的敲门砖，不管是公司还医院都要用到这个方法。9.影响紫外可见吸收光谱的因素及如何影响？答：1.温度：（1）在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大 （2）在低温时，分子的热运动降低，分子之间能量交换减少，使得吸收峰产生红移，吸收强度增大，吸收峰变得比较尖锐（3）在高温时，吸收峰谱带变宽，精细结构消失2.溶剂：溶剂不同，物质吸收光谱和最大吸收峰位置可能不同，测定过程中必须固定溶剂并加以标明3酸度：酸度不同，吸收光谱形状，最大吸收峰的位置和吸收强度都不同，测定时须控制溶液酸度值10.色谱分离度影响因素？1、 答：（1）容量因子：容量因子增大，分离度增大，最佳范围为2-5；k若大于5，R增大程度降低k若大于15，分析时间长，色谱峰较平坦，不利于定性、定量分析k若大于10或小于1，可改变流动相极性，使其在110范围内 （2）相对保留值：相对保留时间增大，分离度增大；相对保留时间（a）增大，分离度增大，为达到分析目的，可通过改变梯度，洗脱程序,温暖程序（3）理论塔板数：理论塔板数增大，峰越窄，分离效果越好。11.简述引起毛细管电泳谱带变宽的主要因素有哪些？ 答：有纵向扩散、焦耳热、进样长度和溶质与管壁相互作用等因素。纵向扩散的原因是因为胶体的布朗运动，可认为是在进样塞小，没有溶质管壁互相作用等理想条件下，对样品区带展宽有贡献的唯一因素；由于电流通过而产生了焦耳热，导致毛细管中心温度高于管壁，使毛细管内缓冲液粘度变化而导致区带变形，可降低电场强度、减小毛细管内径、降低缓冲液浓度、主动控温等方式减小该影响；在HPCE中，减小进样塞长度非常重要，实际操作控制进样长度在毛细管总长的12%；溶质与管壁的相互作用程度极其有害，会出现拖尾峰，增加缓冲液浓度、调节PH可减小该影响。12.分子光谱为什么是带状的？（心里清楚不代表能表达清楚哦）答案：在分子中，除了有原子的核能E0、质心在空间的平动能Et外，还有电子运动能Ee、原子间相对振动能Ey、分子转动能Er。其中，电子间能量差距最大，每一电子能级上有许多振动能级，每一振动能级内又有许多转动能级，分子的无规则热运动相互碰撞会导致分子振动或转动能级的微小变化，这样就导致了分子光谱的振动跃迁为一组组密集谱线，分辨率不高时就成为了谱带。13.发射光谱与荧光光谱的定义上有什么区别？答案：发射光谱：物质的分子、原子或离子接受外界能量使其由基态或低能态跃迁至高能态（激发态）再由高能态返回到基态或低能态产生的光谱； 荧光光谱：也是一种发射光谱，它的产生是由于物质的分子或原子接受辐射能使其由基态或低能态跃迁至激发态，再返回到基态过程中先以无辐射跃迁的方式释放出部分能量，回到第一激发态，再以辐射的形式回到基态，由此产生的光谱。14.写出铜锌原电池的电池表达式！（答案：Zn|ZnSO4(a1)CuSO4(a2)| Cu） 15.原子吸收的背景校正方法有哪些？答：（1）用非吸收线扣除背景。 （2）用氘灯或卤素灯扣除背景。 （3）利用塞曼效应扣除背景。16.简述显色反应的概念及应满足的条件。答：选用适合的试剂，与待测离子反应生成对紫外或可见光有较大吸收的物质再进行测定，这种反应称作显色反应。应满足的条件有：生成的物质必须在紫外-可见光区有较强的吸光能力，即摩尔吸光系数较大。反应有较高的选择性。反应生成的物质有足够的稳定性。反应生成物的组成恒定。17.简述双波长分光光度法的操作原理紫外可见分光光度法测定溶液中a离子浓度时，b离子对其有干扰，选取对b离子等吸收的两个波长1、2，用这两个波长分别照射样品溶液，由检测器测出的吸收度是这两个波长下吸收度的差值A，与被测定物质的浓度成正比，这个方法称双波长分光光度法。18.极谱分析法分析法定量和定性分析的依据？答：超过分解电压后，外加电压稍许增加，电流就迅速升高，此时的电压成为扩散电流。