ICSI-ET取卵日偶发ED少弱精子症患者口服西地那非对助孕结局的影响.pdf
ICSI-ET取卵日偶发ED少弱精子症患者口服西地那非对助孕结局的影响李红星1, 2，杜屾3，马晓玲1, 2，宋德潇1, 2，孙亮1, 2，刘瑞芳1, 2，薛石龙1, 2，曹頔1, 2，庞燕4收稿日期：2020-04-21基金项目：甘肃省青年科技基金资助项目（20JR10RA705） ；兰州大学第一临床医学院“卓越计划”学生科研创新培育项目（20200060044） ； 兰州大学第一医院院内基金青年基金项目（ldyyyn2018-11）作者简介：李红星，男，助理研究员，研究方向为男性不育和辅助生殖技术，e-mail: hxli_；庞燕，女，工程师，研究方向为放射性生殖医学，e-mail: ，通信联系人摘要：目的目的 探讨首次行卵质内单精子注射胚胎移植 （ICSI-ET） 取卵当天重度少弱精子症男性患者偶发勃起功能障碍（ED）造成排精困难时，一次性按需口服西地那非对患者外周精液参数和移植结局的影响。方法方法 回顾性分析2014年4月2018年11月因男性重度少弱精子症进入ICSI-ET治疗周期的282例患者，其中取卵日偶发ED一次性口服西地那非药物组72例（试验组） ，同时期未服用药物组210例（对照组） 。比较2组患者常规精液参数、临床基本指标、受精率、优质胚胎率、妊娠率和种植率等。结果结果 2组患者相比双方平均年龄、体重指数、不孕年限、男性精液浓度、液化时间、女性促排天数、促性腺激素总量、移植日内膜厚度、平均获卵数、成熟卵率、受精率、临床妊娠率、种植率和早期流产率等差异均无统计学意义。相比于对照组，试验组男性精子前向运动百分比和具有冷冻胚胎的患者比率显著增加。结论结论 ICSI-ET周期取卵日偶发ED少弱精子症男性患者口服西地拉非有助于后续取精，且西地那非增加前向运动精子总数，改善此类患者精液参数，虽不影响本周期助孕结局但可提高具有冷冻胚胎的患者比率。关键词：卵质内单精子注射胚胎移植；西地那非；少弱精子症；胚胎利用率中图分类号：R713文献标识码：Adoi：10.13885/j.issn.1000-2812.2021.02.009Effects of oral Sildenafil on assisted pregnancy outcome inpatients with sporadic ED oligoasthenospermia onICSI-ET egg retrieval dayLi Hong-xing1, 2, Du Shen3, Ma Xiao-ling1, 2, Song De-xiao1, 2, Sun Liang1, 2,Liu Rui-fang1, 2, Xue Shi-long1, 2, Cao Di1, 2, Pang Yan41 Reproductive Medical Center, The First Hospital of Lanzhou University, Lanzhou 730000, China2 Key Laboratory for Reproductive Medicine and Embryo of Gansu Province, Lanzhou 730000, China3 Floating Population Management Station of Health Bureau of Huining County, Baiyin 730700, Gansu, China4 PET-CT Center, Gansu Provincial Hospital, Lanzhou 730000, China1兰州大学第一医院 生殖医学中心，甘肃 兰州 7300002甘肃省生殖医学与胚胎重点实验室，甘肃 兰州 7300003甘肃省白银市会宁县卫生健康局 流动人口管理站，甘肃 白银 7307004甘肃省人民医院 PET-CT中心，甘肃 兰州 730000文章编号：1000-2812 (2021) 02-0049-05第47卷 第2期2021年4月兰州大学学报（医 学 版）Journal of Lanzhou University （Medical Sciences）Vol.47 No.2Apr. 2021第47卷兰州大学学报（医 学 版）重度少弱精子症是具有生育能力男性精液中的精子数目活力低于正常的一种病症。引起少弱精子症的主要原因有：精索静脉曲张、免疫因素、染色体异常、隐睾疾病、生殖道感染、内分泌疾病等。对于特发性重度少弱精子症来说，由于其发病原因不明，通常采用卵质内单精子注射胚胎移植 （intracytoplasmic sperm injection and em-bryo transfer，ICSI-ET） 技术治疗12。西地那非为白色结晶粉末，分子式为C22H30N6O4S，密度为1.39 g/cm3，是一种研发治疗心血管疾病药物时意外发明的治疗勃起功能障碍 （erectile dysfunc-tion，ED）药物。西地那非是高度选择性磷酸二酯酶5 （Phosphodiesterase 5，PDE5） 抑制剂，西地那非通过选择性抑制PDE5，增强一氧化氮环磷酸鸟苷 （ cyclic guanosine monophosphate，cGMP ）途径，升高cGMP水平而导致阴茎海绵体平滑肌松弛，使 ED 患者对性刺激产生自然的勃起反应3。本研究探讨首次治疗周期取卵日一次性口服西地那非对少弱精子症精液参数和ICSI-ET治疗结局的影响。1研究对象与方法研究对象与方法1.1 研究对象2014年4月2018年11月在兰州大学第一医院生殖医学中心因男方重度少弱精子症行 ICSI-ET的患者共计282例，其中试验组为首次治疗周期取卵日男方因心理原因偶发排精困难，采集前0.5 h口服西地那非50 mg （广州白云山医药集团白云山制药总厂，片剂，50 mg/片）后成功手淫排精，共计72例，对照组为同期正常排精的重度少弱精子患者210例。