生化基础知识---总结终极版.docx

精品名师归纳总结1.2. 常用临床生化项目的分类1.2.1. 按化学性质分类大致分为四类：酶类、底物代谢类、无机离子类、特种蛋白类。1.2.1.1. 酶类包括 ALT（谷丙转氨酶） ,AST（谷草转氨酶） ,ALP（碱性磷酸酶） ,ACP（酸性磷酸酶） , r-GT （谷氨酰转移酶）, -HBDH （ 羟丁酸脱氢酶）, LDH （乳酸脱氢酶）, CK （肌酸激酶）, CK-MB （肌酸激酶同功酶）,-AMY （淀粉酶）, ChE（胆碱脂酶）等。1.2.1.2. 底物代谢类包括 TG（甘油三脂）, TC（总胆固醇）, HDL-C （高密度脂蛋白胆固醇）,LDL-C （低密度脂蛋白胆固醇）, UA （尿酸）, UREA （尿素氮）, Cr（肌酐）, Glu（葡萄糖）, TP（总蛋白） ,Alb（白蛋白） ,T-Bil （ 总胆红素） ,D-Bil （ 直接胆红素） ,TBA（总胆汁酸） ,CO2（二氧化碳）等。1.2.1.3. 无机离子类包括 Ca（钙）, P（磷）, Mg （镁）, Cl （氯）, Fe（铁）等。1.2.1.4. 特种蛋白类apoA1（载脂蛋白 A1 ）, apoB（载脂蛋白 B）, Lpa （脂蛋白 a）。补体 C3,补体 C4。免疫球蛋白 IgA 、IgG、IgM 等。1.2.2. 按临床性质分类无机离子：包括 Ca, P,Mg , Cl 等。肝功能：包括 ALT ,AST , r-GT , ALP , MSO , T-Bil ,D-Bil , TBA ,TP,Alb 等。 肾功能： UA , UREA , Cr 等。心肌酶谱： CK , CK-MB , LDH , -HBDH , AST , MSO 等。糖尿病： GLU 等。前列腺疾病： ACP ,p-ACP 等。 胰腺炎： -AMY 。血脂： TC, TG,HDL-C , LDL-C ,apoA1 , apoB, Lpa 。 痛风： UA 。中毒： ChE。免疫性疾病： C3 ,C4, IgG, IgA , IgM 。急性炎症反应： CRP （C 反应蛋白）, AAG （a1 酸性糖蛋白）,CER（铜蓝蛋白）, ASO（抗链球菌溶血素O）。1.3. 常用临床项目的医学打算水平医学打算水平（ Medicine decide level ,MDL ）是指不同于参考值的另一些限值,通过观看测 定值是否高于或低于这些限值,可在疾病诊断中起排除或确认的作用,或对某些疾病进行分级或分类, 或对预后做出估量,以提示医师在临床上应实行何种处理方式,如进一步进行某一方面的检查,或打算实行某种治疗措施等等。医学打算水平与参考值的根本区分在于：它不仅对健康人的数值进行争论,以打算健康人的数值区间,同时仍对有关疾病的不同病情的数据进行争论,以定出不同的打算性限值。可提示及引导医师实行不同的临床措施。 所医学打算水平看来更合理、 更客观、 更有助于临床的应用。 当然, 真正建立起每一项试验的医学打算水平是一个特别复杂的问题, 存在着很多的实际困难。以下为一些常用检验项目的医学打算水平,仅供参考。1.3.1. 钾可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结参考值3.55.3mmol/L3.0 mmol/L此值低于参考范畴下限,如测定值低于此值,可能会显现虚弱、的高辛中毒和（或）心律失常,应予以合适的治疗5.8 mmol/L此值高于参考范畴上限。第一应排除试管内溶血造成的高钾。如测定值高于此值,应借助其他试验查找高钾缘由,并考虑是否有肾小球疾病。7.5 mmol/L高于此值的任何钾浓度都与心律失常有关,故必需赐予合适治疗。（第一也应排除试管内溶血造成的高钾）1.3.2. 钠参考值135-145mmol/L打算水平临床意义及措施115mmol/L等于或低于此水平可发生精神错乱、疲惫、头疼恶心、呕吐和厌食,在110mmol/L 时,病人极易发生抽搐、半昏迷和昏迷,故在测定值降至115mmol/L 时,应尽快确定其严峻程度,并准时进行治疗。133mmol/L此值稍低于参考范畴下限,测定值低于此值时,应考虑多种可能引起低钠的缘由,并加作帮助试验,如血清渗透压、钾浓度及尿液检查等。150mmol/L此值高于参考范畴上限,应仔细考虑多种可能引起高钠的缘由。