微生物的实验室培养导学案.doc

【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流微生物的实验室培养导学案.精品文档.课题1 微生物的实验室培养【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。【学习重、难点】 无菌技术的操作【活动过程】 学习活动一 培养基常识【自主学习】阅读教材，思考填写下列内容：1概念：人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其_的营养基质。2分类：按其培养基物理形态可分为_ 培养基和_培养基(含琼脂)等； 3成分：a、基本成分：各种培养基一般都含有_ _、_ (供碳元素的物质)、_ (供氮元素的物质)和_；b、其他条件：此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 【合作探究】从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？学习活动二 了解无菌技术【自主学习】 阅读教材，思考填写下列内容： (一)获得纯净培养物的关键是_ ，具体操作如下： 1对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行_ 。 2将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行_ 。 3为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_ 附近进行。4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_ 相接触。(二)消毒和灭菌 1、比较消毒和灭菌比较项 理化因素的作用强度消灭微生物的数量能否消灭芽孢和孢子常用的方法消毒灭菌【合作探究】连线题（1）日常生活经常用到的消毒 紫外线消毒（2）对一些不耐高温的液体  酒精消毒（3）对接种室、接种箱或超净工作台 煮沸消毒法 （4）实验操作者的双手    巴氏消毒法（5）饮水水源用 灼烧灭菌（6）接种环、接种针、试管口等  氯气消毒 （7）玻璃器皿、金属用具等 高压蒸汽灭菌（高压蒸汽灭菌锅）（8）培养基、无菌水等 紫外线灭菌法（9）表面灭菌和空气灭菌等 干热灭菌（干热灭菌箱）【典型例题】1. 关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量2.细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针 C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅 学习活动三 大肠杆菌的纯化培养【自主学习】阅读教材，思考填写下列内容：第一步：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：2倒平板：待培养基冷却至 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿 ，左手 ；使锥形瓶的瓶口 ； 左手将培养皿 ，右手 ，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板 。【合作探究】1、锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？ 2、倒平板后，将平板倒过来的目的是什么？3、牛肉膏蛋白胨固体培养基配置过程中，PH该在何时控制在哪个范围内？ 4、如何确定配制好的培养基灭菌是否合格？第二步：纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。1平板划线法是 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是：将_在酒精灯火焰上灼烧，直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 _ 的目的。将冷却的接种环伸入到 _ 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖_ ，把接种环伸入平板内划_平行线，盖上皿盖不要_ 。灼烧接种环，冷却后从第一区划线_ 开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、 四、五区域内划线。注意不要将_ 相连。将平板_ 放在培养箱中 培养。2稀释涂布平板法则是将菌液进行_ ，然后将_ 分别涂布到_ 培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得_ 细菌形成的标准菌落。系列稀释操作： 盛有_ mL水的无菌试管6支_ ，编号101、102、103、104、105、106。 灼烧冷却的移液管吸取_ mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。 101倍液中吸取_ mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。 3将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37的培养箱中培养12-24h，观察并记录第三步：菌种的保藏1、临时保藏： 接种到_培养基上，待菌落长成，将试管放入_的冰箱内保藏。 保藏时间:_月 缺点：时间_，菌落易_2、长期保存： 采用_法，将装有1mL甘油的甘油瓶先灭菌，冷却后与1mL菌液充分混合均匀，放在_的冷冻箱内保存。【合作探究】1、取菌种前灼烧接种环的目的是什么？ 2、取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？ 3、最后灼烧接种环的目的是？ 【判断正误】1、牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供氮源。（ ） 2、倒平板过程中，若皿盖和皿底之间粘有培养基，用纸巾擦干净后可继续培养微生物。（ ） 3、每次划线前都要接种前灼烧接种环的目的都是消灭接种环上的微生物。（ ）4、平板划线法中灼烧接种环，从前一区划线首端开始向后一区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。（ ）【巩固训练】1下列有关培养基的叙述正确的是 A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是 A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板3有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C再放在适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落4将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是 A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放人未接种的培养基 D为了下次接种时再使用5大肠杆菌的代谢类型是A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧6下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质7平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染 C利于培养的冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基8如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 g(CH2O)30 g琼脂15 gH2O1 000 mlMgSO4·7H2O0.5 青霉素0.1万单位 物理性质，该培养基属于      培养基。依用途划分，则属于        培养基。根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是     ，培养的微生物可能是   。 该培养基中的碳源是    。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是    。 若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是       ，应加入的物质是      ，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入   ，将呈    反应。 细菌种群进化过程中，其主要作用的变异来源是 A环境条件 B基因重组 C基因突变 D染色体变异9.富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。主要是利用不同微生物生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下列问题。(1)重复培养的目的是_。(2)的菌落中大部分是降解_微生物。设置的目的是_。(3)采用单细胞挑取法，将所选菌种接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是：接种环要_灭菌，待其_后，再挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，操作完成后需将接种环在火焰上灼烧，目的是_。10下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法： 图甲是利用 法进行微生物接种，图乙是利用 法进行微生物接种。 这两种方法所用的接种工具分别是 和 ；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 和酒精消毒。 右图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是 (填图甲或图乙)。 用图甲方法接种后，在固体培养基上倒置培养细菌的目的是 。A防止杂菌污染 B防止菌落被打散 C促进细菌生长 D促进更快地形成菌落 下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是 。A利用乙接种法可以分离微生物但不能对微生物进行计数B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C以尿素为唯一氮的培养基可分离出能利用尿素的细菌D乙接种法中使用的接种工具须保存在70%的酒精中（6）接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近？