酱腌菜检测作业指导书(共48页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上云 南 阳 光 食 品 有 限 公 司酱腌菜检测作业指导书目 录第一章 水分的测定 1第二章 食盐的测定 5第三章 总酸的测定 8第四章 还原糖和总糖的测定 9第五章 二氧化硫残留的检测 11第六章 亚硝酸盐和硝酸盐的测定 12第七章 总砷的测定 16第八章 铅的测定 18第九章 大肠菌群的检测 20第十章 菌落总数的测定 25第十一章 沙门氏菌检验 29第一章 水分的测定执行标准：GB5009.32011食品安全国家标准 食品中水分的测定第一法 直接干燥法 1 原理 利用食品中水分的物理性质，在101.3 kPa（一个大气压），温度101105下采用挥发方法测定样品中干燥减失的重量，包括吸湿水、部分结晶水和该条件下能挥发的物质，再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含量。2 试剂和材料 除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯。2.1 盐酸（优级纯）、氢氧化钠（NaOH）（优级纯）、 盐酸溶液（6 mol/L）（量取50mL盐酸，加水稀释至100mL）、氢氧化钠溶液（6mol/L）（称取24g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL）、 海砂（取用水洗去泥土的海砂或河砂，先用盐酸煮沸0.5 h，用水洗至中性，再用氢氧化钠溶液煮沸0.5h，用水洗至中性，经105干燥备用） 3 仪器和设备 扁形铝制或玻璃制称量瓶、电热恒温干燥箱、干燥器（内附有效干燥剂）、天平（感量为0.1mg）4 分析步骤 4.1 固体试样：取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶，置于101105干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，加热1.0h，取出盖好，置干燥器内冷却0.5h，称量，并重复干燥至前后两次质量差不超过2mg，即为恒重。将混合均匀的试样迅速磨细至颗粒小于2mm，不易研磨的样品应尽可能切碎，称取2g10g试样（精确至0.0001g），放入此称量瓶中，试样厚度不超过5mm，如为疏松试样，厚度不超过10mm，加盖，精密称量后，置101105干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，干燥2h4h后，盖好取出，放入干燥器内冷却0.5h后称量。然后再放入101105干燥箱中干燥1h左右，取出，放入干燥器内冷却0.5h后再称量。并重复以上操作至前后两次质量差不超过2mg，即为恒重。（注：两次恒重值在最后计算中，取最后一次的称量值。）4.2 半固体或液体试样：取洁净的称量瓶，内加10g海砂及一根小玻棒，置于101105干燥箱中，干燥1.0h后取出，放入干燥器内冷却0.5h后称量，并重复干燥至恒重。然后称取5g10g试样（精确至0.0001g），置于蒸发皿中，用小玻棒搅匀放在沸水浴上蒸干，并随时搅拌，擦去皿底的水滴，置101105干燥箱中干燥4h后盖好取出，放入干燥器内冷却0.5h后称量。以下按4.1自"然后再放入101105干燥箱中干燥1 h左右"起依法操作。5分析结果的表述试样中的水分的含量按式（1）进行计算。式中：X试样中水分的含量，单位为克每百克（g/100g)； m1称量瓶(加海砂、玻棒)和试样的质量，单位为克（g）； m2称量瓶(加海砂、玻棒)和试样干燥后的质量，单位为克（g）； m3称量瓶(加海砂、玻棒)的质量，单位为克（g）。 水分含量1g/100g时，计算结果保留三位有效数字；水分含量1g/100g时，结果保留两位有效数字。 6 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。 第二法 减压干燥法7 原理 利用食品中水分的物理性质，在达到40kPa53kPa压力后加热至60±5，采用减压烘干方法去除试样中的水分，再通过烘干前后的称量数值计算出水分的含量。8 仪器和设备 真空干燥箱、扁形铝制或玻璃制称量瓶、干燥器（内附有效干燥剂）、天平（感量为0.1 mg） 9 分析步骤 9.1 试样的制备：粉末和结晶试样直接称取；较大块硬糖经研钵粉碎，混匀备用。 