1.3.3. 氯化物参考值96110mmol/L打算水平临床意义及措施90mmol/L低于此水平,应考虑低氯血症的多种缘由。120mmol/L高于此水平,应考虑多种高氯血症的缘由,并同时可作多种帮助诊断试验如血清 Na、K 、Ca、HCT 等。1.3.4. 钙参考值2.25 2.65mmol/L打算水平临床意义及措施1.75mmol/L血钙浓度低于此值,可引起手足抽搐,肌强直等严峻情形,故应依据白蛋白浓度情形,立刻实行治疗措施2.74mmol/L当测定值大于此值时,应准时确定引起血钙上升的缘由,其中的一个缘由是甲状旁腺机能亢进,所以要作其他试验,予以证明或排除。3.37mmol/L血钙浓度超过此值,可引起中毒而显现高血钙性昏迷,故应准时实行有力的治疗措施。1.3.5. 离子钙参考值1.13 1.32mmol/L打算水平临床意义及措施0.37mmol/L离子钙水平低于此值,常显现腕掌痉挛、手足抽搐、低血压、心律失常等症状,最终可致心脏停止跳动,必需立刻实行合适的治疗措施。3.3mmol/L测定值在此水平, 将导致严峻的和连续的心律功能不良,以及血液动力的不稳固。1.3.6. 磷参考值0.96 1.62mmol/L打算水平临床意义及措施0.48mmol/L等于及低于此值,往往与溶血性贫血有关,应考虑多种治疗方法进行治疗。0.81mmol/L此值在参考范畴下限以下,低于此值且有高血钙情形时,支持甲状旁腺机能亢进的诊断。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结1.62mmol/L此值为参考范畴上限,高于此值应考虑无机磷可能上升的多种缘由,特殊应考虑是否有肾功能不全。1.3.7. 镁参考值0.61.2mmol/L打算水平临床意义及措施0.60mmol/L等于或低于此水平常,常有虚弱、易怒、痉挛、震颤等症状,如有上述临床症状并伴有血清镁症降,就应赐予适当的治疗。1.00mmol/L此值在参考范畴以内,假如低镁被认为是临床症状的起因,就测定值高于此值时,应被排除,而应考虑其他病因。2.5mmol/L等于或高于此值,已超过参考范畴上限,应赐予必要治疗,另外,仍应检查是否存在肾功能不全。1.3.8. 铁参考值9.030.0umol/L打算水平临床意义及措施8.0umol/L等于或低于此水平, 多与缺铁性贫血有关, 但作此诊断前, 仍需证明 RBC 为小细胞低血色素性且伴有总铁结合力（TIBC ）的上升。假如 TIBC 上升不明显, 就血清转铁蛋白降低也有利于此种诊断。39.4umol/L等于或高于此水平,可涉及多种疾病,如血色素冷静病,由海洋性贫血,VB6 缺乏性贫血等造成红细胞生成削减、溶血性贫血、 急性肝损耗等。 因此应作多种相应的试验以求确诊,并进行治疗。71.6umol/L由于摄入量过多, 造成血中水公平于或超过此值时,必需实行合适的治疗措施。1.3.9. 葡萄糖参考值3.61 6.11mmol/L打算水平临床意义及措施2.8mmol/L禁食后 12 小时血糖测定值低于此值,就为低血糖症,可显现焦虑、出汗、颤抖和虚弱等症状,如反应发生较慢,且以易怒、嗜睡、头痛为主要症状,就应作其他试验, 以查找缘由。7mmol/L空腹血糖达到或超过此值,可考虑糖尿病的诊断,但应加作糖耐量试验。10mmol/L饭后 1 小时测得此值或高于此值,就可高度怀疑为糖尿病。1.3.10. 血尿素（ Urea） 参考值3.67.1mmol/L打算水平临床意义及措施3.0mmol/L低于此值常见于血液释放过多或肝功能不全7.1mmol/L此值为正常上限, 高于此值应考虑能引起尿素上升的多种可能缘由,如肾功能不全、高蛋白饮食及上消化道出血等,此时测定血清肌酐有助于正确评判肾脏功能。14.2mmol/L高于此值常见于严峻的肾功能不全,应挑选其他有力的诊断方法及治疗措施。1.3.11. 尿酸（ UA ）参考值男性 120 420umol/L女性 90 360umol/L打算水平临床意义及措施110umol/L此值在参考下限邻近,等于或低于此水平,应实行多种诊断措施,以鉴别各种疾病。480umol/L此值高于参考范畴上限,等于或高于此水平常,应实行各种诊断措施,鉴别各种疾病。