痰标本涂阳培阴结果影响.docx

痰标本涂阳培阴结果影响摘要:目的探究影响痰标本涂阳培阴结果的因素。方法对1191份涂阳痰标本进行培养，从痰检阳性级别、患者就诊服药情况、标本保存时间进行统计分析。结果1191份涂阳痰标本的涂阳培阴率为2007%，镜检报告级别8条、1+、2+、3+、4+痰标本的涂阳培阴率分别为3750%、2606%、2206%、1481%、808%，镜检级别越低涂阳培阴率越高，4+痰标本涂阳培阴率与8条、1+、2+、3+相比，差异有统计学意义(P005)。痰标本保存时间3d、3d7d、7d的涂阳培阴率分别为1475%、3993%、4595%，3d与3d7d及7d的痰标本的涂阳培阴率比拟，差异有统计学意义(P005)。结论痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。关键词:结核病;痰标本;涂阳培阴;影响因素结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病，控制传染源是预防肺结核病的重要途径，传染源主要是排菌的肺结核病患者，尤其是痰涂片和培养阳性者1。结核分枝杆菌痰检查对于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义2，是施行全面监督化疗策略(DOTS)的重要要素之一，对结核病防控工作起着重要的作用。其中痰培养检测具有灵敏度高的特点3，极大地增加患者发现率，分离菌株可进行后续的药敏检测、菌种鉴定和分子流行病学分析等。讨论影响痰培养结果的因素，保证痰培养质量就显得尤为重要4。本文主要从痰标本镜检报告阳性级别、患者就诊治疗史、标本保存时间方面进行比对分析，为提高结核病实验室工作质量提供数据参考。1资料与方法11资料信息来源于结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本、结核病实验室痰检登记本、结核病实验室痰培养登记本等。标本来自全市9所耐药监测哨点及淄博市第一医院结核病实验室2014年1月12月收集的1191份涂阳痰标本，保存于4冰箱。萋尼染色试剂(批号:BA415031)、酸性改进罗氏培养基由山东省结核病防治中心统一制备。12方法121痰涂片镜检方法实验室采用萋尼染色法，镜检结果参照（中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册）进行。122痰培养方法视痰标本性状做标本前处理，加1倍2倍体积的4%NaOH消化液于痰瓶中，拧紧螺旋盖，涡旋振荡器上振荡，使痰液充分匀化，室温放置15min。用无菌吸管取去污染处理后的标本01ml，均匀接种在酸性改进罗氏培养基斜面上，每份标本接种2支酸性罗氏培养基。接种后斜面向上，于37环境中平放，24h后检查培养基有无污染，如无污染，拧紧瓶盖，直立放置，37继续培养。123结果报告方法接种后第3d、第7d各观察一次菌落生长情况。发现菌落生长者，经抗酸染色涂片镜检证明后，可报告快速生长分枝杆菌阳性。如未发现快速生长分枝杆菌菌落生长，此后每周观察一次，记录菌落生长及污染情况。阳性生长物经抗酸染色涂片镜检证明后，可报告分枝杆菌生长。培养满8周后未见菌落生长者方可报告培养阴性。观察发现非抗酸杆菌生长时报告污染。13统计学处理将数据录入MicrosoftOffice2003建立数据库，采用SPSS170软件进行统计学处理分析，组间比拟采用2检验，以P005为差异具有统计学意义。2结果21痰标本选择与涂阳培阴结果对1191份涂阳痰标本根据镜检阳性级别进行分类统计，发现8条、1+、2+、3+、4+的涂阳培阴率分别为3750%、2606%、2206%、1481%、808%，总涂阳培阴率为2007%。镜检级别越低涂阳培阴率越高(表1)。同时选择4+痰标本的涂阳培阴率作为基准，其他镜检级别痰标本的涂阳培阴率与其比对，8条、1+、2+、3+涂阳培阴率差异均有统计学意义(2值分别为28073、26027、17502、4757，P005)。22患者就诊治疗史对涂阳培阴率的影响从结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本等获取初诊患者与复治患者的信息，进行汇总分析显示，1191份标本中初诊患者与复治患者的涂阳培阴率分别为1607%和3053%，复治患者涂阳培阴率高于初诊患者涂阳培阴率，差异具有统计学意义(2=35094，P=0000)。23痰标本保存时间对涂阳培阴率的影响3d、3d7d、7d的痰标本对应的涂阳培阴率分别为1475%、3993%、4595%。3d7d、7d的痰标本的涂阳培阴率高于3d的痰标本，差异有统计意义(P005)(表3)。3讨论涂阳培阴率是考核痰标本培养质量的重要指标，影响痰标本培养结果的因素较多，通过对1191份标本进行分析发现，在选择培养对象方面，应尽量选取镜检报告级别高的痰标本作为培养对象，越是阳性级别高的痰标本讲明结核分枝杆菌检出越多，也反映了痰标本留取质量符合要求，是合格的痰标本，在培养经过中会出现较高的阳性率，充分表明了痰标本的质量对于培养具有重要影响5。在实际工作中做好正确引导患者留取肺部咳出的合格痰标本;提高实验室人员涂片与镜检能力，避免定性错误与误差出现，准确的读取镜检结果;根据3涂2培的要求，在选择痰标本进行培养时必须考虑阳性级别高的纳入培养对象，提高检出率。本研究发现复治患者标本的涂阳培阴率显著高于初治患者，具有统计学意义，可能与患者服用抗结核药物有关，复治患者经过一段时间的抗结核药物治疗后，药效发挥作用杀死体内结核杆菌，患者病情有所好转，排菌减少及菌株活力低所致，也反映出其治疗效果较好6。而初诊患者没有服用抗结核药物治疗史，活菌比例较高，因而标本的涂阳培阴率显著高于复治患者。痰标本留取后保存时间较长，使得标本中的活菌数目以及结核杆菌的活力下降，进而使痰培养的涂阳培阴率降低，该结果与Paramasivan等报道的结果类似。综合考虑痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。建议结核病实验室在开展痰培养时应注重选择合格痰标本，在留取痰标本后的3d内尽早培养，对镜检报告级别低及复治患者的痰标本需要改良培养方法，确保培养质量。参考文献1张敦熔当代结核病学M北京:人民军医出版社，2000:6997102中华人民共和国卫生部疾病预防控制局，中华人民共和国卫生部医政司，中国疾控预防控制中心中国结核病防治规划施行工作指南M北京:中国协和医科大学，2009:12133刘剑君，姜世闻，成诗明中国结核病控制现状分析及对策J中国防痨杂志，2003，25(3):1291314高风华，冯谦谨，江丽凤，等中国大陆20022010年法定传染病疫情分析J当代预防医学，2013，4(4):7567595黄石凤20072008年宜章县919例活动性肺结核病人痰检检测结果分析J中国卫生检验杂志，2009，19(12):291429156全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组/办公室2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告J中国防痨杂志，2012，34(8):485507