现代分子生物学习题2.doc

【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流现代分子生物学习题2三、填空题1.RNA是由核糖核苷酸通过              键连接而成的一种            。几乎所有的 RNA都是由              DNA            而来，因此，序列和其中一条链         。2.多数类型的RNA是由加工          产生的，真核生物前体tRNA的           包括         的切除和         的拼接。随着          和        端的序列切除，3端加上了序列           。在四膜虫中，前体tRNA           的切除和       的拼接是通过         机制进行的。3.RNase P是一种          ，含有          作为它的活性部位，这种酶在       序 列的            切割            。4.Cot12实验测定的是                  。5.假定摆动假说是正确的，那么最少需要     种tRNA来翻译61种氨基酸密码子。 6.写出两种合成后不被切割或拼接的RNA：            和           。7.在 DNA合成中负责复制和修复的酶是               。8.染色体中参与复制的活性区呈Y型结构，称为               。9.在 DNA复制和修复过程中修补 DNA螺旋上缺口的酶称为              。10. 在 DNA复制过程中，连续合成的子链称             ，另一条非连续合成的子链称为             。11. 如果 DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3末端，个含35活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为                 酶。12. DNA后随链合成的起始要一段短的           ，它是由               以核糖核苷酸为底物合成的              。13. 复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由           催化的，它利用来源于ATP水解产生的能量沿 DNA链单向移动。14.帮助 DNA解旋的           与单链DNA结合，使碱基仍可参与模板反应。15. DNA引发酶分子与 DNA解旋酶直接结合形成一个            单位，它可在复制叉上沿后随链下移，随着后随链的延伸合成 RNA引物。16. 如果 DNA聚合酶出现错误，会产生一对错配碱基，这种错误可以被一个通过甲基化作用来区别新链和旧链的特别  系统进行校正。17. 对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说，都可在 DNA独特序列                  处观察到复制泡的形成。18.         可被看成一种可形成暂时单链缺口(型)或暂时双链缺口(型)的可逆核酸酶。19. 在大肠杆菌中发现了             种 DNA聚合酶。 DNA修复时需要 DNA聚合酶              。20.真核生物中有5种DNA聚合酶。它们是：(l)           (2)           (3)         (4)             (5)                 。21. 在 DNA修复过程中，需要第二种酶，                ，作用是将 DNA中相邻的碱基                 起来。            DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。有两种外切核酸酶的活性，它们分别从               和             降解 DNA。DNA聚合酶              只有               外切核酸酶活性。22. 只有真核 DNA聚合酶                 和             显示           外切核酸酶活性。23.DNA大多数自发变化都会通过称之为                  的作用很快被校正。仅在极少情况下，DNA将变化的部分保留下来导致永久的序列变化，称为             。24.偶然情况下，在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中，一个等位基因经过                  过程会被另一等位基因代替。25.通过                 基因重组，游动 DNA序列和一些病毒可进入或离开一条目的染色体。26.DNA修复包括3个步骤：              酶对 DNA链上不正常碱基的识别与切除，            酶对已切除区域的重新合成，            酶对剩下切口的修补。27.一种主要的 DNA修复途径称             ，包括一系列            酶，它们都能识别并切去 DNA上不正常碱基。28.              途径可以切去任何造成 DNA双螺旋大片段改变的 DNA损伤。29. 大肠杆菌中，任何由于 DNA损伤造成的 DNA复制障碍都会诱导              的信号，即允许跨过障碍进行复制，给细胞一个生存的机会。30. 在            中，基因交换发生在同源 DNA序列间，最常见是发生在同一染色体的两个拷贝间。31. 在交换区域，一个 DNA分子的一条链与另一个 DNA分子的一条链相互配对，在两个双螺旋间形成一个               。32. 通过                    ，两个单链的互补 DNA分子一起形成一个完全双链螺旋，人们认为这个反应从一个慢的              步骤开始。33. 大肠杆菌的染色体配对需要                 ；它与单链 DNA结合并使同源双链 DNA与之配对。34. 一般性重组的主要中间体是               ，也用它的发现者名字命名为        。35. 产生单个碱基变化的突变叫           突变，如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的           ，并且不会造成什么影响，这就是           突变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是           突变。这种突变对蛋白质功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质         或         结构中的重要程度，或是与酶的                         的密切性来决定，活性变化范围可从      到接近正常。36. 一种由于蛋白质序列中丢失了            残基引起的突变将会阻止         的形成，这种蛋白质更容易                。