现代食品生物技术复习题及试题(手打版)(共3页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上2014年现代食品生物技术习题华中农业大学PCR及目的基因名词解释：感受态 转化 转导 转染 转化率 填空：1. 基因工程技术是生物技术的核心技术2. 基因工程的实施包括四个必要条件：限制性内切酶、连接酶、载体、受体细胞51.与传统PCR相比，荧光定量PCR技术的优点： 实时在线监控 降低反应的非特异性 增加定量的精确性 结果分析更加快捷方便，无需跑凝胶 52.DNA片段重组连接的方法主要有：粘性末端的连接 平末端的连接 PCR产物的连接 53DNA片段重组中平末端连接效率比较低，为了增加效率常用： 同聚加尾法 衔接物连接 DNA接头连接法 （均属于人工加尾形成“粘性末端”）54.目的基因的获取方式有：化学合成法（全基因合成、基因的半合成）基因组文库法 cDNA文库法 55.细菌为宿主细胞，重组DNA导入的方式有：化学方式 氯化钙转化法 物理方式 电转化法 生物方式 转导转染56.感受态的大肠杆菌在温度为0时吸附DNA，42时摄入DNA57.大肠杆菌出现感受态的生理期是对数期69.重组子常常由载体提供的性状进行筛选，主要方式有：报告基因筛选 抗性基因的插入失活筛选 -半乳糖苷酶基因失活筛选法及其-互补原理 70.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显白色，为_克隆，未插入基因的克隆显蓝色，为_克隆。71.基因工程中常用到报告基因和标记基因，二者作用的主要区别：标记基因筛选转化细胞的能力和效率高 标记基因存在安全性问题简答：1、 重组子的鉴定，在DNA、mRNA、蛋白质水平上的方法有哪些？2、 重组DNA导入酵母细胞、植物细胞、动物细胞的方式？3、 影响转化率的因素有哪些？杂交名词解释：Southern印记杂交 SD序列 cDNA文库 基因组文库 外源基因 KT-PCR 插入失活 MCS 穿梭质粒载体 探针（Probe） 反义RNA（Antisense RNA）目的基因 受体细胞填空：42.将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为斑点印记43.核酸保持在细胞或组织切片中经过适当方法处理细胞或者组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交44.在将固定在膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，称为预杂交简答题：1、 理想质粒载体的必备条件？2、 植物基因工程中重组子的导入方式有哪些？3、 与DNA相比为什么mRNA容易降解，怎样防止其降解？4、 提高平末端连接效率的主要策略有哪些？5、 基因工程诞生的理论基础是什么？问答题：1、 基因工程技术在食品工业中主要应用在哪些领域？2、 细菌的限制与修饰系统有什么意义？限制性内切酶的种类有哪些？3、 试述western blotting 杂交技术原理和方法4、 大肠杆菌作为基因工程的受体菌具有哪些特点？真核基因在大肠杆菌中表达存在哪些障碍？细胞工程名词解释：细胞工程 体细胞杂交 原生质体 传代培养 原代培养 细胞系 细胞株 干细胞填空：1、 细胞工程的基本操作有细胞融合 细胞拆分 大规模细胞培养 繁殖生物学技术 染色体和染色体组工程等2、 细胞融合的理论基础是细胞膜的流动性3、 诱导动物细胞融合的方式有：生物法-灭活的病毒 化学法-PEG等 物理法-电融合4、 微生物细胞融合的主要过程有原生质体的制备（去细胞壁） 原生质体的融合 细胞壁的再生5、 单克隆抗体的制备包括：动物免疫和亲本细胞的筛选、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选、单克隆抗体的制备和冻存、单克隆抗体的纯化6、 革兰氏阴性菌制备原生质体通常需要添加的两种物质分别是：溶菌酶和EDTA问答题：1、 细胞工程的主要研究方法及在食品工业中的应用2、 简述植物细胞工程和动物细胞工程的区别3、 简述电融合技术的原理4、 什么是原生质体？