640umol/L等于或高于此值, 具有形成肾结石或痛风的高度危急,应准时实行适当的治疗可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结措施。1.3.12. 肌酐（ Cr）参考值44133umol/L40umol/L在婴幼儿超过此值,应考虑肾功不全的可能性,因此必需进一步作肾脏功能的检查和评判。141umol/L成人值如超过此水平, 应考虑进一步进行其他肾功能检查试验,如肌酐清除率试验。530umol/L高于此水平,几乎确定有肾功能受损,所以此值具有重要的诊断及评估意义, 应准时实行必要的治疗措施。1.3.13. 总蛋白（ TP） 参考值6080g/L45g/L低于此值往往与水肿有关,应考虑给以相应治疗,同时可作更全面的检查如尿蛋白、肾及肝脏功能等。60g/L此为参考范畴下限, 等于或低于此值时, 多种可引起总蛋白偏低的缘由均应考虑, 并可挑选上面的一些试验项目,作进一步检查。80g/L高于此值已超出参考范畴上限,能引起总蛋白上升的各种缘由均应加以考虑,仍可通过血清蛋白电泳等项目作进一步检查。1.3.14. 白蛋白（ Alb ） 参考值3555g/L20g/L低于此值,一般在肝病病人提示严峻预后不良。仍应测定尿蛋白,以查明有无过多的蛋白丢失。35g/L此亦为参考值下降,凡低于此值时,各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范畴,如肾病、肝功不全、严峻的养分不良、急、慢性炎症、恶性肿瘤等。57g/L在此值以上的,应考虑脱水的可能性,并进行红细胞比积测定,以检查其是否增高。1.3.15. 胆固醇参考值2.84 7.11mmol/L1.81mmol/L低于此值常提示有严峻肝功不全,应考虑适当的诊断及治疗措施,如已知存在肝病,就低于此值提示预后不良。5.18mmol/L此为 75%的成年男子血中胆固醇值,测定值高于此水平,提示有患冠状动脉粥样硬化的中度危急, 故应实行相应措施, 如采纳低饱和脂肪酸、 低胆固醇、 高纤维素饮食。5.70mmol/L此为 90%的成年男子血中胆固醇水平,高于此值有患冠状动脉粥样硬化的高度危急,如病人不接受低胆固醇饮食,就应采纳药物治疗。7.26mmol/L高于此值会由于患动脉粥样硬化而预后严峻,必需准时实行有力的治疗措施, 如饮食掌握,药物治疗等。1.3.16. 高密度脂蛋白胆固醇（ HDL-C ）参考值男 1.14 1.76mmol女 1.22 1.91mmol0.91mmol/L （男） 低于此值提示易发生冠状动脉性心脏病的危急增加。1.03mmol/L （女）1.42mmol/L （男） 高于此水平发生冠状动脉性心脏病的可能性很小。1.68mmol/L （女）1.3.17. 甘油三酯（ TG）参考值0.56 1.70mmol/L （此值因年龄和性别有所差别）0.45mmol/L此值正常下限邻近, 低于此值多与养分不良有关,应进行正确的诊断和治疗。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结1.69mmol/L年轻男性此值接近参考范畴上限,为动脉粥样硬化性心血管病的一个危急因子,应赐予病人供应合适的预防建议。4.52mmol/L高于此水平常预示会发生动脉粥样硬化性心血管疾病,应赐予适当治疗,如掌握饮食和用降脂药物等。1.3.18. 胆红素（ Bili ）参考值1.718.4umol/L24umol/L此水平在参考值范畴以上,如测定值超过此水平,各种可能引起Bili 增高的缘由均应考虑,包括肝功能不全、肝外堵塞、溶血、Gilbert 综合征（家族性非溶血性黄疸）。此时进行 ALT 、 AST 凝血酶原时间和 ALP 测定,可帮忙确认或排除肝脏疾病43umol/L测定值高于此水平往往显现黄疸,当显现黄疸,但Bili 测定值又在此水平以下的,就提示应依据这一情形查找缘由。340umol/L婴胆红素超过这一水平,往往与脑损耗（核黄疸）有关,治疗时应依据临床及其他试验结果考虑换血。1.3.19. 丙氨酸氨基转移酶（ ALT ） 参考值540U/L （ 37）20U/L此水平在参考范畴以内,低于此值可排除很多与ALT 上升有关的病种,而考虑其他诊断。此值可以作为病人自身的ALT 的对比,与过去和（或）将来的值进行比较。