当电压增加到一定的数值后，外加电压增加，电流不再增加，即达极限值，此时的电流成为极限电流。极限电流减去残留电流就是极限扩散电流，它与溶液中离子的浓度成正比，是极谱分析法定量分析的基础。与极限扩散电流一半处相对应的滴汞电极的电位，成为半波电位，在一定条件下，半波电位是离子的特性常数，而与离子的浓度无关，半波电位是极谱定性分析的依据。19.为什么荧光分析法的灵敏度比紫外分光光度法高？答：荧光分析法中与浓度相关的参数是荧光物质发射的荧光强度，测量的方式是在入射光的直角方向，即在黑暗背景下检测所发射光的强度信号，因此可采用增强入射光强度或增大检测信号的放大倍数来提高灵敏度。在分光光度法中与浓度相关的参数是吸光度，而在吸光度A=IgI0/I，如果增大入射光强度，相应也增大了透射光强度，所以其比值不会变化，如果增大检测器的放大倍数，检测到的入射强度和透射光强度也同时增大，同样不能提高其比值，也就不能达到提高灵敏度的目的。所以，荧光分析法的灵敏度比紫外分光光度法高，一般要高23个数量级。20.简述极谱分析法的特点。答：1、灵敏度高，准确度好。其测定的浓度范围为102105 mol/L，相对误差为±2%5%。2、分析所需试样量少，分析速度快。分析时，只需取少量试样，几分钟便可完成测定。3、重复性好。分析后的溶液成分实际不变，被分析过的溶液可重复进行测定。4、应用范围广。凡在滴汞电极上可发生氧化还原反应的组分大都可测定。21.试述气相色谱法的特点。 答：气象色谱法是以气体为流动相的色谱分离、分析方法。由于气体粘度小，扩散速率高，传质快，因而该方法具有很多优点：（1） 高选择性，高选择性是对色谱体系热力学性质而言，指性质极为相似的组分的对映体能得到很好分离。（2） 高柱效，它是对色谱体系的动力学性质而言。色谱柱在最佳操作条件下，具有高的理论塔板数，使复杂、多组分的样品在固定相和流动相间进行103106次的分配而达到分离。（3） 高灵敏度，指可使用高灵敏度的检测器，可检测环境样品中ug·L-1 ng·L-1数量级的残留。（4） 分析速度快，一次分析几百个组分，只要几分钟到几十分钟。（5） 应用范围广，能分析气体以及在500摄氏度以下能气化的样品，通过化学衍生化可以使高沸点、不易气化的样品转化成低沸点、易气化的样品。 22.高效液相色谱柱有哪几种类型？细管径柱有什么优点？ 答：高效液相色谱柱大致可分为三种类型：内径小于2mm的称为细管径柱或微管径柱；内径为25mm的是常规高效液相色谱柱；内径大于5mm的一半称为半制备柱或制备柱。细管径柱的主要优点有：（1） 分离效能高；（2） 流动相最佳流速低，消耗量少；（3） 可采用多种检测器，便于连用（CLC-MS,CLC-FTIR）;（4） 采用细而短的毛细血管住可以提高分析速度，实现快速分析。23.分子产生荧光必须具备的条件？答：（1）分子具有与入射光频率相适应的分子结构，才能吸收入射光而激发。 （2）分子激发后，必须具有一定的荧光效率，荧光效率=24.为什么用直接电位法测定溶液pH时，必须用标准pH缓冲溶液校正仪器？ 答：用直接电位法测定溶液pH时计算公式为,式中K为数值未知的常数，为第小K值的影响，必须用标准pH缓冲溶液校正仪器，然后按进行自动直接测定。，这样才可以对溶液的酸度进行准确的测定。25.从色谱溜出曲线上可以得到那五个方面的信息？答：根据色谱峰的个数可以判断样品中所含组分的最少个数据色谱峰的保留值，可以进行定性分析据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析色谱峰的保留值及其峰宽是评价色谱柱分离效能的依据色谱峰间的距离是评价股定向或流动相选择是否合适的依据26.以pH玻璃电极为例，简述膜电位的产生机理 ISE是对某种产生选择性响应的电化学感受器，由敏感膜、内参比溶液、内参比电极组成，试样溶液中被测离子与敏感膜中离子发生离子交换而产生膜电位响应27.