高中生物实验详细总结(共10页).docx
精选优质文档-倾情为你奉上原理实验材料试剂操作结果淀粉的检验淀粉遇碘单质变蓝。物质氧化碘液,置换碘单质,碘单质与物质发生颜色反应。马铃薯匀浆碘液(碘化钾溶液)向试管内注入2mL待测组织样液。向试管内滴加两滴碘液,观察颜色变化。样液颜色变蓝,则样液含淀粉。还原糖的检验还原糖(葡萄糖,果糖,麦芽糖)与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。苹果或梨匀浆斐林试剂:甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液;乙夜:质量浓为0.05g/mL向试管内注入2mL待测组织样液。向试管内注入1mL斐林试剂(甲液乙液等量混合均匀后再注入)将试管放入盛有5065温水的大烧杯中加热约2min观察试管中出现的颜色变化若生成砖红色沉淀,则样液含还原糖。脂肪脂肪被苏丹染成橘黄色,被苏丹染成红色花生种子或花生种子匀浆苏丹或苏丹方法一:向待测组织样液中滴加三滴苏丹染液,观察染液被染色情况方法二:制作子叶临时切片取材切片制片:1.在花生子叶薄片上滴23滴苏丹,染色3min(苏丹染色一分钟)2.用吸水纸吸去染液再滴加12滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色3.用吸水纸吸取花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片观察花生子叶最薄处脂肪颗粒被染成橘黄色(红色)蛋白质蛋白质(肽键)与双缩脲发生颜色反应,蛋白质含量越高紫色越深豆浆或鲜肝研磨液双缩脲试剂:A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液;B夜:质量浓为0.01g/mL的CuSO4向试管内注入2mL待测组织样液向试管内注入双缩脲试剂A液1mL,摇匀向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀观察试管内出现的颜色变化样液变紫观察DNA和RNA在细胞中的分布两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。人的口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶内表皮细胞质量分数为0.9%的NaCl溶液质量分数为8%的盐酸去口腔上皮细胞制片:1.在载玻片上滴一滴NaCl溶液。2.在口腔内侧轻刮几下,将碎屑在液滴中涂抹。3.点燃酒精灯,将载玻片烘干水解1. 在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸,载玻片放入其中。2.在大烧杯中加入30温水。3.将小烧杯放在大烧杯中保温5min冲洗涂片:用缓水流冲洗载玻片10s染色:1.吸水纸吸水2.将混合染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min 3.吸去多余染色剂,盖上盖玻片观察真核细胞DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体叶绿体散布于细胞质中,可用高倍显微镜观察其形态和分布。健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料,使活细胞中线粒体呈现蓝绿色可维持活性数小时新鲜菠菜叶或黑藻叶;人的口腔上皮细胞质量分数为1%的健那绿溶液制作藓类叶片临时装片:在载玻片上滴一滴清水,用镊子取一片小叶或菠菜叶带叶肉的下表皮,放入水滴盖上盖玻片观察叶绿体制作人的口腔上皮细胞临时装片观察线粒体叶绿体随细胞质流动而流动。代谢旺盛的位置线粒体较多鉴别死细胞与活细胞活细胞的细胞膜可以控制物质进出动物细胞台盼蓝用台盼蓝染色,观察细胞是否着色活的动物细胞不着色植物细胞的吸水与失水植物细胞的原生质层相当于一层半透膜;原生质层比细胞壁的伸缩性大;细胞液浓度大于外界溶液的浓度紫色的洋葱鳞片叶质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液1.制作临时装片2.用低倍显微镜观察液泡大小及原生质层位置3.从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。4.用低倍显微镜再次观察5.在盖玻片的另一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。6.再次用低倍显微镜观察细胞发生质壁分离,后又发生质壁分离的复原探究酵母菌的呼吸方式酵母菌是兼性厌氧菌;CO2可使澄清石灰水变浑浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄;橙色的重铬酸钾在酸性条件下与乙醇发生化学反应,变成灰绿色。食用酵母菌澄清石灰水;质量分数为5%的葡萄糖溶液;澄清石灰水;溴麝香草酚蓝水溶液;重铬酸钾溶液酵母菌培养液的制备:制备两瓶,均注入葡萄糖溶液检测CO2的产生:对A:让空气间歇性依次通过三个锥形瓶,然后放置25-35环境中培养5-8h 对B:封口放置一段时间,再联通盛有澄清石灰水的锥形瓶检测酒精的产生:各取培养液的余液,分别注入两只试管,分别滴加0.1g溶有重铬酸钾的浓硫酸溶液,轻轻振荡,观察试管中溶液颜色变化观察根尖分生组织细胞的有丝分裂有丝分裂常见于根尖根芽等分生区细胞,染色体容易被碱性染料如龙胆紫和醋酸洋红溶液染色洋葱根尖细胞质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精,龙胆紫溶液或醋酸洋红液洋葱根尖的培养装片的制作;1. 解离2. 漂洗:用镊子把根尖放入盛有清水的玻璃皿中3. 染色4. 制片:根尖放载玻片上,用镊子吧根尖弄碎,盖上盖玻片,用拇指轻轻按压根尖细胞有丝分裂的观察处于间期的细胞最多低温诱导植物染色体数目的变化用低温处理植物分生组织细胞,能抑制纺锤体的形成,洋葱或大葱,蒜卡诺氏液;改良苯酚品红染液;质量分数为15%的盐酸溶液;体积分数为95%的酒精溶液将洋葱放在装满清水的广口瓶上,待洋葱长出乐1cm不定根时将装置放入冰箱(约4),诱导培养36h剪取经处理的根尖0.5-1cm放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h,以固定细胞形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗两次制作装片,包括:解离,漂洗,染色,制片观察DNA的鉴定DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成w羟基r酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)鸡血或菜花细胞二苯胺试剂取两只20ml试管,各加入量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL。将丝状物放入其中一支试管,用玻璃棒搅拌,使物质溶解向两只试管个加入4ml二苯胺试剂,混合均匀。将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较溶液颜色,观察含DNA的试管溶液是否变蓝鉴定能分解尿素的细菌在细菌分解尿素的化学方应中,脲酶将尿素分解成氨,是培养基碱性增强,使酚红指示剂变红能分解尿素的细菌酚红指示剂在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将变红,就可以初步鉴定该种细菌可以分解尿素绿叶中色素的提取与分离色素能溶解在无水乙醇中;不同色素在层析液中溶解度不同。溶解度高的扩散快。