60U/L高于此值时,对可引起ALT 增高的各种疾病均应考虑,并应进行其他检查以求确诊。300U/L高于此值通常与急性肝细胞损耗有关,如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等,而酒精性肝炎的ALT 往往低于此值,其他如传染性单核细胞增多症、多肌炎等也都往往低于此值。1.3.20. 天门冬氨酸氨基转移酶（AST ） 参考值840U/L （ 37）20U/L此为排除值,低于此水平常可排除多种与AST 增高有关的疾病。因此应考虑其他的诊断。 这个参考范畴内的值仍可作为病人自身对比,可与过去和（或）将来的测定值进行比较。60U/L此值高于参考范畴上限,当AST 测定值超过此水平常,多种与AST 增高有关的疾病均应加以考虑,如肝细胞损耗、心肌梗塞、肌肉与骨骼疾患,肝后胆道堵塞等,此时同时测定 ALT 、ALP 、Bili 、 CK 等鉴别是肝脏疾病仍是心肌疾患有重要意义。300U/L高于此值通常为急性肝细胞损耗,如病毒性肝炎、中毒性肝炎等,而一般酒精性肝炎、心肌梗塞、进行性肌养分不良等测定值均在此水平以下。1.3.21. 碱性磷酸酶（ ALP ）参考值成人 40 160U/L （ 37）儿童50 400U/L60U/L此水平在参考范畴以内,低于此水平常可以排除很多与ALP 上升有关的病种, 而考虑其它的诊断。此值可作为病人自身ALP 的对比值,可与过去和（或）将来的值进行比。200U/L此水平高于成人参考值范畴上限,高于此值时,应考虑能引起ALP 上升的多种疾病的可能性,如肝脏病变、胆管结石、肿瘤等引起肝外胆汗积郁、成骨细胞瘤、肿瘤等。为进一步鉴别肝胆或骨骼病变,可进行血中r-GT 测定。400U/L此为儿童参考值范畴的上限值,高于此值时,多种可引起ALP 上升的病变均应列入考虑范畴,但为进一步明确诊断,仍应同时进行其他项目的测试。1.3.22. 淀粉酶（ amy）参考值6080 somogyi unites可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结50 Som U低于此值应考虑有广泛的胰腺损害或明显的胰腺功能不全,如已确认为胰腺病变,就 amy 低于此值往往提示有严峻的预后。120Som U此值在参考值范畴之内, 如低于此值, 在大多数情形下应排除急性胰腺炎的可能性。另外一些疾病,如消化道穿孔、大量酒精摄入,唾液腺体疾病（流行性腮腺炎）、严重肾病、胆结石等可在此值以上。200Som U此水平超过参考值上限、 如超过此值, 同时其他临床及试验室指标也支持的话, 可以确诊为急性胰腺炎。1.3.23. 谷胺酰转移酶（ GGT） 参考值050U/L （ 37）20U/L此值在参考范畴以内,低于此值可排除部分与GGT 上升有关的疾病。此值并可作为病人以前或将来的对比值。60U/L高于此值应考虑 GGT 上升的各种可能情形,测定值在60 150U/L 范畴内,且ALP 在正常范畴的病人,很可能在测定前有服药和饮酒的情形。150U/L高于此值常有肝胆管疾病,应实行各种确诊措施,并进行积极治疗。1.3.24. 肌酸激酶（ CK）参考值男 10 200U/L女 10 170U/L100U/L此值在参考范畴以内,低于此值就可排除很多种与CK 上升有关的疾病,同时此值也可作为病人的对比,用于与以后的CK 测定值比较。240U/L急性心肌梗塞后12 天内,可高于此水平,其他有关诊断试验,如CK-MB , 可帮忙确诊。1800U/L当测定值高于此水平常,患其他疾病的可能性高于患单一急性心肌梗塞的可能, 包括横纹肌炎,震颤性谵妄、癫痫等。此时应准时进行其他项目的检验以便确诊。1.3.25. 肌酸激酶同工酶（CK-MB ） 参考值010U/L15U/L高于此值,且有连续性临床表现（胸痛、心电图显示特异性转变等）,提示为急性心肌梗塞,应准时进行治疗。90U/L高于此值多由于非心肌性CK-MB 释放,如恶性肿瘤, 应实行其他有关诊断方法, 予以确诊。1.3.26. 乳酸脱氢酶（ LDH ）参考值100 240U/L （ LP）170U/L此值在参考范畴以内,等于或低于此值可排除很多与LDH 上升有关的疾病,而考虑其他的诊断。此值仍可作为病人自身的对比,用来与以前或将来的测定值作比较。