检验科标本采集方法(共18页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上检验科标本采集方法 一 、血液检验标本采集方法： 血液检验标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查,例如血细胞计数和分类、形态学检查等；血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。按照血标本采集部位的不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血,少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血，毛细血管血主要用于各种微量法检查或大规模普查。静脉血是最常用的实验室检查标本，真空采血法是最好的静脉血采集技术。基本原理是双向针的一端插入真空试管内，另一端在持针器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途，可根据需要选择相应的盛血试管。 （一）、静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置： 1、止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过 40秒为宜，否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH 值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。 2 、采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果发生严重干扰，特别是血糖和电解质。 3、 避免溶血、杂质污染：采血器具必须无菌、干燥、洁净避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同，样本溶血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。 4、血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集，理想的时间是早晨 7：00到 8：00，尤其是监测为目的时，更要保证标本采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入应在前一天下午 6：00 到7：00 (急诊检验例外)。血样采集应在不服药期间，如在早晨服药前。血样采集时，患者应仰卧位，采血点应在同一静脉区，通常为手臂静脉。 5、标本采集后须立即送检，放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检测结果。 6、采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。 7、微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属。 8、采集样品所用材料的安全处置：使用后的采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置,禁止对使用后的一次性针头复帽,禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁形后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂，不得擅自废弃。 （二）、临床化学/免疫检验标本临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好使用真空负压采血管。标本采集主要注意事项有： 1、化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采 l管血； 2、采血量视检查项目多少不同而异，通常为4.05 .0ml； 3、多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血：血培养无添加剂管凝血管有添加剂管有添加剂管的顺序为：橼酸盐管肝素管EDTA管草酸盐氟化钠管 4、 不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后，须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离出来，避免由此而影响检验结果的准确性。从血液标本采集开始，必须在2h内将全血处理为血清或血浆。 （1）、血清(非抗凝血)：采血后标本于 2225(室温)1530min 后可自行(自发)完全凝固，禁用木棍和玻棒等剥离凝块冷藏标本凝集较慢，加促凝剂者凝集加快。 （2）、血浆(抗凝血)：应采用抗凝管采血,采血后立即颠倒混合 510 次，采血后数分钟内可离心分离血浆。 （3）、冷藏标本：用于稳定血液中温度依赖性成分(抑制细胞代谢)的检测项目，标本于 28冷藏(标本采集后立即置于冰箱中，冷藏必须充分)；标本需冷藏的测定项目有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏，血钾测定标本冷藏不得>2h。全血标本切忌冷冻。 （4）、代谢抑制剂和防腐剂的应用：用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后，血细胞未分离情况下血标本中Glu，2225稳定24h28稳定48h；氟化钠不适用于新生儿及儿童的Glu测定(因儿童PCV高，细胞糖酵解难以控制)；氟化钠一麝香草酚混合剂不适合酶学检测(因氟化钠一麝香草酚混合剂抑制酶活性)）；甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。 （三）、红细胞沉降率（血沉，ESR）检测标本静脉采集枸橼酸钠(109mmolL，即32.06gL)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血)，黑帽管。采血注意事项： 1、单独采1管血，准备采血至2 ml刻度线（抗凝剂：全血=1：4）； 2、采血后立即上下颠倒混合510 次； 3、采血后应尽快送检（必须 2h内检测）。 （四）、血常规（全血细胞分析）检验标本一般用EDTA 1.52.2mgml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。采血注意事项： 1、采血后立即上下颠倒混匀，510次不可用力震荡； 2、应按抗凝管刻度采血至 2ml，可不用空腹； 3、采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过 2 小时WBC形态会发生改变)； 4、血型与血常规可采1管血。 （五）、75克葡萄糖耐量试验（OGTT）/胰岛素释放试验/C-肽释放试验 1、病人准备：试验前3日，每日进食碳水化合物量不低于 250-300 克，且维持正常活动，影响试验的药物（如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等）应在3 日前停用，试验前病人应 1016小时不进食。 2、标本采集：临床上常用方法是清晨抽空腹血后，口服 75 克葡萄糖，再于给糖后 0.5、1、2、3 小时各采血2ml /1次（共5次）。 3、标本保存：采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血，于 28保存。 （六）、高血压系列检验标本 1、高血压三项（肾素、血管紧张素I、II） (1)、病人准备：-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要在停药后2周测定肾素活性(PRA)，利血平等代谢慢的药物应在停药 3 周测定。不宜停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体 PRA 水平，故病人测定 PRA 前 3 天应适当减少食盐摄入量，最好同时测定取血前24小时尿钠含量，以供分析PRA结果时参考； （2）、标本采集：静脉取血 45ml，拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后上下颠倒 5 次,混匀后 2500 转/分,离心 510 分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存（-15）。溶血标本不能检测； （3）、标本类型、标本量：专用抗凝管采血，分离血浆，取 2ml送检； （4）、标本保存：低温冰箱保存（-15以下），可保存 2 个月； （5）、注意事项：申请单上应注明抽血时的体位(卧位：病人在早上 6-8时起床前，取静脉血；立位：病人起床后活动 3小时，取静脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食)；标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。 2醛固酮 （1）、病人准备：留样前应停服利尿剂至少 3 周，停服抗高血压药物 1 周； （2）、标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20保存待测；尿液标本则留取24小时尿量，用1015mL浓盐酸防腐； （3）、申请单上注明：抽血时的体位（卧位、立位）和饮食情况（普食饮食、低钠饮食）；尿液标本要准确记录24小时尿量。 （七）、皮质醇标本采集及注意事项正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为早上 8 点或下午 4 点采血，送检时请务必在申请单上注明采血时间。 （八）、T细胞亚群标本采集及注意事项 1、标本类型：必须用肝素钠抗凝血。 2、标本量：2ml。 3、该项目在不同年龄段的参考值不尽相同，所以送检时请务必在申请单上注明病人年龄。 （九）、微量元素检测标本采集要求 1、采血时不能戴乳胶手套（对锌有污染），可使用“PE”（塑料）手套(或不戴手套把手洗干净) 。 2、橡皮塞对锌有污染，故普通采血管不可使用，建议使用本中心提供的专用管 (专用管有三种，贴红标签管为铅、硒专用管，即全血管，内有肝素；贴蓝标签管为血浆分离管，内有肝素；贴黄标签管为锌铜铁钙镁专用管，即血浆管)。 3、使用专用管前，请检查红、蓝色标签管中是否有肝素（液体或白色晶体粉末）,开盖前请轻磕管底，将盖子上吸附的肝素弹下。 4、采集方法：采静脉血 2.53mL，将 0.5mL 血液注入全血管(红标签管)，粘上条形码，用于血铅和血硒的检测；将剩余2.02.5mL血液注入血浆分离管(蓝标签管)，立即轻轻颠倒混匀，以 2000r/min离心 5分钟，再吸取血浆（约 1mL）至血浆管(黄标签管)，粘上条形码，用于检测锌铜铁钙镁；最后将全血管(红标签管)和血浆管(黄标签管)装入自封袋送检。 5、如不能及时送检，应放置2-8冰箱保存。 6、溶血对结果影响较大，应尽量避免。若血浆为溶血标本，视为不合格标本。 （十）、遗传学检测标本采集要求 1、标本采集：外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管（遗传专用）和采血针进行采集，采集后立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血；脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后，打开中心配送的肝素抗凝管盖，将脐带血或骨髓注入采集管中，立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血，请注意无菌操作，不要污染管盖。