9.2 测定：取已恒重的称量瓶称取约2g10g（精确至0.0001g）试样，放入真空干燥箱内，将真空干燥箱连接真空泵，抽出真空干燥箱内空气（所需压力一般为40kPa53kPa)，并同时加热至所需温度60±5。关闭真空泵上的活塞，停止抽气，使真空干燥箱内保持一定的温度和压力，经4h后，打开活塞，使空气经干燥装置缓缓通入至真空干燥箱内，待压力恢复正常后再打开。取出称量瓶，放入干燥器中0.5h后称量，并重复以上操作至前后两次质量差不超过2mg，即为恒重。10 分析结果的表述 同5。11 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 第三法 蒸馏法12 原理 利用食品中水分的物理化学性质，使用水分测定器将食品中的水分与甲苯或二甲苯共同蒸出，根据接收的水的体积计算出试样中水分的含量。本方法适用于含较多其他挥发性物质的食品，如油脂、香辛料等。13试剂和材料 甲苯或二甲苯（化学纯）：取甲苯或二甲苯，先以水饱和后，分去水层，进行蒸馏，收集馏出液备用。14 仪器和设备 14.1 水分测定器：如图1所示（带可调电热套）。水分接收管容量5mL，最小刻度值0.1mL，容量误差小于0.1mL。1.250 mL蒸馏瓶； 2.水分接收管，有刻度； 3.冷凝管。图1 水分测定器14.2 天平：感量为0.1mg。15 分析步骤 准确称取适量试样（应使最终蒸出的水在2 mL5 mL，但最多取样量不得超过蒸馏瓶的2/3），放入250 mL锥形瓶中，加入新蒸馏的甲苯(或二甲苯)75 mL，连接冷凝管与水分接收管，从冷凝管顶端注入甲苯，装满水分接收管。加热慢慢蒸馏，使每秒钟的馏出液为两滴，待大部分水分蒸出后，加速蒸馏约每秒钟4滴，当水分全部蒸出后，接收管内的水分体积不再增加时，从冷凝管顶端加入甲苯冲洗。如冷凝管壁附有水滴，可用附有小橡皮头的铜丝擦下，再蒸馏片刻至接收管上部及冷凝管壁无水滴附着，接收管水平面保持10min不变为蒸馏终点，读取接收管水层的容积。16 分析结果的表述 试样中水分的含量按式（2）进行计算。 式中： X试样中水分的含量，单位为毫升每百克（mL/100g）（或按水在20的密度0.998，20g/mL计算质量)； V接收管内水的体积，单位为毫升（mL）； m试样的质量，单位为克（g）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 17 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第四法 卡尔费休法18 原理 根据碘能与水和二氧化硫发生化学反应，在有吡啶和甲醇共存时，1mol碘只与1mol水作用，反应式如下：C5H5N 2I+ C5H5NSO2+C5H5N+H2O+CH3OH2C5H5NHI+C5H6NSO4CH3 卡尔费休水分测定法又分为库仑法和容量法。库仑法测定的碘是通过化学反应产生的，只要电解液中存在水，所产生的碘就会和水以1:1的关系按照化学反应式进行反应。当所有的水都参与了化学反应，过量的碘就会在电极的阳极区域形成，反应终止。容量法测定的碘是作为滴定剂加入的，滴定剂中碘的浓度是已知的，根据消耗滴定剂的体积，计算消耗碘的量，从而计量出被测物质水的含量。 19 试剂和材料 卡尔费休试剂、无水甲醇（CH 4O）：优级纯 卡尔费休水分测定仪、天平（感量为0.1 mg）、21 分析步骤 21.1 卡尔费休试剂的标定（容量法） 在反应瓶中加一定体积（浸没铂电极）的甲醇，在搅拌下用卡尔费休试剂滴定至终点。加入10 mg水（精确至0.0001 g)，滴定至终点并记录卡尔费休试剂的用量（V）。卡尔费休试剂的滴定度按式（3）计算：式中： T卡尔·费休试剂的滴定度，单位为毫克每毫升（mg/ mL）； M水的质量，单位为毫克（mg）； V滴定水消耗的卡尔·费休试剂的用量，单位为毫升（mL）。 21.2 试样前处理 可粉碎的固体试样要尽量粉碎，使之均匀。不易粉碎的试样可切碎。 21.3 试样中水分的测定 于反应瓶中加一定体积的甲醇或卡尔·费休测定仪中规定的溶剂浸没铂电极，在搅拌下用卡尔·费休试剂滴定至终点。迅速将易溶于上述溶剂的试样直接加入滴定杯中；对于不易溶解的试样，应采用对滴定杯进行加热或加入已测定水分的其他溶剂辅助溶解后用卡尔费休试剂滴定至终点。建议采用库仑法测定试样中的含水量应大于10g，容量法应大于100g。对于某些需要较长时间滴定的试样，需要扣除其漂移量。