300U/L高于此水平常, 应考虑到可能引起LDH 上升的各种疾病, 如心肌梗塞、 肝病变、传染性单核细胞增多症、 进行性肌养分不良等。 因此,应作其他各种试验, 以作出明确诊断。血清溶血可使测定值增高,应予以留意。500U/L高于此值,常见于巨幼细胞性溶血,急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等,此时应作其他多种检测来作出正确诊断。1.3.27. C- 反应蛋白（ CRP） 参考值<12mg/L20mg/L测定值高于此水平, 就提示病人有严峻的细菌感染、活动性风湿及恶性肿瘤等, 应立刻赐予诊断及实行适当的治疗措施。1.3.28. 免疫球蛋白 G（ IgG）参考值7.016.0g/L 免疫比浊法 6.0g/L低于此值多与免疫缺陷病有关可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结17.0g/L此水平明显高于参考范畴上限,多怀疑有 IgG 型骨髓瘤, 此时应通过骨髓细胞学检查、血清蛋白电泳和免疫电泳来帮助诊断。50g/L高于此值应高度怀疑患有IgG 型单克隆性 球蛋白病（如 IgG 型多发性骨髓病） 。1.3.29. 免疫球蛋白 A （ IgA ）参考值0.57 4.14g （免疫比浊法）（成年人）0.40g/L低于此值与免疫缺陷或IgG、IgM 型单克隆 球蛋白病有关4.50g/L此值高于参考值上限, 高于此值可怀疑是否有IgG 型 球蛋白病, 为此仍应做别外的一些试验,如骨髓细胞学检查、血清蛋白电泳、免疫电泳等。10.0g/L高于此值就高度怀疑为IgA 型 球蛋白病,如 IgG 型多发性骨髓瘤。1.3.30. 免疫球蛋白 M （IgM ）参考值0.50 2.70g/L （免疫比浊法） 0.40g/L低于此值多与免疫缺陷病有关3.00g/L此值超出参考范畴上限,高于此值可怀疑有IgM 型单克隆 球蛋白病（如原发性巨球蛋白血症等）1.3.31. 免疫球蛋白 E（ IgE）参考值成人 0 380KIU/L1 2 岁儿童012KIU/L 12KIU/L1 2 岁儿童低于此水平表示无严峻过敏的危急性。60KIU/L1 2 岁儿童高于此水平,提示发生严峻过敏的危急性较高。400KIU/L成人高于此水平,提示有过敏性疾病,如IgE 型骨髓病。1.4. 生化检验的原理和方法临床生化检验, 主要在技术方法的应用方面上探讨生化检验新技术以及新的标记物的挑选和评判,用以帮忙诊断, 又称 “诊断生化 ”。主要应用了以下技术： 光谱技术、 电化学分析技术、层析技术、电泳技术、离心技术、抗原抗体特异性反应和标记技术、核酸扩增、杂交及序列分析技术等, 其中生化分析仪主要运用了光谱技术中的吸取光谱法和比浊法。分别介绍如下：1.4.1. 吸取光谱法比色分析是基于溶液对光的挑选性吸取而建立起来的一种分析方法,又称吸取光谱法。 有色物质溶液的颜色与其浓度有关。溶液的浓度越大, 颜色越深。利用光学比较溶液颜色的深度, 可以测定溶液的浓度。1.4.1.1. 物质的颜色和光的关系光是一种电磁波。自然是由不同波长（400 700nm）的电磁波按肯定比例组成的混合光, 通过棱镜可分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色相连续的可见光谱。如下图：如把两种光以适当比例混合而产生白光感觉时,就这两种光的颜色互为补色。下图中处于同始终线关系的两种色光（如绿与紫、黄与蓝）互为补色。溶液颜色 绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 青蓝 青吸取光 颜色 紫 蓝 青蓝 青 青绿 绿 黄 橙 红波长 nm 400 450 450480 480 490 490 500 500560 560 580 580600 600 650 650760当白光通过溶液时, 假如溶液对各种波长的光都不吸取, 溶液就没有颜色。 假如溶液吸取了其中一部分波长的光, 就溶液就蜈现透过溶液后剩余部分光的颜色。 例如,我们看到 KMnO4 溶液在白光下呈紫红色, 就是由于白光透过溶液时, 绿色光大部分被吸取, 而其他各色都能透过。在透过的光中除紫红色外都能两两互补成白色,所以 KMnO4 溶液出现紫红色。