21微生物的实验室培养课件（人教版选修1）.ppt

细菌：细菌：单细胞不分枝的原核微生物单细胞不分枝的原核微生物。细菌：细菌：，常用染料，常用染料后显微镜观察后显微镜观察细胞壁：成分肽聚糖细胞壁：成分肽聚糖；细胞膜；细胞膜；拟核：无染色体、无拟核：无染色体、无核膜、无核仁核膜、无核仁 质粒：小型环状质粒：小型环状DNADNA细胞器：只有核糖体细胞器：只有核糖体但进行有氧呼吸但进行有氧呼吸细菌的构造细菌的构造SARS病毒、病毒、 禽流感病毒禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）朊病毒（蛋白质病毒）真菌真菌如图是酵母菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构青霉菌青霉菌青霉素青霉素链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素等链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素等微生物中发现几千种抗生素，微生物中发现几千种抗生素，2/32/3是由放线菌产生的是由放线菌产生的 细菌的营养类型细菌的营养类型 n根据细菌所利用的能源和碳源的不同根据细菌所利用的能源和碳源的不同将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。n自养菌（含光合色素、利用无机物）自养菌（含光合色素、利用无机物）n异养菌（利用有机物异养菌（利用有机物）n腐生菌腐生菌n寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌 了解有关培养基的基础知识，进行无了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标：一、课题目标： 掌握掌握培养基的制备培养基的制备、高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌和和平板划线法平板划线法等基本操作技术，熟练、规范等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：二、课题重点和难点：三、技能目标：三、技能目标：知识点一微生物的培养知识点一微生物的培养n答案：营养物质生长繁殖水碳源氮源无机盐特殊营养物质氧气一、基础知识：一、基础知识：（一）培养基（一）培养基 （1 1）按物理状态来分：培养基可分为）按物理状态来分：培养基可分为固体培固体培养基养基、液体培养基液体培养基和和半固体培养基半固体培养基。其中固。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定等。体培养基用于菌种分离、鉴定等。（2 2）按功能来分，可分为）按功能来分，可分为选择培养基选择培养基和和鉴别鉴别培养基培养基。（3 3）按成分来分，可分为）按成分来分，可分为天然培养基天然培养基和和合成合成培养基培养基。1.1.培养基的类型和用途培养基的类型和用途双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训分类和应用分类和应用划分划分标准标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理物理性质性质液体培养基液体培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体培养半固体培养基基加凝固剂，如琼脂加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分观察微生物的运动、分类、鉴定类、鉴定固体培养基固体培养基微生物分离、鉴定、活微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种菌计数、保藏菌种化学化学成分成分天然培养基天然培养基含化学成分不明确含化学成分不明确的天然物质的天然物质工业生产工业生产合成培养基合成培养基培养基成分明确培养基成分明确(用化学成分已知的用化学成分已知的化学物质配成化学物质配成)分类、鉴定分类、鉴定双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训用途用途选择选择培养培养基基培养基中加入某种培养基中加入某种化学物质，以抑制化学物质，以抑制不需要的微生物的不需要的微生物的生长，促进所需要生长，促进所需要的微生物的生长的微生物的生长培养、分离出特定微生物培养、分离出特定微生物(如如培养酵母菌和霉菌，可在培培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐中加入高浓度食盐)鉴别鉴别培养培养基基根据微生物的代谢根据微生物的代谢特点，在培养基中特点，在培养基中加入某种指示剂或加入某种指示剂或化学药品化学药品鉴别不同种类的微生物，如鉴别不同种类的微生物，如可用伊红可用伊红美蓝培养基鉴别饮美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠用水或乳制品中是否有大肠杆菌杆菌(若有，菌落呈深紫色，若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽并带有金属光泽)2、培养基配制原则： （1）目的要明确目的要明确：根据微生物的种类、培养：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。生物对培养物质的需求不同。 （2）营养要协调营养要协调：注意各种营养物质的浓度：注意各种营养物质的浓度和比例。和比例。 （3）pH要适宜要适宜：各种微生物适宜生长的：各种微生物适宜生长的pH范范围不同。围不同。 细菌细菌pH为：为：6.5-7.5； 放线菌放线菌pH为：为：7.5-8.5； 真菌真菌pH为：为：5.0-6.0。3、培养基的营养构成、培养基的营养构成 不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养基，一般都含有水水、碳碳源源、和、和氮源氮源、无机盐无机盐等营养物质，另外等营养物质，另外还需要满足微生物生长对还需要满足微生物生长对pH、特殊营养特殊营养物质物质,例如例如:生长因子生长因子(即细菌生长必需，即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物而自身不能合成的化合物,如维生素、某如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。化碳、渗透压等的要求。 