21.4 漂移量的测定 在滴定杯中加入与测定样品一致的溶剂，并滴定至终点，放置不少于10min后再滴定至终点，两次滴定之间的单位时间内的体积变化即为漂移量（D）。 22 分析结果的表述固体试样中水分的含量按式（4），液体试样中水分的含量按式（5）进行计算。式中： X试样中水分的含量，单位为克每百克（g /100g）； V1滴定样品时卡尔费休试剂体积，单位为毫升（mL）； T卡尔费休试剂的滴定度，单位为克每毫升（g/mL）； M样品质量，单位为克（g）； V2 液体样品体积，单位为毫升（mL）； D漂移量，单位为毫升每分钟（mL/min）； t滴定时所消耗的时间，单位为分钟（min）； 液体样品的密度，单位为克每毫升（g/mL)。 水分含量1g/100g时，计算结果保留三位有效数字；水分含量<1g/100g时，计算结果保留两位有效数字。23 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第二章 食盐的测定执行标准：GB12457-2008食品中氯化钠的测定补充：SB/T102131994酱腌菜理化检验方法1 试剂硝酸银标准溶液C(AgNO3)=0.1000mol/l：按GB601规定配制铬酸钾指示剂（100g/l）：称取10g铬酸钾用少量水溶解后定容至100ml。2 样品处理样品经切碎、研磨、混合均匀后，称取5.000g10.000g，放入250ml烧杯中，加入蒸馏水50ml80ml加热近沸后浸泡半小时，冷却，定容至100ml或200ml，然后用滤纸过滤，此滤液为样品稀释液，供测定用。3 测定精确吸取稀释液2.00ml，加入三角瓶中，加入蒸馏水50ml，加100g/l铬酸钾指示剂0.5ml，用0.1000mol/l硝酸银标准溶液滴定至刚显砖红色即为终点。记下耗用毫升数V。4计算式中：X2样品中食盐（以NaCl计）含量，g/100ml C硝酸银标准溶液实际浓度，mol/l；V样品耗用硝酸银标准溶液的体积，ml；V0空白耗用硝酸银标准溶液的体积，ml；0.0585与1.00ml硝酸银标准滴定溶液C(AgNO3)=1.000mol/l相当的氯化钠的重量，g；W样品质量，g；S样品稀释液体积，ml。允许误差：0.20g/100g第三章 总酸的测定GB/T5009.512003非发酵性豆制品及面筋卫生标准的分析方法1 原理豆制品中含有多种有机酸，用氢氧化钠标准溶液滴定，以乳酸计算。2 试剂氢氧化钠标准溶液（C=0.050mol/L）、 酚酞指示液（称取0.50g酚酞用乙醇（95%）溶解并定容至50ml）3 仪器磁力搅拌器、酸度计4 分析步骤4.1 试样处理称取5.0g10.0g经切碎、研磨、均匀的试样，置于150ml烧杯中，加80ml水，煮沸浸泡0.5h，冷后移入100ml容量瓶中，加水至刻度，混均。用滤纸或脱脂棉过滤，滤液备用。4.2 酸度计法吸取试样滤液10.1ml20.0ml于150ml锥形瓶中，加80ml水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液滴定至pH8.2。同时量取90.0ml100.0ml水做试剂空白试验。4.3 酚酞指示液滴定法吸取试样滤液10.1ml20.0ml于150ml锥形瓶中，加50ml水，3滴3酚酞指示液，用氢氧化钠标准溶液滴定至初现粉红色，0.5min不褪色即为终点。同时量取60.0ml70.0ml水做试剂空白试验。5 结果计算见式（1）.式中：X试样中的酸度（以乳酸计），单位为克每百克（g/100g）；V1测定用试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升（ml）；V2试剂空白消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升（ml）；V3滴定用试样溶液的体积，单位为毫升（ml）；C氢氧化钠标准溶液实际浓度看，单位为摩尔每升（mol/ml）；0.09与1.00ml氢氧化钠标准滴定溶液(C=1.000mol/l)相当的乳酸的质量，单位为克（g）m试样质量，单位为克（g）。计算结果保留两位有效数字。6 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%.第四章 还原糖和总糖的测定执行SB/T102131994酱腌菜理化检验方法一、还原糖的测定1 试剂斐林氏甲液：称取硫酸铜15g及次甲基蓝0.05g溶解于1000ml蒸馏水中；斐林氏乙液：称取酒石酸钾钠50g，氢氧化钠54g及亚铁氰化钾4g溶解于1000ml蒸馏水中；葡萄糖标准溶液：1g/l。