香蕉DNA的粗提取实验课件--高二下学期生物人教版选修1.pptx

教材来源 人民教育出版社 普通高中生物教科书 生物学选修一生物技术实践 专题五 课题一 DNA的粗提取与鉴定一、实验目的1、学习DNA的粗提取方法2、学习DNA的化学鉴定方法1.在什么浓度下DNA的溶解度最小？DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？2. 如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?二、实验原理如何破坏细胞结构使DNA释放出来？如何分离DNA和蛋白质？如何鉴定DNA？5、甲基绿为碱性染料,它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。2、清洁剂中含有的SDS（十二烷基磺酸钠)具有使蛋白质变性,与DNA分离的作用，3、DNA可以溶解在一定浓度的NaCl溶液中,4、DNA在酒精中不溶解,所以加酒精后DNA可以析出，1、研磨能够破坏细胞结构,释放其中含有的DNA。鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺孔动物的红细胞、 弥猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。教材中列举了很多种材料，请你从中选出2-3种。回答，思考为什么选用香蕉作为原材料。原则:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是，选定的材料DNA含量相对较高，成功的可能性更大。思考题：为什么不用哺乳动物的红细胞呢？教材中选择鸡血细胞液作为实验材料，为什么我们却是用的香蕉呢？二者共同优点：均为真核生物，DNA都在染色体上。DNA含量高，细胞容易被碾碎，细胞核内的DNA容易释放出来。答：哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核。三、材料器具器具：研钵、纱布、漏斗、烧杯、玻璃棒、量筒（10ml一支)、滴管、试管(20ml两支）材料:香蕉、洗洁精、95%酒精、蒸馏水、0.015mol/L的NaCl溶液、2mol/L的NaCl溶液、甲基绿试剂四、方法步骤1、制备材料切取一段2厘米长的香蕉,切碎,置于研钵内加入2毫升洗洁精,充分研磨加入10毫升2mol/L的氯化钠溶液,继续研磨2、过滤将研钵内的香蕉糊用漏斗和纱布过滤到烧杯中3.提取DNA往上述液中加入到约两倍体积的95%的酒精，轻轻摇动或用玻璃棒轻轻搅拌,很快就会看到白色纤维状粘稠物质从滤液中析出米,这就是DNA粗提取物。4、鉴定方法二：取两支试管,分编为1号、2号,各加入0.015mol/LNaC l溶液2ml,将所得的白色絮状物质取出一部分放入1号试管，搅拌使其溶解,然后向两支试管中分加入两滴甲基绿试剂,1号试管呈现绿色,则说明白色絮状物是DNA。方法一：用玻璃棒卷起白色絮状物,并在白色絮状物中直接滴加甲基绿染液,用蒸馏水洗去浮色,絮状物呈现绿色,说明该白色絮状沉淀为DNA。注意事项加人洗涤剂后，动作要轻缓，柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，断裂的DNA分子不能形成絮状沉淀。