纳入标准：前向运动精子百分率10%，精子浓度 106/mL，勃起功能正常，性激素正常，且近 2 月内未服用任何药物，男女双方染色体正常，女方年龄36岁且卵巢功能正常。排除标准：偶发排精困难者口服西地那非后仍然无法手淫排精、精索静脉曲张、泌尿生殖道感染、高血压、糖尿病、既往心血管疾病、高泌乳素血症以及行胚胎植入前遗传学检测的患者。患者双方知情同意并签署知情同意书。本研究通过兰州大学第一医院伦理委员会审核（批准文号：LDYYLL2019-42） 。Abstract： Objective To investigate into the effect of Sildenafil on semen parameters and outcome of intracy-toplasmic sperm injection and embryo transfer (ICSI-ET) in male patients with severe oligozoospermia whohad difficulty in ejaculation on the day of egg retrieval. Methods A retrospective analysis was conductedof 282 patients who entered the ICSI-ET treatment cycle due to severe oligoasthenospermia from April2014 to November 2018. Seventy-two patients (the experimental group) received sildenafil once orally on theday of oocyte retrieval, and 210 patients (the control group) did not take sildenafil at the same time. Theroutine semen parameters, basic clinical indicators, fertilization rate, the ratio of good embryo, pregnancy rateand implantatim rate of each group were compared. Results There were no significant differences in maleand female average age, body mass index, infertility years, male semen concentration, liquefaction time,days of female ovulation induction, total gonadotropin, intimal thickness on transplantation day, averagenumber of eggs harvested, mature egg rate, fertilization rate, clinical pregnancy rate, implantation rate andearly abortion rate between the two groups. Compared with the control group, the percentage of malesperm with progressive motility and the percentage of patients with frozen embryos increased significant-ly in the experimental group. Conclusion Oral administration of Sildenafil in ICSI-ET male patients withsporadic ED oligoasthenospermia on the day of egg retrieval is helpful for subsequent sperm extraction, andsildenafil increases the total number of progressive moving sperm in such patients, which does not affect thepregnancy outcome of this cycle but can improve the rate of patients with frozen embryos.Keywords: intracytoplasmic sperm injection and embryo transfer; Sildenafil; oligoasthenospermia; embryoutilization rate50第2期李红星， 等： ICSI-ET取卵日偶发ED少弱精子症患者口服西地那非对助孕结局的影响1.2 控制性超排卵所有患者均采用促性腺激素释放激素激动 剂（gonadotropin-releasing hormone-antagonist，GnRH-a） 方案控制性超促排卵45。降调节达标后注射促性腺激素 （gonadotropins，Gn） ，监测激素水平高低和卵泡大小，当有3个主导卵泡直径 18 mm 时注射人绒毛膜促性腺激素 （humanchorionic gonadotropin，HCG） （瑞士默克雪兰诺有限公司，针剂，250 m/支）6 00010 000 IU，36 h后在超声引导下经阴道穿刺取卵。垂体降调节药物为达必佳（德国辉凌制药有限公司，针剂，0.1 mg/支）或达菲林（益普生法国生物技术公司，针剂，3.75 mg/支） ，Gn包括果纳芬（瑞士默克雪兰诺有限公司，针剂，75 IU/支） 、普丽康（荷兰欧加农制药有限公司，针剂，300 IU/支） 以及尿促卵泡素 （human menopausal gonadotropin，hMG）（珠海丽珠医药有限公司，针剂，75 IU/支）45。