伏安分析法中干扰电流及其消除方法 （1）迁移电流：离子受到电场作用发生迁移而产生迁移电流（2）残余电流：微量杂质如、在地宫电极上还原形成或电解过程中产生的充电或电容电流，可通过作图法扣除或电容补偿装置消除（3）极大电流 可加入表面活性剂消除（4）氧波 在中性或酸性溶液中可通入氮气、氢气消除 中性、碱性电极中可加入消除通常于微酸性溶液中加入抗坏血酸，义还原氧而除去干扰 酸性溶液中加入消除将氧带出来（5）氢波 酸性 电位在1.21.4V，开始发生反应 碱性 电位在1.4V一下开始发生反应 28.原子吸收光谱法使用比尔定律时，为什么必须采用锐线光源？ 原子吸收光谱法进行定量分析的理论基础是需要对吸收线轮廓所包含的吸收系数进行积分，该吸收系数积分值代表总的吸收。若能够测量吸收系数积分值，则可求得被测元素浓度。但是，实际工作中，要测量半宽度仅为0.001-0.005nm的原子吸收线的吸收系数积分值，需要单色器的分辨率R（设波长为500nm）达到是很困难的。另外，若采用连续光谱，把半宽度很窄的原子吸收线叠加在半宽度很宽的光源发射线上，这样的条件下，要准确记录其发射线被吸收后减弱的程度，这也是很困难的，用锐线光源代替连续光源，即必须用一个与吸收线中心频率相同，半宽度比吸收线更窄的发射线作为光源，才能解决原子吸收测量难题。29. 紫外可见分光光度计的基本结构示意图，影响紫外可见光谱的因素以及可能出现的谱带变化？ 答：光源单色器吸收池检测器信号显示系统；光源提供入射光，单色器的作用是将来自光源的复合光分解 为单色光并分离出所需波段光束。吸收池用来盛放北侧溶液，检测器作用是光 信号换为电信号，信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显示或记录下来。 物质的分子结构，测量条件，溶剂的极性，温度,溶液的PH； 谱带红移，谱带蓝移，强度发生改变，精细结构出现或消失。30. 作为化学发光剂的条件？ 答：1，发光的量子产率高 2，他的物理化学特性要与被标记或测定物质相匹配 3，能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物 4，其化学发光常是氧化还原的结果 5，在所使用的浓度范围内对产生物体没有毒性31.请简述生物分析化学中基本的的分析方法（三种即可）。并陈述其优缺点及适用的范围（在所学范围内）。 答：目前基本的分析方法有：1.校准曲线法。2.标准对比法。3.标准加入法。 1.校准曲线法适用于紫外-可见分光光度法、分子发光分析法（荧光分析的定量方法）、原子吸收光谱法以及电位分析法（离子选择性电极）等等一系列实验中。优点在于：多个样品，容易找出误差较大的数值，从而不影响实验结果。缺点：定量测定需要在线性范围内进行（有浓度范围限制）。多个样品测量，操作复杂、不方便。基体影响大，只适合于组成比较简单的试样分析。 2.标准对比法适用于：紫外-可见分光光度法等。 优点：操作简单、快捷。缺点：标准品一定不能出错，否则误差较大，且只能在线性范围内。 3.标准加入法适用于： 优点：能消除分析中的基体干扰。缺点：此法不能扣除分析中的背景吸收。所加入的标准溶液中元素浓度()应尽量与试样中被测元素的浓度()接近。要使吸光度值尽可能在线性范围和适宜读数范围内。32.请简述荧光分光光度计原理且谈谈你对化学发光分析法的理解及其应用。 （原理图）化学发光分析法是 利用 化学反应自身产生的能量作为激发能，使分子被激发。再由第一激发态最低震动能级回到基态各个振动能级并发射光量子的现象。其产生的条件：化学反应有足够能量将产物分子激发，且激发态分子能放出光量子。根据发光总强度与 浓度成正比，进行定量分析，且发光总强度与时间无关。利用这一特点，可用来检测氨基酸、ATP、半乳糖、尿酸、胆固醇、细菌发光等等。33.在紫外可见光度法中，通常选择吸光物质的最大吸收波长作为分析波长，分析原因。