准确称取在100烘箱中烘至恒重的无水葡萄糖1.0000g放入100ml烧杯中，用蒸馏水溶解后倒入1000ml容量的瓶中，用蒸馏水反复冲洗烧杯，洗液一并倒入容量瓶，加浓盐酸5ml，用蒸馏水稀释至刻度。2样品处理样品经切碎、研磨、混合均匀后，称取5.000g10.000g，放入250ml烧杯中，加入蒸馏水50ml80ml加热近沸后浸泡半小时，冷却，定容至100ml或200ml，然后用滤纸过滤，此滤液为样品稀释液，供测定用。3 操作3.1 空白滴定取斐林氏甲、乙液各5.00ml于150ml锥形瓶中，加入10ml蒸馏水，用糖滴管加入9ml左右1g/l葡萄糖标准溶液，摇均后加热（电炉应预热15min后使用），使其在2min内沸腾。沸腾30s后，以3s4s一滴（空白滴定，预备滴定，正式滴定的速度均应保持一致）的速度匀速滴入1g/l葡萄糖液，至蓝紫色消失即为终点。溶液沸腾后标准糖液的耗用量应控制在0.5ml1ml之内，否则应重做。记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数A。3.2 预备滴定取斐林氏甲、乙液各5.00ml于150ml锥形瓶中，加入10ml蒸馏水和样品稀释液1.00ml，根据样品含糖量的高低（估计数），用糖滴管加入不定量的1g/l葡萄糖标准溶液，摇均后加热，沸腾30s后，以3s4s一滴的1g/l滴入葡萄糖标准液，至蓝紫色消失即为终点。记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数。3.3 正式滴定取斐林氏甲、乙液各5.00ml于150ml锥形瓶中，加入10ml蒸馏水，加入样品稀释液1.00ml，再用糖滴定管加入比预备滴定耗用量少0.5ml左右的1g/l葡萄糖标准液，摇均后加热，沸腾30s后，以3s4s一滴的速度均匀滴入1g/l葡萄糖标准液，至蓝紫色消失即为终点。样品稀释液沸腾后，标准糖液的耗用量必须控制在0.5ml1ml之内，否则应重做。记录沸腾前后共耗用标准糖液的毫升数B。4 计算式中：X5样品中还原糖的含量，g/100g； A空白滴定耗用1g/l葡萄糖标准液体积数，ml； B正式滴定耗用1g/l葡萄糖标准液体积数，ml； C1ml 1g/l葡萄糖标准液的含糖量； W所用稀释液相当样品重量，g。允许误差：0.05g/100ml。二、全糖的测定1 试剂斐林溶液甲液：称取69.3g硫酸铜，加蒸馏水溶解配成1000ml。斐林溶液乙液：称取346g酒石酸钾钠和100g氢氧化钠，加蒸馏水溶解，配成1000ml。1次甲基蓝指示剂、200g/l氢氧化钠溶液、100g/l磷酸氢二钠溶液、6mol/l盐酸溶液、200g/l乙酸铅溶液、2g/l甲基红指示剂（20V/V）乙醇溶液配制斐林氏溶液的标定：在分析天平上精确称取经烘干冷却的分析纯葡萄糖0.4000g，用蒸馏水溶解，并转移到250ml容量瓶中，加水至刻度，摇均匀备用。准确取斐林溶液甲、乙液各2.5ml，放入150ml三角瓶中，加蒸馏水20ml，置电炉上加热至沸，用配好的葡萄糖溶液滴定至溶液变红时，加入次甲基蓝指示剂1滴，继续滴定至蓝色消失鲜红色为终点。正式滴定时，先加入比预滴定时少0.5ml1ml的葡萄糖溶液，置电炉上煮沸2min，加甲基蓝指示剂1滴，继续用葡萄糖溶液滴定至终点。按下式计算其浓度：式中：A5ml斐林溶液甲、乙液相当于葡萄糖的克数； W葡萄糖的重量，g； V滴定时消耗葡萄糖溶液的体积，ml。2 操作样品切碎混合，精确称取3.0004.000g样品，置于乳钵中加入少量蒸馏水磨细，以蒸馏水洗入200ml容量瓶中，然后加入200g/ml乙酸铅溶液15ml20ml至蛋白质完全沉淀为止，并加入15ml20ml100g/l硫酸钠或磷酸氢二钠溶液。至不再产生沉淀为止，加水至刻度，摇匀，过滤。取滤液50ml，放入150ml三角瓶中，加入6ml/l盐酸10ml在70±1水浴中加热10min，取出迅速冷却至室温加2g/l甲基红指示剂1滴，用200g/l氢氧化钠中和至中性，转移至100ml容量瓶中稀释至刻度，摇匀备用。按标定斐林溶液甲、乙液的方法，用样品制备液替代葡萄糖溶液，测定样品中总糖。3 计算式中：X6样品中全糖的含量（以葡萄糖计），g/100g； W样品重量，g； V滴定时消耗样品溶液的量，ml；允许误差：0.5g/100ml.4 注意事项4.1 检验方法中，所用试剂除特别注明者外均为分析纯。4.2 以上每个检测项目，同一样品应做平行试验，两次测定值之差，不得大于允许误差，取其平均值作为分析结果。