如果在             温度是稳定的而在              温度是不稳定的，将它称为              突变，是           突变的一个例子。37. 无义突变是将一种氨基酸的             转变成             密码子，结果使蛋白质链            。一个碱基的插入或            叫           突变。由于三联             的移动，突变位置             的整个氨基酸序列都会被改变。上述两种类型的突变(插入和缺失)所产生的蛋白质同               的不同，通常是完全               。38. 下面所列的是由突变而产生的一些异常表型(A)，同时也列出了表型由突变而造成的缺陷的可能原因(B)。请尽可能地将 A项所列的异常表型同 B项所列的可能原因配对。    A  异常表型：                 B  缺陷可能出现在：    (a)细菌的营养缺陷型           (t)合成途径    (b)细菌温度敏感突变体         (u)降解途径    (c)细菌的诱导酶变成组成酶     (v)DNA的修复    (d)果蝇的红眼变成白眼         (w)转录控制    (e)果蝇形成两个胸节           (x)细胞分裂控制    (f)人的镰刀状细胞贫血症       (y)胚胎发育控制    (g)人的原卟啉症               (z)蛋白质的稳定性    (h)人着色性干皮病    (i)苯丙酮尿症    (j)人肿瘤的发生39.下面各句是对不同诱变剂作用的叙述，写出相应情况的诱变剂的名称：(1)通过同双螺旋的结合，引起变构，并激活修复性内切核酸酶的诱变剂是：                   。    (2)引起总染色体的损伤如断裂和转位的诱变剂是：            。    (3)取代正常的碱基而掺人到 DNA中，并通过互变异构引起复制错误的诱变剂是：                                。    (4)只能够除去胞嘧啶和甲基胞嘧啶的氨基基团的诱变剂是：               。    (5)主要是引起同一条链上的相邻嘧啶间的交联的诱变剂是：               。(6)主要是在 DNA双螺旋的形变和链的错排过程中引起插入或缺失的诱变剂是：                       。    (7)可以除去 DNA中任何一个带有氨基基团的碱基上氨基基团的诱变剂是：      。40. 据估计，单倍体人基因组包括50O00个基因，如果每个世代每个基因的突变率为5×105，那么，每个个体中存在                 刚产生的突变。41. DNA中两种常见的自发突变是由于腺嘌呤、鸟嘌呤与脱氧核糖间的N-糖基连接断裂而导致的              和使胞嘧啶变为尿嘧啶而导致的             。42能够诱导操纵子但不是代谢底物的化合物称为           诱导物。能够诱导乳糖操 纵子的化合物              就是其中一例。这种化合物同           蛋白质结合，并使之与             分离。乳糖操纵子的体内功能性诱导物是          。43.色氨酸是一种调节分子，被视为             。它与一种蛋白质结合形成         。  乳糖操纵子和色氨酸操纵于是两个                 控制的例子。 cAMPCAP蛋白通过              控制起作用。色氨酸操纵子受另一种系统一的调控，它涉及到第一个结构基因被转录前的转录               。44.负责把RNA转录成互补 DNA分子的            酶可以解释由            引起的永久性基因转变。45.利用自已的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一地方的遗传元件叫                ，也叫作                 。46.酵母的 Tyl元件是一种                ，它的转座需一段完整RNA转录物的合成，这个转录物又被复制成一个双螺旋 DNA，随后被整合到一个新的染色体位置。47.真核生物的mRNA加工过程中，5端加上           ，在3端加上       ，后者由         催化。如果被转录基因是不连续的，那么，          一定要被切除，并通过             过程将              连接在一起。这个过程涉及许多RNA分子，如Ul和U2等，它们被统称为           。它们分别与一组蛋白质结合形成                               ，并进一步地组成40S或60S的结构，叫                 。48.胶原蛋白通过在不同的脯氨酸残基上添加                  基团而被化学修饰。这个反应是由两种酶催化的，它们是            和             。其他的一些蛋白质被               磷酸化。蛋白质上添加寡聚糖的过程叫            ，而添加脂肪酸链则叫               。O寡聚糖是一种同              或               残基上氧连接的寡聚糖，而 N寡聚糖是通过与           上的氮原子连接而成。N寡 聚糖又是从同一种叫做              脂的前体寡聚糖衍生而来。49. 阿黑皮素原是               被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例子。如                  之类的RNA病毒也能合成类似的结构物。蛋白水解过程也涉及细胞外毒素的活性，如蜜蜂的                    和动物激素的活性，如                和                    。50.         可使每个氨基酸和它相对应的tRNA分子相偶联形成一个         分子。51.          包括两个tRNA分子的结合位点：           ，即 P位点，紧密结合与多肽链延伸尾端连接的 tRNA分子，和         ，即 A位点，结合带有一个氨基酸的tRNA分子。52                 催化肽键的形成，一般认为这个催化反应是由核糖体大亚基上    的              分子介导的。53释放因子蛋白与核糖体上 A位点的             密码结合，导致肽基转移酶水解连接新生多肽与tRNA分子的化学键。54任何mRNA序列能以三种               的形式被翻译，而且每一种都对应一种完全不同的多肽链。55蛋白质合成的起始过程很复杂，包括一系列被             催化的步骤。56在所有细胞中，都有一种特别的                 识别              密码子 AUG，它携带一种特别的氨基酸，即            ，作为蛋白质合成的起始氨基酸。57核糖体沿着 mRNA前进，它需要另一个延伸因子           ，这一步需要      的水解。