菠菜的绿叶无水乙醇;层析液;二氧化硅(研磨充分);碳酸钙(防色素被破坏)提取绿叶中的色素:1.剪碎绿叶,向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入10ml无水乙醇,进行迅速充分的研磨。2.将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤,用棉塞将试管口封严。制备滤纸条:将滤纸条的一端剪去两角,并在距这端1cm处用铅笔画一条细线画滤液细线:用毛细管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画细线,待干后,再画一两次分离绿叶中的色素:将滤纸条有细线的一端轻轻插入层析液中,随后用棉花紧塞试管口(不能让滤液细线触及层析液)从上到下:胡萝卜素:橙黄叶黄素:黄色叶绿素a:蓝绿(最多)叶绿素b:黄绿(叶绿素,3/4主要吸收蓝紫和红光,类胡萝卜素1/4主要吸收蓝紫光)测定饮用水中的大肠杆菌数目如果有大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体带H+,故菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。饮用水的滤膜伊红美蓝培养基根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。鉴别纤维素分解菌刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但不和纤维二糖和葡萄糖反应。纤维素分解菌刚果红(CR)法1:在长出菌落的培养基上覆盖1g/ml的CR溶液,10-15min后倒去,再加入NaCl溶液,15min后倒去法2:1:200比例将10g/ml的CR溶液加入培养基,混匀后倒平板通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌酒精在高中生物中:1、脱色剂“探究叶绿体在光照下合成淀粉实验”中,将处理过的天竺葵叶片放入盛有酒精的小烧杯里,隔水加热,使叶片褪色(破坏和溶解叶片中所含的色素).这样就可在滴加碘液后,避免对观察叶片颜色变化的干扰.2、漂洗剂酒精是良好的有机漂洗剂.“脂肪的鉴定实验”中,用苏丹染液对脂肪组织进行染色后,可用体积分数为50%的酒精来冲洗浮色,以免干扰对细胞内脂肪颗粒的观察.3、提取剂和层析剂绿叶中色素的提取和分离实验”中,可以用纯酒精作为提取色素的试剂和层析剂.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中,采用酒精沉淀法,利用DNA不溶于酒精,而蛋白质、脂肪及磷脂等能溶解其中,可以进一步提出含杂质较少的DNA丝状物.4、固定剂在“观察植物细胞有丝分裂实验”中,一般采用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按体积比1:1混合而成的药液作为解离试剂.盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的.酒精的作用是固定蛋白质,使细胞的原生质凝固,不发生变化,固定细胞的分裂相,以尽可能保持原来的结构供观察.酒精也可与其它试剂混合成复合固定剂,如“低温诱导染色体加倍”中的卡诺固定液就是由无水酒精3份:冰醋酸1份配制而成,适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等. 5消毒剂 选一中所有的70的酒精都是消毒剂.7075浓度杀菌作用最强,此浓度的酒精与细菌的渗透压近似,在细菌表面蛋白未变性前能不断地向菌体内部渗入,使细菌所有蛋白脱水、变性凝固,最终杀死细菌,以达到消毒杀菌的目的.浓度低于70,则渗透性降低,达不到灭菌消毒目的.5. 燃烧剂酒精灯中的燃料盐酸在高中生物中:1、“DNA和RNA在细胞在的分布”中 8盐酸的作用(1) 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2) 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合2、“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的.3、“酶活性受PH影响实验”和“生物组织中PH维持稳定的机制”盐酸用来变PH值。高中生物常见染色剂氧化还原类1斐林试剂 2.重铬酸钾络合物类1. 碘 2.双缩脲有机染色剂:1. 苏丹染色剂 2.甲基绿,吡罗红,二苯胺 3.龙胆紫,醋酸洋红,刚果红 酸碱指示剂类:1. 溴麝香草酚蓝水溶液 2.酚红指示剂1 斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+斐林试剂砖红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2 苏丹、苏丹检测脂肪原理:苏丹+脂肪橘黄色;苏丹+脂肪红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪.3 双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热).应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定.4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5 DNA的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布.鉴定原理:DNA+二苯胺蓝色应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.6 吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红红色应用:可以显示RNA在细胞中的分布.注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性. 8 线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9 酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶.10 CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.11 染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色.应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂.12 吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C.13 亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.14 脲酶的检测原理:细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红.应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.15 伊红美蓝检测大肠杆菌原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色.应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.16 刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.应用:筛选纤维素分解菌.专心-专注-专业