岛津高效液相色谱仪使用标准操作规.doc

【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流岛津高效液相色谱仪使用标准操作规.精品文档.贵阳新天药业股份有限公司文件标题Agilent 1100岛津LC-20AD高效液相色谱仪使用标准操作规程文件编号GZ13034版本号04页数1/4制 订 人审 核 人批 准 人制订日期2012-1-21审核日期2012-2-14批准日期2012-2-20生效日期2012-2-20制订部门质检部分发部门质检部目 的：建立一个岛津LC-20ADAgilent 1100型高效液相色谱仪的使用标准操作程序。范 围：适用于岛津LC-20ADAgilent 1100型高效液相色谱仪。责任人：检验员。内 容：1.仪器组成及开机1.1.仪器组成：岛津LC-20ADAgilent 1100高效液相色谱仪系统主要由工作站、在线脱气机、四二元泵、手动自动进样器、柱温箱、检测器等部件组成。各部分的操作及数据处理均由工作站计算机控制完成。1.2.开机1.2.1.打开计算机1.2.2.打开液相色谱仪各组成系统开关（真空脱气机泵柱温箱检测器）。1.2.3.当仪器初始化完成后，用鼠标点击“instrument 1 onlineLCsolution”图标，进入“Agilent Chemstation”工作站系统。2.色谱条件的设定2.1.直接设定 在操作页面的右下部色谱工作参数中设定。将鼠标移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。2.2.调用已设置好的文件 在命令栏“fileMethod”下，选择“Load Method”，或直接单击快捷操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。如欲进行修改，则可同“2.1.”项下，在色谱工作参数中作修改；也可以在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面，在每个页面中键入设定值，单击“OK”，即完成。2.32.编辑新文件 先在命令栏 “fileMethod”下，选择“New Method”，然后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个参数设置页面下键入设定值，完成后，在命令栏“Method“file”下，选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”，即完成。3.仪器的运行 当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的“ondownload”，控制器仪器开始运行泵、检测器及柱温箱。此时，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变绿色，左上角红色的“not ready”变为显示绿色的“ready”，表明可以进行分析。（此时如果要终止仪器的运行，可单击控制器各部件或仪器面板上相应按钮流程图右下角的“off”，再单击“Yes”，并闭输液泵、柱温箱和检测器氘灯。）4.进样分析4.1. 点击“plot”待基线平稳后，在点击命令栏“RunControl“singerrun”选择“sample info”，即打开了样品信息页面，可输入 操作者（Operator Name）、样品名(Sample Name)等信息，单击“OK”，即完成。4.2.待基线平稳后，进样。4.3.进样分析4.3.1.把进样器手柄放在载样位置（LOAD）。4.3.2.用供试溶液清洗配套的注射器，再抽取适量，如用定量环（LOOP）载样，则注射器抽取量应不少于定量环容积的5倍，用微量注射器定容进样时，进样量不得多于环容积的50%。在排除气泡后方能向进样器中注入供试溶液。4.3.3.把注射器的平头针直插至进样器的底部，注入供试溶液，除另有规定外，注射器不应取下。4.3.4.把手柄转至注样位置（INJECT），定量环内供试溶液即被流动相带入流路。5.数据分析 单击“Data Analysis”菜单，进入数据分析界面。5.1.调用色谱图 在命令栏“File”下，选择“Load Signal”或单击快捷操作的“单一色谱图调用”图标，选择色谱图文件名，单击“OK”，画面中即出现所调用的色谱图。5.2.积分 先调用所要分析的色谱图，右键“Data Analysis”在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的“积分”图标，此时仪器按内置的积分参数给出积分结果。如欲对其中某些参数进行修改，可在命令栏“Integration”下，选择“Integrate Events”或单击快捷操作的“编辑/设定积分表”图标，此时，在屏幕下方左侧出现积分参数表，右侧为积分结果，在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数，如斜率、峰宽、最小峰面积、最低峰高等。在命令栏“Integration”下，选择“Integrate”或单击快捷操作的“对现有色谱图积分”图标点击确定，仪器即按照新设定的积分参数重新积分，完成后，单击“file”积分参数表中“取消积分参数表save methed as”的快捷图标，保存所作的参数修改，单击“OK”，即可退出。必要时可点击快捷操作的手动积分图标，对色谱图进行积分处理。调用其余图谱，单击“file”中“load methed”可加载该方法。5.3.校正 如果需要进行标准曲线制备，可按此项进行操作。先调用第一个色谱图，在命令栏“Calibration”下，选择“New Calibration Table”或单击快捷操作左边的“校正”（为天平画面）图标，再单击快捷操作画面右侧的“新校正表”（Calibration下第一个天平画面）图标。在此时出现的页面上，选择“Automatic Setup Level”，并设校正级数“1”，单击“OK”，在画面的下方左侧出现校正表，右侧为校正图。然后，选择快捷操作的“校正表选项”（右下角带叉的天平画面）图标，可根据实际要求设计校正表的各栏参数，单击“OK”，即完成。在画面左下侧的校正表中选择所要的色谱峰，并输入校正级数和样品浓度，如果采用内标法，需对内标峰进行标记。调用第二个色谱图，在命令“Calibration”下，选择“Add Level”，设为“2”，单击“OK”，在画面左下侧的校正表中输入校正级数和样品浓度。调用第三个色谱图，重复上述操作，逐级增加校正级数，至校正数据调用完毕。（如需对校正表中的某些数据进行重新修正，可调用新的图谱，在命令栏“Calibration”下，选择“Recalibration”，并在校正表中输入校正级数，样品浓度。）此时，校正表右侧自动绘制各组分的标准曲线，并进行线性回归。单击校正表中的“print”，可进行打印。6.分析报告的打印 在命令栏“data Report”下，选择“Specify Report”报告格式或单击最右侧工具栏快捷操作的“定义报告及打印格式”（右下角带叉的报告画面）图标，根据实际要求选择报告的格式和输出形式等，单击“OK”，即完成。然后，选择快捷操作的“报告预览”图标，可预览报告的全貌，单击“print”，即可进行报告的打印。最后，单击“close“X”退出此操作页面。7.单击“Method and RunControl”，回到主控制页面。8. 关机8.1关机前，用100%的水冲洗系统20分钟以上，然后用甲醇冲洗系统10分钟以上。8.2.在命令栏“File”下，选择“Exit”，单击“Yes”，关闭“Instrument 1 online”，再单击“Yes”，关闭输液泵、柱温箱及检测器氘灯。退出色谱工作站。8.3.按顺序关上检测器、柱温箱、泵、真空脱气机电源工作开关。8.4.关上计算机主机及各部件电源开关。8.5.关闭稳压电源。9.填写仪器使用情况记录。10.维护保养及注意事项10.1.色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满甲醇，两端封死。10.2.对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。10.3.流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。10.4.带seal-wash 的Agilent 1100，要配制90%水+10%异丙醇，以每分钟2-3滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。11.变更内容：11.1将编号GZ13034-03变更为GZ13034-04。11.2将页眉及表头进行修订。