（1）能保证测定有较高的灵敏度（2）此处曲线较为平坦，吸光系数变化不大，对朗伯比尔定律的偏离程度比较小 34.列举5个色谱参数以及他们的作用？基线：在一定操作条件下，色谱柱后没有组分，仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。反映了检测器及操作条件的稳定程度。 色谱峰：当组分随流动相进入检测器时，检测器的响应信号随时间变化所形成的峰形曲线。反映：信号的强弱。峰高和峰面积：色谱峰顶点到峰底之间的垂直距离。峰面积：峰与峰底之间的面积。峰高和峰面积：可用于定量分析。保留时间：从进样开始到柱后被测组分出现浓度最大值时所需的时间。死时间：不被固定相滞留的组分，从进样开始到柱后出现浓度最大值所需的时间。35.在用色谱法测定物质时，利用相对保留值定性有什么优点？答：因相对保留值与固定相的种类和柱温有关，不受流动性流速，填充情况等因素的影响，因而能够用其消除实验条件不一致带来的误差。所得结果较真实可靠。36.极谱分析法中，当滴汞电极表面带负电时，分别测定正离子、负离子、中性分子的扩散电流时，试讨论三种情况下迁移电流的贡献。如何消除迁移电流的干扰？答：滴汞电极是被测离子在其表面发生还原反应的电极，它的电位随外电压的增大而减小。由题知当反应物为正离子时，迁移电流的方向与扩散电流的方向相同，从而使极限电流增大。当反应物为负离子时，迁移电流的方向与扩散电流的方向相反，从而使极限电流减少。中性分子不产生迁移电流，无影响。要消除迁移电流，应向溶液中加入大量的支持电解质，其浓度要比被测物质浓度大50-100倍。37.简述偏离Beer定率的因素及避免方法。（1） 化学因素：溶液中溶质可因浓度改变而有离解、缔和与溶剂间的作用等原因而发生偏离Beer定律的现象，有时可通过控制溶液的条件设法避免。（2） 光学因素：非单色光、杂散光、非平行光、散射光和反射光，可以通过选择适合要求的仪器，并对仪器进行定期的保养和校正，按要求正规操作同时作空白实验。（3） 透光率测量误差：配制适当浓度的溶液，使其吸光度值在0.20.7。38.简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素。如何减小色谱峰扩张，提高色柱？答：主要因素在有涡流扩散，流动相传质，静态流动相传质，固定相传质和柱外效应。可通过减小填料颗粒直径和填料孔穴深度，提高装填的均匀性，用地黏度的溶剂做流动相，并采用低流速，死体积小的进样器、检测器接头和传输管线来提高柱效。39. 何谓色谱分析的分离度与程序升温？答：分离度也称分辨率或分辨度，它是指相邻两色谱峰保留值（或调整保留值）之差与两峰底宽平均值之比，它是衡量相邻两色谱峰能否分离开和分离程度的总分离效能指标。程序升温是指在一个分析周期内，炉温连续地随时间由低温到高温线性或非线性地变化，以使沸点不同的组分各在其最佳柱温下流出，从而改善分离效果和缩短分析时间。它是对于沸点范围很宽的混合物，用可控硅温度控制器来连续控制柱炉的温度进行分离分析的一种技术方法。40.什么是基准物质?什么是标准溶液?答：基准物质是能用于直接配制或标定标准溶液的物质；标准溶液是一种已知准确浓度的的溶液。41.原子发射光谱分析所用仪器装置由哪几个部分组成，其主要作用是什么？ 答：原子发射光谱分子所用的仪器通常由光源分析仪和检测器三部分组成。光源的作用是提供能量，使物质蒸发和激发。分光仪的作用是把复合光分解为单色光，即起分光作用。检测器的作用是进行光谱信号的检测，常用检测方法有摄谱法和光电法，摄谱法是用感光板记录光谱信号，光电法是用光电信号管等元件检测光谱信号。42.色谱图上色谱峰，流出曲线可说明什么问题？答：（1）根据色谱峰的数目可判断样品中所含组分的最少个数 （2）根据峰的保留值进行定性分析 （3）根据峰的面积或高度进行定量分析 （4）根据峰的保留值和区域宽度判断色谱柱和分离效能 （5）根据两峰的距离可评价固定相及流动相选择是否合适43.