第五章 二氧化硫残留的检测执行GB/T5009.342003食品中亚硫酸盐的测定第二法 蒸馏法1 原理在密闭容器中对试样进行酸化并加热蒸馏，以释放出其中的二氧化硫，释放物用乙酸铅溶液吸收。吸收后用浓盐酸酸化，再以碘标准溶液滴定，根据所消耗的碘标准溶液量计算出试样中的二氧化硫含量。本法适用于色酒及葡萄糖糖浆、果脯。2 试剂2.1 盐酸（1:1）：浓盐酸用水稀释1倍。2.2 乙酸铅溶液（20g/l）：称取2g乙酸铅，溶于少量水中并稀释至100ml。2.3 碘标准溶液C(1/2I2)=0.010mol/l:将碘标准溶液（0.100mol/l）用水稀释10倍2.4 淀粉指示液（10g/l）:称取1g可溶性淀粉，用手许水调成糊状，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，煮沸2min，放冷，备用，此溶液应临用时新配。3 仪器全玻璃蒸馏器、碘量瓶、酸式滴定管4 分析步骤4.1 试样处理固体试样用刀切或剪刀剪成碎末后混匀，称取约5.00g均匀试样（试样量可视含量高低而定）。液体试样可直接吸取5.0ml10.0ml试样，置于500ml圆底蒸馏烧瓶中。4.2 测定蒸馏：将称好的试样置入圆底蒸馏烧瓶中，加入250ml水，装上冷凝管，冷凝管下端应插入碘量瓶中的25ml乙酸铅（20g/l）吸收液中，然后在蒸馏瓶中加入10ml盐酸（1:1），立即盖塞，加热蒸馏。当蒸馏液约200ml时，使冷凝管下端离开液面，在蒸馏1min。用少量蒸馏水冲洗插入乙酸铅溶液的装置部分。在检测试样的同时要做空白试验。滴定：向取下的碘量瓶中依次加入10ml浓盐酸、1ml淀粉指示液（10g/l）。摇匀之后用碘标准滴定溶液（0.010mol/l）滴定至变蓝且在30s内不退色为止。4.3 计算试样中的二氧化硫总含量按下式进行计算。式中：X试样中的二氧化硫总含量，单位为克每千克（g/kg）；A滴定试样所用碘标准滴定溶液（0.010mol/l）的体积，单位为毫升（ml）；B滴定试剂空白所用碘标准滴定溶液（0.010mol/l）的体积，单位为毫升（ml）；m试样质量，单位为克（g）0.0321ml碘标准溶液C(1/2I2)=1.0mol/l相当的二氧化硫的质量，单位为克（g）。第六章 亚硝酸盐和硝酸盐的测定执行GB 5009.332010食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定分光光度法1 原理 亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定，硝酸盐采用镉柱还原法测定。 试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，外标法测得亚硝酸盐含量。采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐总量，由此总量减去亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。 2 试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯。水为 GB/T 6682 规定的二级水或去离子水。 2.1 亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O）。 2.2 乙酸锌（Zn(CH3COO)2·2H2O）。 2.3 冰醋酸（CH3COOH）。 2.4 硼酸钠（Na2B4O7·10H2O）。2.5 盐酸（1.19g/mL）。 2.6 氨水（25%）。 2.7 对氨基苯磺酸(C6H7NO3S）。2.8 盐酸萘乙二胺(C12H14N2·2HCl）。 2.9 亚硝酸钠（NaNO2）。 2.10 硝酸钠（NaNO3）。 2.11 锌皮或锌棒。 2.12 硫酸镉。 2.13 亚铁氰化钾溶液(106g/L)：称取106.0g 亚铁氰化钾（2.1），用水溶解，并稀释至 1000mL。 2.14 乙酸锌溶液(220g/L)：称取220.0g乙酸锌（2.2），先加 30mL 冰醋酸（2.3）溶解，用水稀释至1000mL。 2.15 饱和硼砂溶液(50g/L)：称取5.0g硼酸钠（2.4），溶于100mL 热水中，冷却后备用。 2.16 氨缓冲溶液（pH9.69.7）：量取30mL盐酸（2.5），加100mL 水，混匀后加65mL氨水（2.6），再加水稀释至1000mL，混匀。