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结同理, CuSO4溶液能吸取黄色光,所以溶液呈蓝色。由此可见,有色溶液的颜色是被吸取光颜色的补色。 吸取越多,就补色的颜色越深。比较溶液颜色的深度,实质上就是比较溶液对它所吸取光的吸取程度。1.4.1.2. 吸光度的定义一束强度为 Io 的平行单色光通过一个含有浓度为C 的吸光物质、 厚度为 L 的吸取池时, 如上图,一些光子被吸取,光强从Io 衰减为 It ,就该溶液的吸光度A 等于：其中 为透光率。1.4.1.3. 吸取曲线假如测定某种物质对不同波长单色光的吸取程度,以波长为横坐标, 吸光度为纵坐标作图可得一条曲线,即物质对光的吸取曲线,可精确的描述物质对光的吸取情形。下图是几种不同浓度的KMnO4溶液的吸取曲线,溶液对波长525nm邻近的绿光吸取量 最强,而对其他波长的光吸取较弱。光吸取程度最大处的波长叫做吸取波长,用max 表示。不同浓度的 KMnO4溶液所得的吸取曲线,最大吸取波长都一样,只是相应的光被吸收的程度不同。吸取曲线可作为比色分析中波长选定的依据,测定时一般挑选 max的单色光作为入射光。这样即使被测物质含量较低也可得到较大的吸光度,因而可使分析的灵每度较高。如所测定的溶液无色, 可在测定前加入适当的显色剂,通过与待测成分的化学反应使溶液晱色即可测定此待测成分。a. Lamber-Beer定律其中 为吸光系数,有两种表示方法摩尔吸光系数和比吸光系数,摩尔吸光系数的意义为1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm时的吸光度,比吸光系数的意义为浓度为1%w/v的溶液在厚度为 1cm时的吸光度。 C 为溶液的浓度。 L 为吸取池的厚度 （单位为 cm ,亦称光径） 。Lamber-Beer定律的意义为：某溶液的吸光度等于该物质的吸光系数、浓度 C 和光径 L（cm ）的乘积,当光径不变时,浓度和吸光度成正比。这是生化分析仪利用吸取光谱法进行定量测定的基础,见下图：Lamber-Beer定律成立的前提条件是：1 被吸取光为单色平行光,2 待测定溶液为稀溶液。b. 比浊法比浊法分两类：透射比浊法和散射比浊法。带有小粒的悬浮液和胶体溶液都具有向四周八方散射入射光的性质,当一束平行光通过含有悬浮质点的悬浮液或胶体溶液时,同时受到散射和吸取两个因素的影响,使光的强度减弱。在光源的光路方向上测量透射光（实际上仍包括散射光）强度与入射光强度比值, 并通过该比值测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度,称为透射比浊法, 在光路的其他方向上测定测量散射光强度,从而测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度,称为散射比浊法。免疫学方法是以被检测物质作为抗原,然后用免疫动物的方法制备相应的抗体,利用抗原抗体的特异性结合反应来对被检测物质进行定量。影响免疫比浊的因素： 1. 抗原抗体比例。 抗原抗体比例对复合物的数量和颗粒大小关系极大,当抗体> 抗原时成正相关,当抗体< 抗原时成负相关。 2. 抗体纯度和效价。 3. 增聚剂。 在免疫反应中, 为增强抗原抗体反应常使用增聚剂,如 3-4 的聚乙二醇等,利用其破坏抗原抗体的水化层,促进其靠近反应,但如浓度可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结不适合,高了会影响其它溶质或产生非特异性集合影响结果。透射比浊法一束强度为 Io 的平行单色光通过一个含有悬浮质点（颗粒大小与光源波长接近）的悬浮液或胶体溶液时,如上图,其透射光强度I 可用下式表示：式中, L 为悬浮液或胶体溶液在光前进方向上的长度,为浊度系数,与悬浮质点的浓度C成线性关系。令 =2.3KC ,就：该式与 Lamber-Beer定律相像, 这是生化分析仪利用透射比浊法进行定量测定的基础,该法可以与吸取光谱法共用一个检测器,全部生化分析仪, 不需增加任何部件, 均可利用此法进行测定。大部分特种蛋白,如载脂蛋白类（apoAI,apoB等）、补体类（ C3 、C4 等）、免疫球蛋白类 （ IgG ,IgM 等）等,配以相应的试剂, 可利用此法在生化分析仪上进行测定。