胸腹水标本可在采集后注入废弃生理盐水注射液瓶中，并用 75U/ml的肝素抗凝。请避免使用注射器采集标本后直接注入采集管的方式进行标本采集，以免引起溶血；请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。 2、标本量：外周血、脐带血、骨髓各4ml；胸腹水 100ml。 3、标本送检：合格标本须于采血后当天送至遗传实验室，故请于标本采集后及时通知艾迪康工作人员接收标本；标本有溶血、凝血现象，也视为不合格标本。骨髓标本应尽快送至实验室。 4、标本保存：标本采集后置于1825保存，不可冷冻，不可放置于高温环境中。 5、申请单填写：请完整填写申请单，尤其是标本采集时间、性别、病史、临床诊断等。 （十一）、基因检测标本采集要求 1、所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取,严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意无菌操作。2、为避免污染,送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。 3、采集方法： （1）、血液标本抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然凝固或 2000 转/分离心，取分离出的血清置 28保存，不超过24小时，等待艾迪康工作人员接收；血清标本不宜反复冻融； （2）、女性分泌物标本 分泌物标本采样应在非月经期进行；采样前 3 天内不使用阴道内药物，不冲洗阴道；24小时内不应有性行为； 采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转 35 周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对于怀疑 HPV 感染的患者，尽量采集病变部位标本，可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖； 男性分泌物标本：先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道 1cm，旋转 35 次获得标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖； 疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，采集疣体表面脱落细胞。用生理盐水润湿棉拭子，用力来回擦拭疣状组织表面三次，取得脱落细胞。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖。 （十二）、骨髓检查的要求和注意事项 1、涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”，骨髓片注明“M”，以示区别。 2、申请单注意事项： （1）、病例摘要:应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚； （2）、化验结果：血常规结果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分类也一并填上； （3）、采取骨髓部位也应填上，如果采取骨髓时不顺，应重抽，以免耽误病人； （4）、写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等（以便与临床密切联系）。二、 尿液常规检验标本采集 （一）、尿标本种类按检查目的，常可采用下列标本： 1、晨尿：最好，安静状态下留取清晨第一次尿，该标本为浓缩尿其细胞和管型等形态完整，适合做各种有形成分的检查和尿蛋白、尿糖等项目的测定。 2、随机尿：较常用，适用于门诊和急诊病人常规检验结果易受多种因素影响。 3、空腹或餐后尿：适用于糖尿病、尿胆原、尿蛋白等的检查。 4、 24h尿：用于尿液成分定量检查分析： （1）、24h 尿采集方法：留尿当日早晨 8 时排空尿液，之后每次排尿均收集于一大容器内至次日早晨 8时最后一次尿液共24小时之间的所有尿液全部收集于洁净容器内。在收集期内每次尿液标本均应放冰箱(28)或阴凉处保存全部收集完毕测量并记录 24h总尿量，混匀后取 20-30毫升置于有盖容器内送检即可。 （2）、24h尿可用于检测Cr、BUN、K、Na、CL、Ca、P、UPR、UAER等 5、特殊实验尿(如 3h、8h、12h 等计时尿和餐后尿等)，则应按医嘱要求进行留尿，并注明用药时间，便于分析比对。 6、清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿)：用于病原微生物学培养、鉴定和药敏。 （二）、尿液标本收集容器要求 1、清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用，有较大开口便于收集； 2、避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应注意避免烟灰、纸屑等异物混入； 3、无干扰化学物质(如表面活性剂、消毒剂)混入，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收集标本； 4、能收集足够尿液，最好大于50 ml，如收集定时尿，容器应足够大,并加盖，必要时加防腐剂； 5、如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿液。 （三）、尿液采集方法尿液常规检查标本应按以下原则进行采集： 1、尿液检验最好留取新鲜标本及时检查，否则尿液生长细菌，使其中的化学成分发生变化。新鲜晨尿最佳,以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对比。门、急诊患者亦可随机留取。在留取24h或 12h尿液时，尿液标本最好至冰箱保存，也可根据检测目的加入防腐剂(本室未要求使用防腐剂)。 2、尿标本的采集方法多采用自然排尿法，需要注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染；对自然排尿困难或需细菌培养者，可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。 3、尿中某些化学物质及有形成分不稳定，一经排出后易发生物理、化学变化；而尿中原有或污染的细菌生长也可导致成分改变，如葡萄糖被分解。因此，采集的尿应加盖后尽快送检，在采集后 2h内完成有关检查。 4、如不能及时送检或收集较长时段尿样,可采取化学防腐(不能用于微生物检查)、冷藏等保存措施；尿液标本冰箱可保存68h但细胞等有型成分会有破坏，会有结晶析出。 5、根据不同检测目的选择不同的防腐剂：临床最多用的尿液防腐剂为： （1）、甲醛(formalin)，用于尿液有形成分检查，浓度为 400mgL尿液，即 40； （2）、甲苯(toluene)，常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性或定量检查，520m1L尿液； （3）、浓盐酸（hydrochloric acid），用于定量测定尿醛固酮、儿茶酚胺等，浓度为1 m1L尿液。 6、沉渣检查：清晨空腹第一次尿,应在1 h内送检。标本置于干燥、洁净的容器尿杯中，至少 10 m1。一般情况下，由患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留取。 7、特殊试验外，晨尿或随机尿要留取中段尿送检，女性在经期不宜做尿液检查。 （四）、尿液采集注意事项 1、尿液标本必须新鲜，并按要求留取。从排出到检测应在 2h内完成，否则会影响尿化学成分及有形物质的改变。如不能及时分析，应置 4下冷藏保存，但冷藏时间最长不得超过 8h。有时冷藏后一些结晶析出会影响结果,因此从冰箱取出的尿标本应在室温中放置一定时间,使尿标本温度平衡到室温后再进行混匀，然后取样检测。尿标本不能冰冻，否则会影响某些成分的检测。如无特殊要求，均应采集清晨起床后的第一次尿，即晨尿检查。对于门诊和急诊的患者，可采集随机尿，易受食物、体位、活动等的影响。 2、标本留取后应及时送检，以免细菌繁殖、细胞溶解或被污染等。送检标本时要置于有盖容器内，以免尿液蒸发影响检测结果。 3、常规检验留取中段尿送检。细菌检验尿标本留取方法见后述。 4、特殊检验项目标本留取请随时与相应检验科室联系。 5、尿总蛋白(UPR)测定注意避免血红蛋白的污染,否则会使尿总蛋白假性升高；尿液中如含有免疫球蛋白轻链(如本一周蛋白)会使蛋白假性降低；应用多肽类药物治疗的病人，血液中的多肽会排泄入尿，可导致尿蛋白假性升高，如怀疑尿中有此成分，建议将尿液浓缩后作蛋白电泳。三 、粪便常规检验标本采集粪便常规检查标本采集方法及注意事项： 1、采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，一般检验留取新鲜的自然排出的粪便 35g，必要时可肛拭子采取，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内，贴好标识送检。标本容器最好用内层涂蜡的硬纸盒，便于检查后焚毁。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。 2、盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查，表面无异常时应从粪便表面、深处及粪端多处取材；采取标本后及时送检，否则可因 PH 及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。 3、不应留取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可导致某些项目检测结果出现错误。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等异物，易混淆实验结果。不应该从卫生纸或衣裤、纸尿裤等物品上留取标本，不能用棉签有棉絮端挑取标本。 4、做大便隐血试验时，应嘱患者于检查前 3d内禁食肉类、含动物血的食物、某些蔬菜，禁服铁剂和维生素C 等对实验有干扰作用的药物。选取外表及内层粪便收集于合格容器内及时送检，长时间放置可使反应的敏感度降低。 5、检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜 12pm或早晨排便前，于肛门周围皱襞处拭取标本，并立即送检。 6、检查血吸虫卵时应取黏液、脓、血部分，如须孵化毛蚴应留取不少于 30g 的粪便，并尽快送检必要时留取整份粪便送检。 7、检查痢疾阿米巴滋养体时，应床边留取新排出的粪便，从脓血和稀软部分取材，并立即保温送实验室，并且实验室接受标本后应立即进行检查。 8、细菌检验用标本应全部用无菌操作收集于灭菌封口的容器内。特殊检验项目留取标本时请预先联系。四 、浆膜腔积液检验标本采集 （一）、浆膜腔积液检查标本 1、浆膜腔积液标本一般由临床医生行无菌穿刺术采集标本。 2、送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取 2mI；细菌学检查用无菌管采集标本，厌氧茵培养留取1 mI，结核菌检查留取10ml。 3、标本采集后必须立即送检(否则可出现细胞变性，标本凝集，细菌溶解)。 