光谱分析中以max为测量波长的好处可能有：分子在此处最大，信号强，从而于此处灵敏度高；实际激发光为一段范围内的复合光，选择吸收峰波长，激发光波长范围变化较小，吸收能力的变化就不大，朗伯比尔定律的偏移程度就小，检测范围就可扩大；不同浓度的同一物质，在max处吸光度相差最大，而对于物质的定量检测，采用最大波长就可提高准确性。 44.有学习中可了解到，一种分析检测技术的发展都是建立在物质的某种理化性质上的，存在一种已被理论证实的函数关系，且有关该项性质的某个指标值大小可代表各物质的特性，这可能是探索研究新的分析检测技术的理论猜想的入口。已了解过的分析技术概括：包括定性、定量的依据等45.简述影响谱线变宽的因素，并叙述他们分别对原子吸收光谱有什么影响。答案：（1）热变宽：又称多普勒变宽，是由于原子在空间的无规则热运动所引起的。温度越高，热变宽越大，吸收线变宽月严重。（2） 压力变宽：由于在一定压力下粒子间相互碰撞而引起能级变化所致的吸收线展宽成为压力展宽。鸭梨越大，变宽就越严重。·（3） 自吸变宽：由自吸现象而引起的谱线变宽成为自吸变宽。灯的电流越大，自吸变宽越严重。（4） 场致变宽：主要是指电场和磁场的影响使线谱变宽。在一定条件下可以忽略。（5） 其它影响因素：同位素效应等。46.紫外及可见分光光度计和原子吸收分光光度计的单色器分别置于吸收池的前面还是后面?为什么两者的单色器的位置不同? 答： 紫外及可见分光光度计的单色器置于吸收池的前面, 而原子吸收分光光度计的单色器置于吸收池的后面。紫外及可见分光光度计的单色器是将光源发出的连续辐射色散为单色光, 然后经狭缝进入试样池。原子吸收分光光度计的光源是半宽度很窄的锐线光源, 其单色器的作用主要是将要测量的共振线与干扰谱线分开。47.什么是梯度洗脱？液相色谱中，梯度洗脱适用于分离什么样的混合物？梯度洗脱的作用有哪些？答：在液相色谱分离过程中通过改变流动相组成，或流动相浓度使组分充分分离的方法。梯度洗脱适用于复杂样品，特别是保留值相差很大的混合物的分离。梯度洗脱技术可以改善峰形，减少拖尾，缩短分离时间，降低最少检测量，提高分析精度。48.画出高效液相色谱仪基本结构示意图。答：储液瓶高压泵进样器色谱柱检测器记录系统49.紫外-可见分光光度法有哪些用途？答：a 物质的鉴别 b 药物纯度检查 c 测定无色溶液 d 测定有色溶液 e 有机物的结构分析 50.简述毛细管电泳的基本原理。 答：毛细管电泳的基本原理包括电泳原理和色谱原理。电泳原理是指带电粒子在一定介质中因电场作用而发生定向移动，因带电粒子所带的电荷数，带电粒子形状、离解度等不同，带电粒子在电解质中迁移速率不同而分离。色谱原理是指不同组分在两相（固定相和流动相）中的分配系数不同而分离。51.原子吸收分析中会遇到那些干扰因素？简要说明各用什么措施可抑制上述干扰？答：a、光谱干扰，是指光源谱线不纯及火焰中吸收谱线的干扰。前者是由于空心阴极灯阴极材料不纯或相邻谱线太靠近引起的。解决的办法是纯化材料或选择其他谱线;后者是式样中的杂质元素引起的。可采用化学分离方法消除。b、物理干扰，主要是由于式样中的物理性质及测试中的其他因素引起的.如温度、雾化率等，解决的方法是选择最佳实验条件。c、化学干扰，包括低电离电位元素的电离干扰，火焰中难容化合物形成等，解决方法可选用合适的缓冲剂，稀释剂等。52.原子吸收光谱的特点答：采用锐线光源，选择性强，干扰较小 灵敏度高，可达 准确度高，误差小于1% 样品不需要分离，分析速度快 需要更换灯源，仪器附件多，操作不方便53.消除迁移电流的方法（支持电解质的名词解释以及举例）和原理答：（1）方法：在试液中加入大量电解质。为消除迁移电流所加入的电解质称为“支持电解质”，它们是一些导电良好，但在电解条件下又不起电极反应的所谓“惰性电解质”，如等。 （2）原理：由于电解质在溶液中电离为阳离子和阴离子，阴极对所有阳离子都有静电引力，因此作用于被测阳离子的静电引力大大减弱，以致由静电引力所引起的迁移电流趋近于零，从而达到消除迁移电流的目的。54.色谱法有哪些类型？为什么说色谱法的优势表现在分离上？色谱法的分类有很多种方法，最常见的分类是根据两相所处的状态进行分类，根据流动相的状态分为气相色谱法，液相色谱法，超临界流体色谱法。由于组分在两相间进行的吸附，脱附或分配等作用，是不间断的“多次”重复过程（可高达106次），所以，被分离的组分可用较短的时间实现高效的分离。55.残余电流产生的原因是什么？它对极谱分析有什么影响？答：残余电流的产生主要有两个原因，一为溶液中存在微量的可以在电极上还原的杂质，二为充电电流引起。它对极谱分析的影响主要是影响测定的灵敏度。56.能否根据理论塔板数来判断分离的可能性?为什么?答：不能,有效塔板数仅表示柱效能的高低,柱分离能力发挥程度的标志,而分离的可能性取决于组分在固定相和流动相之间分配系数的差异。57.简述一下荧光分析定量分析法中的标准对照法前提是荧光物质的校准曲线通过零点。取已知量的纯荧光物质，配成浓度在线性范围内的标准溶液，测定其荧光强度。然后再同样条件下测定试样溶液的荧光强度。分别扣除空白，由标准溶液的浓度和两个溶液的荧光强度比，求出试样中荧光物质的含量。58.简述毛细管区带电泳和胶束电动毛细管色谱的异同点。 答：毛细管区带电泳是利用被分离离子在电场作用下移动的速率不同（电泳淌度差异）而实现分离的一种高效分离技术。毛细管中电解质溶液的移动是电渗引起的。毛细管区带电泳只适合于离子或可电离物质的分离。胶束电动毛细管色谱是在毛细管区带电泳的基础上派生出的一种高效分离技术。在毛细管区带电泳的缓冲溶液中添加浓度高于胶束临界浓度的表面活性剂，使其形成胶束相；因此，被分离对象在电场作用下的移动速度不仅取决于受电渗流和自身电泳，而且与它们在胶束相与水相之间的分配系数有关。胶束电动毛细管色谱可用于离子、可电离物质以及中性化合物的分离。59. 气相分子吸收光谱法的特点答：与常用的分光光度法相比较,GPMAS具有以下的分析特点: 测定速度快,对水样而言,一些成分,如NO2-N,NO3-N及硫化物,从取样到测定出分析结果,约2分钟就可完成. 测定手续简便,省时,省力,易操作,易掌握.所用玻璃器皿和化学试剂较少,样品的分析成本低. 方法不使用对人体有害的化学试剂,特别是易致癌的化学试剂,如有毒汞及N-(1-萘基)-乙二胺盐酸盐等试剂,无二次污染. 抗干扰性能强,被测成分分解成气体,从液相转入气相的同时就是一个简便快速分离干扰过程,所以一般不用复杂的化学分离手续,尤其不需要去除样品颜色和浑浊物的干扰. 测定结果准确可靠,一般水样的加标回收率在95-105%之间,重复测定(n=6)的相对标准偏差约2%. 测定成分浓度范围宽,低浓度和高浓度均可测定,测定下限60.影响液固吸附色谱分离的主要因素有哪些，正确选择流动相应依据哪些基本原则？答：流动相的改变会影响样品在两项中分配的差异，其流速的变换会影响保留时间和峰形。选择流动相的基本原则稳定性。主要是指柱效率或柱子的保留性质要长期不变。适应所采用的检测器。能溶解待分离样品。清洗方便。粘度要小一些。61.分析化学中常用的分离和富集方法有哪些?(回答不能少于8种方法)  答：沉淀，蒸馏，萃取，纸层析，薄层色谱，气相色谱，液相色谱，离子交换等。62.用吸光光度法测定某一金属离子,共存离子组分会干扰,有哪些办法可以消除干扰? 答：可以通过提高酸度，加入隐蔽剂，改变价态； 选择合适参比，如褪色空白(铬天菁S测Al，氟化铵褪色，消除锆、镍、钴干扰)； 选择适当波长等消除干扰。63.举例说明生色团和助色团，并解释红移和紫移。