散射比浊法一束强度为 Io 的平行单色光通过一个含有悬浮质点 颗粒大小远小于光源波长 的悬浮液或胶体溶液时,如上图,与入射光垂直方向上,其散射光强度I 可用下式表示：式中, n1 、n2 分别表示质点与介质的折射率,表示单位体积内的质点数,r 表示质点半径。可见散射光强度与悬浮质点的浓度成正比,这是利用散射比浊法进行定量测定的基础,因另需在光路垂直方向上增加一检测器,目前只有极少数生化分析仪可利用散射比浊法进行定量测定,而几乎全部的特种蛋白分析仪、免疫分析仪等都能利用散射比浊法进行定量测定。1.5. 生化试剂的作用和分类1.5.1. 生化试剂的作用a) 显色性在测定前向血清中加入适当的显色剂（试剂） ,与待测成分的化学反应使溶液变色即可测定此待测成分。b) 单一性不同的试剂和血清中的不同成分反应,引起了吸光度的变化。1.5.2. NAD+ NADH （ NADP+ NADPH ）指示系统1.5.2.1. 反应原理NADH 和 NADPH 在 340nm 有特点性吸取峰,而 NAD+ 和 NADP+ 在 340nm 无特点性吸取峰, 利用其偶联的脱氢酶 工具酶 反应, 依据 340nm 吸光度的变化, 可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT 、AST 、CK 、LDH 、CK-MB 、-HBDH、Glu （己糖激酶法）、 UREA 、NH4+ 、CO2 等1.5.2.2. 举例说明ALT （ GPT ）的测定原理（中生试剂,IFCC ） 试剂成分和反应公式：R1 ： NADH 、乳酸脱氢酶（ LDH ）。R2 ： L- 丙氨酸 、- 酮戊二酸 。原理：NADH的削减,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率与 ALT 活性成正比 动力学法 。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结a-HBDH（ LDH1 ）的测定原理（罗氏试剂,DGKC ） 试剂成分和反应公式：R1 ：磷酸盐缓冲液,a- 酮基丁酸,防腐剂。 R2 ：NADH ,防腐剂。原理： NADH的削减,引起 340nm吸光度的下降,下降速率与a-HBDH活性成正比 动力学法 。1.5.3. p-NP和 p-NA指示系统1.5.3.1. 反应原理p-NP和 p-NA在 405nm有特点性吸取峰,依据405nm吸光度的变化,可以测定物质的浓度或活。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP 、ACP 、r-GT 、 AMY 等。1.5.3.2. 举例说明ALP （ AKP ）的测定原理（罗氏试剂,IFCC ） 试剂成分和反应公式：R1 ：AMP 缓冲液,镁离子,锌离子,PH 10.44。R2 ：对硝基苯磷酸,防腐剂,PH 8.5原理：在镁离子和锌离子的存在下, 碱性磷酸酶解离对硝基苯磷酸形成磷酸盐和对硝基苯酚, 引起 405nm吸光度的上升,上升速率与ALP 活性成正比（动力学法）。GGT 的测定原理（罗氏试剂,IFCC ） 试剂成分和反应公式：R1 ：NaOH ,双甘肽, PH 7.7 。R2 ：L r 谷氨酰 3 羟基 4 硝基苯氨,防腐剂。原理： 5- 氨基 -2- 硝基苯甲酸的生成,引起405吸光度的上升,上升速率与GGT 活性成正比。1.5.4. H2O2偶联的指示系统1.5.4.1. 反应原理H2O2在过氧化物酶的作用下,可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素,导致某一波长吸光度的增加,因此可用来测定物质的浓度或活性。1.5.4.2. 举例说明GLU 的测定原理（中生试剂） 试剂成分和反应公式：R1 ：4- 氨基安替吡啉、抗坏血酸氧化酶。R2 ：葡萄糖氧化酶 （GOD ）、过氧化物酶（ POD ）、酚 。测定原理： 醌亚胺的生成, 导致 500nm吸光度的增加, 增加的程度与Glu 的含量成正比。