当核糖体遇到终止密码(       、        、        )的时候，延长作用结束，核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为         ，并且需要套             因子。58.基因工程是           年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向                    的时代。59.随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过              、               和               三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。60. Cohen等在                 年构建了第一个有功能的重组 DNA分子。61.基因工程的两个基本特点是：(1)                   ，(2)                。62.基因克隆中三个基本要点是：              ；             和             。63.          年，美国斯坦福大学             等             上在发表了题为：  “将新的遗传信息插入SV40病毒 DNA的生物化学方法：含有噬菌体基因和E.coli半乳糖操纵子的环状 SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有                               。64.克隆基因的主要目的有四：(1)                    ；(2)                 ；   (3)                      ；(4)                      。65.严格地说限制性内切核酸酶(restriction endonuclease)是指已被证明是       的酶。基因工程中把那些具有识别                                         内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。66.        年 Luria和 Human在 T偶数噬菌体对大肠杆菌感染实验中首次发现了细    菌的              现象。67.1970年，Smith和wilcox从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶，能够特异性的切割DNA，这个酶后来被命名为                  ，这是第一个分离到的类限制性内切核酸酶。68.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的        。69.类限制性内切核酸酶分子量较小一般在2040kDa，通常由         亚基所  组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数类酶也可作用于单链 DNA，或DNARNA杂合双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，类酶既具有专一性，也具有             专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有                  ，产生末端的 DN*段或                 的 DN*段。作用时需要作辅助因子，但不需要           和            。70.完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：(1)                                                  (2)                                                                              。71.类限制性内切核酸酶一般识别              个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有                   倾向，即它们在识别序列中含量较高。72.EcoK是 类限制性内切核酸酶，分子组成是22，分子量是300kDa。在这些亚基中，亚基具有               作用；亚基具有              的活性；亚基的作用则是                   。73.个体之间 DNA限制性片段长度的差异叫                        。74.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自                    ，第二、三两个字母取自                     ，第四个字母则用                        表示。75.限制性内切核酸酶 Acy 识别的序列是5GRCGYG-3，其中R              ，                            。76.在酶切反应管加完各种反应物后，需要离心2秒钟，其目的是                和                   。77.部分酶切可采取的措施有：(1)                       (2)                    (3)                   等。78.第一个分离的限制性内切核酸酶差异是                ；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是                     。79.限制性内切核酸酶 BsuR 和ae的来源不同，但识别的序列都是          ，   它们属于                  。80.由于 DNA是由4种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是                  。81.Sal 和 Not 都是哺乳动物中识别序列稀有的酶,在哺乳动物基因组的5kb片段中，找到ot 切点的概率是                。82.部分酶切是指控制反应条件，使得酶在 DNA序列上的识别位点只有部分得到切割，它的理论依据是                 。83.类限制酶识别 DNA的位点和切割的 DNA位点是不同的，切割位点的识别结合有两种模型，一种是               ，另一种是                   。84.限制性内切核酸酶通常保存在                     浓度的甘油溶液中。85.连接酶(ligase)是一类用于核酸分子连接形成         键的核酸合成酶，有DNA连接酶和RNA连接酶之分。86.