4、用于细胞学检查时,可在标本中加适量 EDTA盐抗凝但还需留取1 管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性；化学检查标本宜用肝素抗凝。 （二）、脑脊液标本采集 1、由临床医师行腰椎穿刺术采集标本。 2、采集后的脑脊液分别收集于 3 个无菌试管中，每管 12 ml，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查（脑脊液常规）。 3、标本必须立即送检，放置过久影响结果，如细胞破坏、变性或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，使细胞计数降低，分类不准确等；存放的脑脊液葡萄糖会分解，使检测结果降低。 （三）、胸、腹水标本采集 1、由临床医师行无菌穿刺术，最好留取中段液体于消毒容器内，立即送检。 2、为防止出现凝块、细胞变性、细菌破坏自溶等，标本中应加入抗凝剂。常规及细胞学检查宜用EDTA-2K抗凝，生化检查标本宜用肝素抗凝。 （四）、关节腔穿刺液标本采集后第1管作微生物及一般性状检查，第2 管用肝素抗凝作细胞学及化学检查。 （五）、前列腺和精液检查前列腺液标本应由临床医师进行前列腺按摩术采集，可直接滴在玻片上；若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液。疑为前列腺结核、脓肿或肿瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失败或检查结果阴性，而明确有临床指征者，可隔35天后重新复查。精液采集最好在实验室附近，室温应控制在 2035,采集标本前禁欲 37 天采集精液前排净尿液。可用手淫法或其它方法，将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内。因精子生成日间变动较大，不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔12周检查一次，连续检查 23次。 （六）、细菌培养之脑脊液、胸腹水穿刺液、关节腔穿刺液标本采集 1、应在用药前采集,由临床医生以无菌条件下进行腰椎穿刺采集脑脊液 35ml，因脑膜炎球菌易自溶，流感嗜血杆菌也易死亡,故盛于无菌试管或小瓶中保温立即送检。或将脑脊液5ml直接注射于血培养儿童瓶中送检即可。 2、穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液。一般由临床医生穿刺抽取。标本的采集应在患者用药之前，或停药 12 天后进行。胸水、腹水可抽取 510m1，心包液、关节可抽取 25ml，将所得穿刺液分别盛于含有和不含有抗凝剂的无菌试管或小瓶中，充分混匀后，立即送检。五、 微生物检验标本采集 微生物学检验标本的正确采集、运送及处理，与细菌的培养、鉴定结果有十分密切的关系；对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、炭疽、肺鼠疫等)患者采集标本时,必须按国家规范化要求严格注意生物安全；医生、护士、检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题，并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导。 （一）、微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项 1、标本采集 （1）、申请单标记必须清楚(姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等)，以便实验室能够合理选择培养环境和培养基； （2）、尽量在抗生素应用前采集标本，以提高阳性检出率和避免漏检； （3）、标本采集应严格执行无菌操作； （4）、咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本，应插入运送培养基送检； （5）、痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群的标本，不可放入肉汤培养基内送检； （6）、采集标本的容器必须经灭菌处理，但不可用消毒剂。 2、标本运送 （1）、标本采集后应尽快送到微生物实验室； （2）、标本采集后在室温下超过2h未送达实验室，可视为不合格标本。 3、标本验收 （1）、实验室只能接受和处理合格标本； （2）、实验室对不合格标本退回必须说明原因，并应及时与临床联系。 4、注意事项 （1）、微生物检验样本必须按要求采集转运，否则将影响检查结果并给评价其意义带来麻烦甚至误导。 （2）、微生物样本极易被污染，污染的样本杂菌大量繁殖抑制病原菌生长，条件致病菌也是致病菌，如污染条件致病菌将误导临床，造成对患者的损害以及经济和时间的浪费。 （3）、某些标本离体极易死亡，应在床边采取和接种或立即保温送至实验室检验。室温放置或延迟送检，可使检出的阳性率降低；不能使用冷藏的样本检验。 （4）、厌氧菌样本采取必须隔绝空气，混入空气的样本影响检验结果，不能使用。 （二）、微生物学检验标本采集和处理 1、尿液标本采集和处理通常留取晨起第一次尿液(此时尿液在膀胱内储存 4h 以上)；尿液采集后要及时送检，并保证 2h 内接种；不能及时送检和接种时，尿液应置 48冰箱保存；冷藏标本应于 8h 内接种；怀疑沙门氏菌感染时，应于发病2w左右采集尿液，怀疑钩端螺旋体感染时，应于发病后 2w采集尿液，上述时间此时阳性率高。尿液微生物学检验标本采集方法如下： （1）、中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水或 1：1 000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，无菌生理盐水冲去消毒液，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿 51 0ml盛于带盖的无菌容器内送检。 （2）、导尿法：用导尿管导取 1015ml 尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检)； （3）、集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁容器中留取 24h尿液，取其沉渣1 01 5ml送检。 （4）、耻骨上膀胱穿刺法：培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用； （5）、肾盂尿采集法：必须由临床医生采集。注意事项：正常人的尿液是无菌的，除外尿道有正常菌群外，还有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌，故应该注意无菌采集。 2、粪便标本采集和处理 （1）、采集时间： 腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便； 伤寒患者于发病2w以后采集粪便； 怀疑霍乱时立即采集粪便送检。 （2）、采集方法： 自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，23g或 12 m1，盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检；若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。 直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 45cm(幼儿 23cm)，轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。 3、痰及下呼吸道标本采集和处理 （1）、自然咳痰法：晨痰为佳；先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿；再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；痰量不得少于1ml；痰咳出困难时可先雾化吸入 NaCI溶液(100gL，加温到45)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24小时痰。 （2）、小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。 （3）、支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。 气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液； 气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或活用支气管刷直接取得。 （4）、呼吸道标本采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次立即放入无菌试管中。注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。 4、血液及骨髓培养标本 （1）、血培养标本采集指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征： 发热(38)或低热(36)； 寒热； 白细胞增多(>10×109L，特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时)； 粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×109L)； 血小板减少； 皮肤粘膜出血； 昏迷； 多器官衰竭。 （2）、最常用的方法为血液增菌培养法。培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要 810ml。儿童瓶为需氧瓶每瓶需血液13ml，另外，脑脊液和胸腹水也可用血液增菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，标本量与血液相同。 抗生素治疗前，严格无菌静脉采血 810ml(儿童 l4m1)； 无菌注入专用培养瓶(成人、儿童、需氧菌、厌氧茵、L型茵需要不同培养瓶)中送检； 如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取 6份血液标本送检； 必要时可需氧菌、厌氧茵(占10)和 L型菌同时培养； 疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养； 必要时可取骨髓l2 ml，无菌注入专用培养瓶中送检。 注意事项：血液在正常情况下为无菌标本，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。一般病人在发病初期 12天或发热高峰时采集血液标本，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。 5、脑脊液 （1）、采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好是在应用抗生素之前采集脑脊液。 （2）、采集方法：无菌腰穿采集脑脊液35 m1 分装到 3 个无菌小瓶中(各 12m1)。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1 m1；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于 2m1。 