CHOL 的测量原理（德赛试剂） 试剂成分和反应公式：R1 ：Good s缓冲液 PH 6.7 ,苯酚, 4 氨基安替比林,CHE （胆固醇脂酶）, CHO （胆固醇氧化酶）, POD （过氧化物酶）。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结测定原理：醌亚胺的生成,导致500nm吸光度的增加,增加的程度与CHOL 的含量成正比。1.5.5. 抗原抗体反应指示系统1.5.5.1. 反应原理特异性抗体与抗原 待测物质 在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物,形成肯定的浊度,导致特定波长透光率的转变。在抗体过剩的前提下,转变程度与抗原浓度成正比。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有apoAI、apoB 、Lpa 、IgG 、IgA 、IgM 、C3 、C4 、CRP 等。1.5.5.2. 举例说明（略）1.5.6. 其它显色反应1.5.6.1. TP的反应原理蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物,导致 540nm吸光度的增加,增加的程度与蛋白质的含量成正比。1.5.6.2. ALB的反应原理在 pH4.2环境中,溴甲酚绿在有非离子去垢剂聚氧乙烯月桂醚（Brij-35）存在时,可与白蛋白形成蓝绿色复合物,导致630nm吸光度的增加,增加的程度与白蛋白的含量成正比。其它的显色反应仍有Ca 和 Mg 等物质的测量方法,这里就不一一举例了。1.6. 常用临床生化项目的主要测定原理和临床意义项目 测定原理 临床意义ALTNADH的削减,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率与 ALT 活性成正比 动力学法 。ALT 主要存在于肝细胞中, 心肌细胞次之, 活性上升表示有肝细胞损耗,也可见于心肌及骨骼肌损耗。ASTNADH的削减,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率与 AST 活性成正比 动力学法 。AST 主要存在于心肌细胞中,肝细胞次之, 活性上升表示有心肌损耗,也可见于肝细胞及骨骼肌损耗。ALP对硝基苯酚的生成,引起405nm吸光度的上升,上升速率与ALP 活性成正比 动力学法 。 ALP 主要存在于骨、肝、肾和肠,活性上升见于肝胆及骨骼疾病等。r-GT5- 氨基 -2- 硝基苯甲酸盐的生成,引起405nm吸光度的上升,上升速率与r-GT活性成正比 动力学法 。 活性上升与肝胆疾病、心肌梗塞、脑损耗、慢性酒精中毒、苯妥英钠治疗有关。-HBDHNADH的削减,引起 340nm吸光度的下降,下降速率与-HBDH活性成正比 动力学法 。 活性上升与急性心肌梗塞有关。LDHNADH的生成, 引起 340nm吸光度的上升, 上升速率与 LDH 活性成正比 动力学法 。 活性上升与心肌梗塞有关, 也可见于肝脏疾病、未治愈的恶性贫血、巨幼红细胞贫血、肾脏疾病、恶性肿瘤等。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结CKNADPH的生成, 引起 340nm吸光度的上升, 上升速率与 CK 活性成正比 动力学法 。 活性上升与心肌梗塞有关, 也可见于肌养分不良、甲状腺机能减退、肺梗塞、急性脑血管疾病等。CK-MB先用 CK-M的抗体抑制 CK-M的活性,其余同 CK 的测定 活性上升主要见于心肌梗塞。-AMY1 用生色基团对 - 硝基酚修饰 - 麦芽七糖苷 PNP-G7作为底物, 经 - 淀粉酶水解成小分子的寡糖苷,再经帮助酶- 葡萄糖苷酶进一步水说明放诞生色基团PNP ,导致 405nm吸光度增加,增加速率与-AMY活性成正比,ROCHE公司等采纳此法。2 用生色基团对 - 硝基酚修饰麦芽五糖苷PNP-G5作为底物,其余同1 。日本第一化学采纳此法, IFCC 举荐。3 采纳 2- 氯-4- 硝基苯酚 - - 麦芽三糖 CNP-G3做底物,不需要用帮助酶,直接由淀粉水 解产生 CNP ,导致 405nm吸光度增加, 增加速率与 -AMY活性成正比, 科华采纳此法。 活性上升见于急性胰腺炎、胰腺管道堵