答：广义地说，生色团是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团严格地说，那些不饱和吸收中心才是真正的生色团，如苯环等助色团 带有非键电子对的基团（如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等），它们本身不能吸收大于200 nm的光，但是当它们与生色团相连时，会使其吸收带的最大吸收波长max发生移动，并增加其吸收强度红移和紫移 在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长max发生移动向长波方向移动称为红移向短波方向移动称为紫移(蓝移)64.试述原子吸收分光光度计中原子化器的种类和作用？ 答：常用的原子化器有火焰原子化器、无火焰原子化器和氢化物原子化器。作用是 将试样中的待测元素转变成原子态的蒸气。65. 与紫外可见分子吸收光谱法不同，荧光样品池的四面均为磨光透明面，为什么？ 答：为了消除入射光及散射光的影响，荧光的测定应在与激发光呈直角的方向上进行，因此荧光样品池的四面均为磨光透明面。66.在液相色谱法中，为什么可分为正相色谱和反相色谱？各有什么含义？ 采用正相及反相色谱是为了降低固定液在流动相中的溶解度从而避免固定液的流失。当使用亲水性固定液时常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性，称为正相液液色谱；反之，若流动相的极性大于固定相的极性则称为反相液液色谱。67. 为什么原子发射光谱法对火焰温度变化比原子吸收更为敏感？68. 原子发射光谱法以测定发射线为基础，火焰温度的变化会对激发态原子数及电离原子数产生重大的影响；而原子吸收光谱法是以未被激发的原子为基础，根据玻尔兹曼方程，火焰中原子大部分以基态形式存在，与温度的依赖关系较小，故原子发射光谱法对火焰温度的变化比原子吸收和原子荧光光谱法更为敏感。69.在电位分析法中，离子强度调节液应该包含那些组分物质？各起什么作用？在电位分析法中，用标准曲线法进行定量分析时，需要在标准溶液和试样溶液中加入（ISA）。主要有三个作用：加入盐，保持标准溶液和试样溶液的总离子强度及活度系数相同；加入缓冲剂/溶液，使pH值稳定；加入络合剂，掩蔽干扰离子。70.当下述参数改变时: (1)增大分配比, (2) 流动相速度增加, (3)减小相比, (4) 提高柱温, 是否会使色谱峰变窄? 为什么?答：(1)保留时间延长,峰形变宽 (2)保留时间缩短,峰形变窄 (3)保留时间延长,峰形变宽 (4)保留时间缩短,峰形变窄71.什么是标准曲线法？如何绘制标准曲线？ 答：配置一系列不同含量的标准溶液，以不含被测组分的空白溶液作参比，在相同条件下测定标准溶液的吸光度绘制吸光度-浓度标准曲线，再在相同条件下测定未知式样的吸光度，根据朗伯比-尔定律，在吸收池厚度不变，其他条件相同的情况下吸光度 与浓度之间有线性关系，从标准曲线上就可以找到与之相对应的未知试样的浓度。 标准曲线的绘制：1.按选定的浓度配置一系列不同浓度的标准溶液 2.测定每一浓度的吸光度（同一浓度至少应同时做两管测得的吸光度基本相同取平均值）3.用坐标纸绘制标准曲线。72.参比溶液的作用是什么？常用的有哪些方法？答：用于调节A=0，以消除溶液中其它成分的吸收以及比色皿对光的吸收和反射。 a. 溶剂参比 b.试剂参比 c.试样参比 d平行操作参比73.阐明下列术语的含义：电容电流；迁移电流。答：电容电流电容电流是由于汞滴表面与溶液间形成的双电层，在与参比电极连接后，随着汞滴表面的周期性变化而发生的充电现象所引起的。此电流与滴汞电极的电位有关。迁移电流迁移电流是指主体溶液中的离子，受静电引力的作用到达电极表面，在电极上还原而产生的电流。它和扩散电流的本质区别在于离子从主体溶液到达电极表面的过程或机理不同。扩散电流基于扩散力，与电极附近的浓度梯度成正比；迁移电流是基于电引力，与电极附近的电位梯度成正比。专心-专注-专业