原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶： Ecoli DNA连接酶和 T4 DNA连接酶。  基因工程中使用的主要是 T4 DNA连接酶，它是从 T4噬菌体感染的Ecoli中分离的一种单链多肽酶，分子量为           kDa，由 T4噬菌体基因         编码。Ecoli DNA连接酶是由大肠杆菌基因           编码，也是一条多肽链的单体，分子量为                   kDa。这两种 DNA连接酶有两个重要的差异：第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同，T4 DNA连接酶用               ，而Ecoli DNA连接酶则用                  作为能源。第二是它们催化平末端连接的能力不同，在正常情况下只有 T4 DNA连接酶能够连接平末端，Ecoli DNA连接酶则不能。即使是调整反应条件，Ecoli  DNA连接酶催化平末端的连接效率也只有 T4  DNA连接酶的                         。87.DNA连接酶的单位通常用Weiss单位表示，一个Weiss单位是：                                           。88.DNA聚合酶是                    在1965年从大肠杆菌细胞中分离的，所以又称为                  聚合酶。该酶由大肠杆菌基因                编码，是一种单链球蛋白，分子量为109kDa，酶蛋白中含有一个 Zn原子。89.T4 DNA聚合酶与 Klenow酶一样，具有53聚合酶和35外切酶两种活性，但是它的35外切酶的活性比 Klenow酶强           倍。该酶的3 5外切活性既能作用于单链 DNA也能作用于双链 DNA，不过作用于            链的活性要强于              链。90.反向转录酶(reverse transcriptase)是由           kDa和         kDa两个亚单位组成的二聚体，作用时以RNA为模板合成 DNA。91从小牛胸腺中分离纯化的末端转移酶催化的基本反应是将                    ，同时释放出游离的无机磷。催化反应时不需                            ，但需要引物，单链 DNA是最好的引物，单链 DNA受体的长度最短需有       个  dNTP。具有3突出末端的双链 DNA也是较好的反应底物。二价离子和 DNA末端状态对催化反应影响较大，但是用             作为辅助离子，可以催化任何形式的末端(突出的、隐含的、平齐的)加接单核苷酸，但突出的3端效率较高。以 Mn2+Mg2+作为辅助因子，只能在单链 DNA或双链 DNA的3突出端加尾。92. S1核酸酶(S1 nuclease)是从米曲霉(Aspergilluc oryzae)中分离纯化的一种含                 的金属蛋白，分子量为32kDa，是一种耐热的酶(3765)。93在 S1保护实验中， S1切割的温度有两种：20和45，这是因为：在20时，                                                               在45时，                                                              。94.                      技术可以用来鉴定 DNA分子中与 DNA结合蛋白相互作用的特定序列。95.真核生物有两种 DNA连接酶，连接酶主要是参与                 ，而连接酶则是参与                        。96T4RNA连接酶是1972年发现的，并于 1977年纯化。该酶是由 T4噬菌体基因              编码，作用是不需要模板。它在体内的作用是参与 T4噬菌体      不参与 DNA合成的连接，但在                      中可能有作用。97DNA聚合酶 的Klenow大片段是用             切割 DNA聚合酶得到的分子量为76KDa的大片段，具有两种酶活性：(1)                             。   (2)                                的活性。98反向转录酶除具有以 DNA和RNA为摸板合成 DNA的53合成酶的活性外，还具有4种酶的活性：(1)                    ； (2)                      ；   (3)                            ；(4)                           。99RNA连接酶作用时除了需要 ATP和 Mg2+外，还需要                     。 100DNA聚合酶 是一种单体酶，分子量为109kDa，它含有金属离子           。101. 为了防止 DNA的自身环化，可用                                   脱去双链DNA                          。102T4单核苷酸激酶进行DN*段的5端标记时，主要是通过两种反应即        和                 。103CIP催化脱磷酸时有两种最适温度，一种是37，适用于           端脱磷酸；另一种是56，适用于              端脱磷酸。104. 外切核酸酶可从双链 DNA的5端依次切下5单核背酸，但对不同末端的底物来说，作用效率不同，                 最高，                 最低。105EGTA是                     离子螯合剂。106测序酶是修饰了的 T7 DNA聚合酶，它只有                  酶的活性，而没有               酶的活性。107切口移位(nick translation)法标记 DNA的基本原理在于利用              的     和                     的作用。108欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用                    或                 。109反转录酶除了催化 DNA的合成外，还具有                   的作用，可以将 DNA-RNA杂种双链中的              水解掉。110基因工程中有3种主要类型的载体：                 、                 、                              。111由于不同构型的 DNA插入 EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不  同， SC DNA的泳动速度             ，OC DNA泳动速度              ， LDNA居中，通过凝胶电泳和 EB染色的方法可将不同构型的 DNA分别开来。