简述其制备方法5、 简述利用细胞融合技术生产单克隆抗体的主要步骤6、 请比较生殖性克隆和治疗性克隆的区别7、 简述一种动物活细胞计数法蛋白质工程填空：1、 维持蛋白质一级结构的作用力是：氢键和二硫键，而维持蛋白质高级结构的作用力是非共价键，主要有氢键、疏水作用力、盐键、范德华力2、 蛋白质的二级结构是指肽链本身折叠或盘曲所形成的局部空间构象，主要有：-折叠、-转角、-螺旋、无规卷曲3、 以多孔性凝胶材料为支持物，当蛋白质容易流经此支持物时，分子大小不同的蛋白质所受到的阻滞作用不同而先后流出，从而达到分离纯化的目的，此方法称为凝胶过滤层析4、 在一定的PH条件下带有电荷，不同的蛋白质所带有的电荷种类和数量不同，因此他们与带电的凝胶颗粒之间的电荷相互作用不同。当蛋白质混合物流经带电凝胶时，电荷吸引作用小的蛋白质先通过，而电荷吸引作用大的蛋白质后流过凝胶，从而把不同的蛋白质分开的方法称为粒子交换层析5、 由于不同的蛋白质所含的氨基酸的种类和数目不同，分子表面的极性氨基酸和非极性氨基酸的数目、分布区域不同，因此它与分子的比表面积大的吸附剂之间的相互作用力大小不同，根据此原理对蛋白质进行分离纯化，此方法称为吸附层析6、 蛋白质生化分离技术主要有亲和层析、凝胶过滤层析、吸附层析、粒子交换层析7、 固液分离技术主要有离心、过滤、沉淀8、 细胞破碎技术有超声波、机械破碎、酶9、 蛋白质在食品产业中的应用主要有提高酶的稳定性、活性、适应性10.易错PCR是创造随机突变的有效方法，为了提高随机突变的概率，通常采用的措施有降低一种dNTP的浓度、加入dITP代替被减少的dNTP、调整反应液中的锰离子的浓度。问答题：1、 简述蛋白质工程和基因工程的区别2、 一个蛋白质分子由300个氨基酸编码，欲将第102个氨基酸（由TAC编码）突变成GCT，简述用PCR的方法完成突变的步骤3、 一个混合物中含有下列物质：细胞色素C（M=），牛胰岛素（M=5733），溶菌酶（M=13930），酵母己糖激酶（M=96000），谷氨酸脱氢酶（M=），人血红蛋白（M=64500），马-球蛋白（M=），酵母脂肪酸合成酶（M=），用这些混合物在分级范围为5000-的分子筛柱中进行分离时，请预测其洗脱的先后顺序4、 怎样用PCR的方法将一个由300个氨基酸编码的蛋白质的200-250个氨基酸之间的序列删除5、 简述蛋白质工程研究的基本途径6、 一个蛋白质由300个氨基酸组成，请简述用搭桥PCR的方法在该蛋白质的150个氨基酸出插入GAATCT这个6个碱基的基本步骤7、 简述DNA改组技术（DNA Shuffling）的基本原理PS：=。= 学姐刚刚考完，凭印象把试题写出来了，基本上都是老师平时讲的内容。选择题是老师上课讲的那些，都过一遍就没问题了。听说一共四套卷子，四年轮一次，学弟学妹们加油，学姐只能帮你们到这了。名词解释：多克隆位点、蛋白质工程、感受态、细胞全能性、基因芯片简答：1、 基因工程诞生的理论基础是什么？2、 Southern杂交的基本过程3、 大肠杆菌作为基因工程的受体菌具有哪些特点？真核基因在大肠杆菌中表达存在哪些障碍？4、 细胞工程的主要研究方法及在食品工业中的应用5、 简述利用细胞融合技术生产单克隆抗体的主要步骤6、 简述DNA改组技术（DNA Shuffling）的基本原理7、 载体的一般功能20145.20专心-专注-专业