6、穿刺液培养标本 （1）、穿刺液培养标本包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等。 （2）、采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后 23d采集标本。 （3）、采集方法 无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本； 标本采集量应>1ml(结核分支杆菌培养时应为 l5m1)； 标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中立即送检； 可在盛器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝 5ml标本)。 7、胃液及胆汁培养标本抽取空腹胃液5 ml，置无菌管内送检；胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5 ml，置无菌管内送检；胃液和胆汁采集后必须立即送检。 8、脓汁和病灶分泌物培养标本采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。 9、眼、耳、鼻、咽拭子培养标本 （1）、采集眼分泌物：先用无菌生理盐水冲洗眼部,然后用棉拭于拭干，再用无菌棉拭于采集分泌物。 （2）、采集咽分泌物：先用清水撤口用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹数次，切勿接触口腔和舌粘膜。 （3）、采集耳、鼻或鼻咽分泌物：直接用拭子涂抹病灶部位,切勿接触周围粘膜或皮肤。标本采集过程中应注意避免粘膜上的正常菌群污染,标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。 10、泌尿生殖道培养标本 （1）、尿道分泌物：清洗尿道、采取尿道、溢出的脓性等分泌物,或用无菌拭子插入尿道 2-4cm处轻轻转动后取出,置无菌试管中送检。 （2）、阴道、宫颈分泌物、通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管 1-2cm处分泌物,置无菌试管中送检。避免阴道分泌物污染拭子。 （3）、宫腔分泌物：在必要时用外套保护膜的灭菌导管抽取。 （4）、前列腺液：清洗尿道、冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于无菌容器内送检。 （5）、精液:受检者应5天未排精,清洗尿道后手淫或体外排精法,射精于无菌容器内送检。 （6）、溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中送检。 11、烧伤感染培养标本烧伤 12h 后无菌棉拭子操做采集标本；要注意从多个创面取样,烧伤严重感染时易发生败血症,创棉取样同时应采集血样送做血培养(必须同时做需氧菌培养和厌氧菌培养) 。 12、厌氧菌感染培养标本 （1）、标本采集 标本不能被正常菌群污染,采集时尽量避免接触空气,立即送检,严格遵守无菌操作； 血液及其他体液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液等)注入厌氧血培养,立即送检； 深部脓肿,在病灶部位开放前取材,可用针管抽取,针头用无菌胶塞密封,也可用血气采集针抽取,立即送检； 抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。 （2）、标本运送 标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室； 运送方法:a注射器运送(标本抽取后尽快排除空气)或接种道专门的运送培养基中直接运送b含运送培养基的无氧小瓶运送c 厌氧罐运送(组织块);d 大量液体标本运送时要装满标本瓶兵立即驱氧,加盖运送e 一般不采用棉拭子法； （3）、建议使用微生物检验组合: 细菌学涂片:快速回报标本中可能的病原微生物； 普通细菌培养：(3天)； 厌氧培养：(7天)； 真菌培养：(5 天)； 微生物分子生物学检测：(2天) 13、真菌感染培养标本 （1）、浅部真菌感染标本采集 皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；指(趾)指甲消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片 56 片置无菌容器内送检；毛发：采集根部断折处，至少56 根送检。 （2）、深部真菌感染标本采集 血液：无菌采血810 m1，注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过 89h； 脑脊液采样量不少于35 m1,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色一管测隐球菌抗原和其他培养)； 呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。 14、皮肤（主要指伤口、创面脓液等）标本采集方法 （1）、对采集标本部位应首先清除污垢，再以碘酒或酒精消毒，防止皮肤表面污染菌混入影响检验结果，盛放标本器皿应无菌。 （2）、封闭性脓肿：病灶局部消毒后，以无菌干燥注射器穿刺抽取将采集的脓液注入灭菌试管对疑似厌氧菌的脓液，抽取脓液后立即排出注射器内的空气，同时将针头插入灭菌橡皮塞，防止空气进入。 （3）、开放性脓肿及脓性分泌物：先做局部消毒再用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部分泌物，并置无菌容器内送检。 （4）、大面积烧伤的创面分泌物因创面的部位不同，细菌种类不同，故应用无菌棉拭子多部位采集脓