112质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点区开始的。然而，质粒的复制可以是           向的、或是           向的。在杂种质粒中，每个复制子的起点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情况下的复制起点可能被关闭。113就克隆一个基因(DN*段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部    分：                      、                     、                  。     另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。114如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于                群，    这是因为它们的                 所致。115质粒拷贝数是指细胞中                      。116. 复制子由三部分组成：(1)               (2)             (3)         。117酵母的2m质粒有             ，可以配对形成哑铃结构。118一个带有质粒的细菌在有 EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫                    。119pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于                ，它的四环素抗性基因来自于            ，它的氨苄青霉素抗性基因来自于           。120质粒的消失同染色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过     恢复该基因的性状。121Co1El质粒复制的起始需要三种酶，即                  、                    和                    。122YAC的最大容载能力是               ，BAC载体的最大容载能力是          。123pSC101是一种                  复制的质粒。124把那些没有可检测表型的质粒称为                         。125转座子主要由下列部分组成：(l)                      （2）                 (3)                      。126. pUC18质粒是目前使用较为广泛的载体。 pUC系列的载体是通过                和               两种质粒改造而来。它的复制子来自               ， Amp抗性基因则是来自                 。127.在基因型的表示中，符号表示              ；符号A表示            。128.噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是                 ；二是                          。129.第一个报道的全测序的单链 DNA噬菌体是X174，DNA长5386个碱基对，共    个    基因，为一环状 DNA分子，基因组的最大特点是                  。130.噬菌体的基因组 DNA为              kb，有          多个基因。在体内，它有两种复制方式，扩增时(早期复制)按              复制，成熟包装(晚期复制)则是按            复制。它有一个复制起点，进行            向复制。噬菌体的 DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。其原因主要是在噬菌体线性DNA分子的两端各有一个         个碱基组成的天然粘性末端。这种粘性末端可以自然成环。成环后的粘性末端部位就叫做         位点。131.根据噬菌体的包装能力，将野生型噬菌体的基因组 DNA改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为         kb，插入的外源片段最大不超过       kb。132.野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是                                                 和                    。133.粘粒(cosmid)是质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自             、cos位点序列来自             ，最大的克隆片段达到             kb。134.有两类改造型的噬菌体载体，即插入型和取代型。从酶切点看，插入型为      个，    取代型为           个。135.野生型的噬菌体 DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1)                   (2)                     (3)                  。136.M13单链噬菌体的复制分为三个阶段：(1)                （2）               (3)                   。137.噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是               ，而来自噬菌体的主要结构是               。138.M13单链噬菌体基因2和基因4之间的 IG区有三个最重要的功能，即(l)           (2)                    (3)                   。139.野生型的 M13有10个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是：                      和                   。140.以噬菌体载体和粘粒载体构建文库时，起始 DNA的长度是不同的，前者为    kb后者为             kb。141.噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源 DN*段后，总的长度应在噬菌体基因组的            的范围内。142.不同的宿主细胞其核酸酶的活性是不同的，如细菌中的 HB101菌株及 JM系列的宿主菌所含核酸酶的活性比 DHl、 LE392等菌株             。143. SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用：    (1)