调节pH至9.69.7。2.17 氨缓冲液的稀释液：量取50 mL氨缓冲溶液（2.16），加水稀释至500mL，混匀。 2.18 盐酸(0.1mol/L)：量取5mL盐酸，用水稀释至600mL。 2.19 对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4对氨基苯磺酸（2.7），溶于100 mL20%（V/V）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。 2.20 盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2 g 盐酸萘乙二胺（2.8），溶于100mL水中, 混匀后，置棕色瓶中，避光保存。 2.21 亚硝酸钠标准溶液（200g/mL）：准确称取0.1000于110120干燥恒重的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。 2.22 亚硝酸钠标准使用液（5.0g/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度。 2.23 硝酸钠标准溶液（200g/mL，以亚硝酸钠计）：准确称取0.1232 g于110120干燥恒重的硝酸钠，加水溶解，移于入500mL 容量瓶中，并稀释至刻度。2.24 硝酸钠标准使用液（5g/mL）：临用时吸取硝酸钠标准溶液2.50mL，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。 3 仪器和设备 天平（感量为 0.1 mg 和 1 mg）、组织捣碎机、超声波清洗器、恒温干燥箱、分光光度计镉柱3.1.1 海绵状镉的制备：投入足够的锌皮或锌棒于500mL 硫酸镉溶液(200g/L)中，经过3h4h，当其中的镉全部被锌置换后，用玻璃棒轻轻刮下，取出残余锌棒，使镉沉底，倾去上层清液，以水用倾泻法多次洗涤，然后移入组织捣碎机中，加500mL水，捣碎约2s，用水将金属细粒洗至标准筛上，取20目40目之间的部分。 3.1.2 镉柱的装填：如图2。用水装满镉柱玻璃管，并装入2cm高的玻璃棉做垫，将玻璃棉压向柱底时，应将其中所包含的空气全部排出，在轻轻敲击下加入海绵状镉至8cm10cm高，上面用1cm高的玻璃棉覆盖，上置一贮液漏斗，末端要穿过橡皮塞与镉柱玻璃管紧密连接。如无上述镉柱玻璃管时，可以25mL酸式滴定管代用，但过柱时要注意始终保持液面在镉层之上。当镉柱填装好后，先用25mL盐酸(0.1mol/L)洗涤，再以水洗两次，每次25mL，镉柱不用时用水封盖，随时都要保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹有气泡。 3.1.3 镉柱每次使用完毕后，应先以25mL盐酸（0.1 mol/L）洗涤，再以水洗两次，每次25mL，最后用水覆盖镉柱。 3.1.4 镉柱还原效率的测定：吸取20mL硝酸钠标准使用液，加入5mL 氨缓冲液的稀释液，混匀后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯收集流出液，当贮液漏斗中的样液流完后，再加5mL水置换柱内留存的样液。取10.0mL还原后的溶液（相当10g亚硝酸钠）于50mL比色管中，以下按4.4自“吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL”起依法操作，根据标准曲线计算测得结果，与加入量一致，还原效率应大于 98%为符合要求。 3.1.5 还原效率计算 还原效率按式（2）进行计算。 式中： X还原效率，%； A测得亚硝酸钠的含量，单位为微克（g）； 10测定用溶液相当亚硝酸钠的含量，单位为微克（g）。4 分析步骤4.1 试样的预处理 新鲜蔬菜、水果：将试样用去离子水洗净，晾干后，取可食部切碎混匀。将切碎的样品用四分法取适量，用食物粉碎机制成匀浆备用。如需加水应记录加水量。 4.2 提取 称取5（精确至0.01g）制成匀浆的试样（如制备过程中加水，应按加水量折算），置于50mL烧杯中，加12.5mL饱和硼砂溶液（2.15），搅拌均匀，以70左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。 