1.3 体外ICSI受精和胚胎移植男方取精前禁欲25 d，单层密度梯度法优选精液。卵子取出后培养46 h进行ICSI授精1，第2天早晨镜下观察受精情况，挑选双原核受精卵将其分别移入预平衡好的G-l plus（瑞典瑞利芙公司） 培养液微滴中。培养48 h后，根据常规胚胎形态学参数进行胚胎分级4。其中、级胚胎为优质胚胎，优先选择优质胚胎进行双胚胎移植，剩余、级胚胎冷冻。移植后 1416 d检测血-HCG。移植后30、60 d常规超声监测妊娠情况，患者宫内有明确孕囊且可见原始心管搏动者为临床妊娠。1.4 统计学分析所有统计结果以平均数标准差（x s）或比率表示，采用SPSS 18.0 软件包进行统计学分析。其中样本均数采用单因素方差分析，计数资料采用2检验，以P0.05表示差异有统计学意义。2结果结果2.1 一次性口服西地那非对少弱精子症患者外周精液参数影响210例重度少弱精患者 （对照组） 精液采集前不进行任何处理，同期 72 例男性患者 （试验组） 因取精日当天排精困难，予以单次口服西地那非50 mg后可正常排精，所有患者口服该药物未出现明显不良反应，其中3例患者自述出现轻度鼻塞和面部潮红现象。相比于对照组，试验组精液总体积、液化时间和精子浓度差异无统计学意义，前向运动精子百分比差异有统计学意义，（P0.01，表1） 。表1口服西地那非对少弱精子症患者精液参数影响组别对照组试验组精液量/mL2.682.263.101.95液化时间/h0.350.150.330.18精子浓度/（106/mL）4.102.224.551.95前向运动精子百分比/%7.511.5215.342.33a与对照组比较，aP0.05。2.2 2组患者基本资料对比试验组和对照组均行ICSI-ET，统计2组患者的基本临床资料，包括平均年龄、不孕年限、体重指数 （body mass index，BMI） 、促排卵药物剂量、HCG日雌二醇/孕酮、移植日内膜厚度和男方吸烟比率等项目，具体数据见表2。其中试验组的男方吸烟比率高于对照组，差异有统计学意义（P0.05） 。2.3 2组患者助孕结局胚胎发育第3天行胚胎移植术，所有患者均移植2枚最优胚胎。统计2组患者的临床结局（表3） ，组别试验组对照组组别试验组对照组女方平均年龄/岁31.483.7431.163.79女方BMI/ （kg/m2）21.623.0221.543.28男方平均年龄/岁32.224.5631.025.16男方BMI/ （kg/m2）23.082.9622.582.26不孕年限/a4.543.475.003.77男方吸烟比率0.51 （37/72）a0.40 （85/210）Gn总量/IU2 270.29694.422 177.80730.78HCG日雌二醇/孕酮3.311.333.511.52促排天数/d13.131.6413.001.74移植日内膜厚度/mm1.130.171.120.16促排起始剂量/IU165.2039.16154.8043.72与对照组比较，a P0.05。表22组患者基本临床指标51第47卷兰州大学学报（医 学 版）临床妊娠率、种植率和早期流产率不存在明显差异，但试验组具有冷冻胚胎的患者比率高于同期对照组（P0.05） 。3讨论讨论PDE5是磷酸二酯酶家族的重要成员之一。它除了在阴茎海绵体和血管平滑肌细胞中存在特异性高表达之外，在男性的精子中也有微弱表达6。西地那非是较早应用于临床的PDE5抑制剂之一，研究78发现，PDE5抑制剂不影响正常男性的精子活力和形态，但可以一定程度上改善少弱精子症患者的前向精子总数、精子活力和前列腺分泌功能。少弱精子症患者口服西地那非可明显提高精子总数、精子活率和精浆柠檬酸盐，进而提高快速前向运动精子百分率及精卵结合率911，但不影响果糖水平，提示可能由于西地那非提高了前列腺的分泌功能和输精管的负载能力，从而提高了精子活力。数种 PDE5抑制剂可直接作用于精子的线粒体cGMP和钙通道途径进而提高精子的前向运动活力1112，PDE5主要分布于精子鞭毛部位，可水解cGMP11，PDE5i主要结构与cGMP相似，竞争性抑制 cGMP 与 PDE5 相互结合，减少 cGMP 水解，导致 cGMP局部浓度增高，cGMP进一步提高精子快速运动能力，并可促进精子代谢，提高受精能力13。cGMP激活环核苷酸门控通道增加钙离子内流14。所以PDE5i可能通过调节精子鞭毛摆动而影响精子活力。ICSI-ET 取卵日部分少弱精子症患者因为紧张、焦虑、担忧等心理原因，无法正常勃起和射精。本研究发现大部分此类患者给予西地那非50 mg口服后可以正常排精收集外周精液，数据显示，单次口服西地那非不影响少弱精子症患者精液总体积、液化时间和精子浓度，但可以显著提高前向运动精子百分率和前向运动精子总数。本研究回顾性比较2组患者之间临床结局，其妊娠率、种植率和早期流产率差异均无统计学意义，与文献15基本一致，但试验组具有冷冻胚胎的患者比率显著高于对照组，可能因为口服西地那非增加少弱精子症患者的前向运动精子百分率，后续行ICSI时可选择更好的精子授精所致。ICSI-ET中取卵当天因心理原因偶发ED的少弱精子症患者可以单次口服西地那非有助于后续成功收集外周精液，在不影响新鲜周期成功率的基础上，可以增加胚胎利用率。参 考 文 献1 孙宝刚, 管福来, 曹井贺, 等. 特发性少、弱精子症患者精液质量指标及辅助生殖妊娠结局相关性研究J. 中国男科学杂志, 2018, 32(2): 37412 刘项, 张杜平, 张洲, 等. 中重度少弱精子症患者冻融精子与新鲜射出精子的ICSI临床结局比较J. 生殖医学杂志, 2018, 27(1): 37413 Scherzer ND, Le TV, Hellstrom WJ. 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