4.3 提取液净化 在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液（2.13）,摇匀,再加入5mL 乙酸锌溶液（2.14）,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置30 min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。 4.4 亚硝酸盐的测定 吸取40.0mL上述滤液于50mL带塞比色管中，另吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL亚硝酸钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、7.5、10.0、12.5亚硝酸钠），分别置50mL带塞比色管中。于标准管与试样管中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液（2.19），混匀，静置3min5min后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液(2.20)，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。4.5 硝酸盐的测定 4.5.1 镉柱还原 4.5.1.1 先以25mL稀氨缓冲液（2.17）冲洗镉柱，流速控制在3mL/min5mL/min（以滴定管代替的可控制在2mL/min3mL/min）。 4.5.1.2 吸取20mL滤液50mL烧杯中，加5mL氨缓冲溶液（2.16），混合后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯收集流出液，当贮液漏斗中的样液流尽后，再加5mL水置换柱内留存的样液。 4.5.1.3 将全部收集液如前再经镉柱还原一次，第二次流出液收集于100mL容量瓶中，继以水流经镉柱洗涤三次，每次20mL，洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混匀。 4.5.2 亚硝酸钠总量的测定 吸取10mL20mL 还原后的样液于50mL比色管中。以下按11.4自“吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL”起依法操作。 5 分析结果的表述 5.1亚硝酸盐含量计算 亚硝酸盐（以亚硝酸钠计）的含量按式（3）进行计算。式中： X1试样中亚硝酸钠的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A1测定用样液中亚硝酸钠的质量，单位为微克（g）；m试样质量，单位为克（）； V1测定用样液体积，单位为毫升（mL）； V0 试样处理液总体积，单位为毫升（mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 5.2 硝酸盐含量的计算 硝酸盐（以硝酸钠计）的含量按式（4）进行计算。式中： X2试样中硝酸钠的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A2经镉粉还原后测得总亚硝酸钠的质量，单位为微克（g）； m试样的质量，单位为克（g）； 1.232亚硝酸钠换算成硝酸钠的系数； V2测总亚硝酸钠的测定用样液体积，单位为毫升（mL）； V0试样处理液总体积，单位为毫升（mL）； V3经镉柱还原后样液总体积，单位为毫升（mL）； V4经镉柱还原后样液的测定用体积，单位为毫升（mL）； X1由式（3）计算出的试样中亚硝酸钠的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 6 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第七章 总砷的测定执行标准：GB/T5009.112003第八章 铅的测定执行标准：GB 5009.122010食品安全国家标准 食品中铅的测定第二法 氢化物原子荧光光谱法1 原理 试样经酸热消化后，在酸性介质中，试样中的铅与硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)反应生成挥发性铅的氢化物(PbH4)。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发至高能态；在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量。2 试剂和材料 2.1 硝酸+高氯酸混合酸(9+1)：分别量取硝酸900mL，高氯酸100mL，混匀。 2.2 盐酸(1+1)：量取250mL 盐酸倒入250mL 水中，混匀。 2.3 草酸溶液(10 g/L)：称取1.0g 草酸，加入溶解至100mL，混匀。 2.4 铁氰化钾K3Fe(CN)6溶液(100g/L)：称取10.0g 铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL，混匀。 2.5 氢氧化钠溶液(2g/L)：称取2.0g 氢氧化钠，溶于1L 水中，混匀。 2.6 硼氢化钠(NaBH4)溶液(10g/L)：称取5.0g 硼氢化钠溶于500 mL 氢氧化钠溶液(2g/L)中，混匀，临用前配制。 2.7 铅标准储备液(1.0mg/mL)。 2.8 铅标准使用液(1.0g/mL)：精确吸取铅标准储备液(10.7)，逐级稀释至 1.0g/mL。 2 仪器和设备 原子荧光光度计、铅空心阴极灯、电热板、天平（感量为1mg） 3 分析步骤 3.1 试样消化 湿消解：称取固体试样0.2g2g或液体试样2.00g（或mL）10.00g（或mL）（均精确到0.001g），置于50mL100mL消化容器中（锥形瓶），然后加入硝酸+高氯酸混合酸（2.1）5mL10mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消化液呈淡黄色或无色(如消解过程色泽较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解)，稍冷加入20 mL水再继续加热赶酸，至消解液0.5mL1.0mL止，冷却后用少量水转入25mL容量瓶中，并加入盐酸（2.2）0.5mL，草酸溶液（2.3）0.5mL，摇匀，再加入铁氰化钾溶液（2.4）1.0 mL，用水准确稀释定容至25mL，摇匀，放置30min 后测定。同时做试剂空白。3.2 标准系列制备 在25mL容量瓶中，依次准确加入铅标准使用液（2.8）0.00mL、0.125mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL(各相当于铅浓度 0.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、30.0ng/mL、40.0ng/mL、50.0ng/mL)，用少量水稀释后，加入0.5mL盐酸（2.2）和0.5mL草酸溶液（2.3）摇匀，再加入铁氰化钾溶液（2.4）1.0mL，用水稀释至该度，摇匀。放置30min 后待测。 3.3 测定 3.3.1 仪器参考条件 负高压：323V；铅空心阴极灯灯电流：75mA；原子化器：炉温 750800，炉高8mm；氩气流速：载气 800mL/min；屏蔽气：1000mL/min；加还原剂时间：7.0s；读数时间：15.0s；延迟时间：0.0s；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；进样体积：2.0mL。 3.3.2 测量方式 设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定10min20min后开始测量：连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列的测量，绘制标准曲线，转入试样测量，分别测定试试样中铅含量按式（2）进行计算。 试中： X试样中铅含量, 单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或 mg/L）； c1试样消化液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0试剂空白液测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V试样消化液定量总体积，单位为毫升（mL）； m试样质量或体积，单位为克或毫升（g或mL）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。 4 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得