4、微生物的五种营养要素、微生物的五种营养要素碳源 （carbon source） 氮源（nitrogen source） 生长因子（growth factor） 无机盐（mineral salts） 水（） Cncnc-micro双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训营养要素营养要素来源来源功能功能碳碳源源无机无机碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等等含碳无机物含碳无机物构成细胞中的物质构成细胞中的物质和一些代谢产物；和一些代谢产物；既是碳源又是能源既是碳源又是能源有机有机碳源碳源糖类、脂质、蛋白质、有机糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等酸、石油、花生粉饼等氮氮源源无机无机氮源氮源无机氮：无机氮：NH3、铵盐、硝酸、铵盐、硝酸盐、盐、N2等等将无机氮合成含氮的将无机氮合成含氮的代谢产物代谢产物有机有机氮源氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸素、氨基酸合成蛋白质、核酸及合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物含氮的代谢产物生长因子生长因子维生素、氨基酸、碱基维生素、氨基酸、碱基酶和核酸的组成成酶和核酸的组成成分；分；参与代谢过程参与代谢过程中的酶促反应中的酶促反应双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训提醒提醒微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。的氮源是铵盐、硝酸盐。对异养微生物来说，含对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。又是氮源、能源。有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训课堂练习课堂练习1.要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）A.固体培养基固体培养基B.液体培养基液体培养基C.加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训2.关于配制培养基的叙述，正确的是（关于配制培养基的叙述，正确的是（ ）A.制作固体培养基必须加入琼脂制作固体培养基必须加入琼脂B.加入青霉素可得到放线菌加入青霉素可得到放线菌C.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量D.发酵工程一般用半固体培养基发酵工程一般用半固体培养基双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训3.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的描述中，不正确的 是（是（ ）A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一水是该微生物的营养要素之一双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训4.含含CHON的某种大分子化合物可以作为（的某种大分子化合物可以作为（ ）A.异养微生物的氮源异养微生物的氮源能源能源B.异养微生物的碳源异养微生物的碳源能源能源C.自养微生物的碳源自养微生物的碳源氮源氮源能源能源D.异养微生物的碳源异养微生物的碳源氮源氮源能源能源双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训5.自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而异自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而异养微生物所需的碳源和能源是（养微生物所需的碳源和能源是（ ）A.CO2 B.NaHCO3C.碳酸盐碳酸盐 D.含碳有机物含碳有机物 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休休眠体眠体，叫做，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3 3小时以小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. .双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训使用方法使用方法结结 果果常用的方法常用的方法消毒消毒较为温和的较为温和的物理或化学物理或化学方法方法仅杀死物体表面或内部仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微一部分对人体有害的微生物生物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等法、紫外线消毒法等灭菌灭菌强烈的理化强烈的理化因素因素杀死物体内外所有的微杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌2.2.消毒与灭菌两者的区别消毒与灭菌两者的区别 双基自主落实双基自主落实核心互动突破核心互动突破活页限时训练活页限时训练高考真题集训高考真题集训三种常用灭菌方法的比较三种常用灭菌方法的比较 灭菌方法灭菌方法 适用材料或用具适用材料或用具灭菌条件灭菌条件灭菌时间灭菌时间灼烧灭菌灼烧灭菌接种环、接种针接种环、接种针或其他金属工具或其他金属工具酒精灯火焰的酒精灯火焰的充分燃烧层充分燃烧层直至烧红直至烧红干热灭菌干热灭菌玻璃器皿玻璃器皿(吸吸管、培养皿管、培养皿)和和金属用具等金属用具等干热灭菌箱干热灭菌箱内，内，160 170 1 h2 h高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌培养基等培养基等高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌锅内锅内100 kPa,121 15 min30 min练习2:1.获得纯净培养物的关键是获得纯净培养物的关键是 A 、将用于微生物培养的器皿、将用于微生物培养的器皿.接种用具和培养基等接种用具和培养基等器具进行灭菌器具进行灭菌 B 、接种纯种细菌、接种纯种细菌 C 、适宜环境条件下培养、适宜环境条件下培养 D 、防止外来杂菌的入侵、防止外来杂菌的入侵2.下列操作与无菌技术无关的是下列操作与无菌技术无关的是 A 、接种前用肥皂洗双手、接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手再用酒精擦拭双手 B 、接种前用火焰烧灼接种针、接种前用火焰烧灼接种针 C 、培养在、培养在50左右时搁置斜面左右时搁置斜面 D 、在酒精灯的火焰旁完成、在酒精灯的火焰旁完成3.外科手术器械和罐头食品的处理外科手术器械和罐头食品的处理,要以能够杀死什要以能够杀死什么为标准么为标准 A、 球菌球菌 B 、杆菌、杆菌 C、 螺旋菌螺旋菌 D 、芽孢、芽孢DCD课堂练习课堂练习1.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌，酒精，火焰灼烧等几种不同的处理方法，酒精，火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法可分别用于杀死那些部位的杂，这些方法可分别用于杀死那些部位的杂菌（菌（ ）A.接种针，手，培养基接种针，手，培养基 B.高压锅，手，接种针高压锅，手，接种针C.培养基，手，接种针培养基，手，接种针 D.接种针，培养基，手接种针，培养基，手2.无菌技术包括以下几个方面的叙述，期中无菌技术包括以下几个方面的叙述，期中错误的是（错误的是（ ）A.对实验室操作的空间，操作者的衣着和手对实验室操作的空间，操作者的衣着和手进行灭菌进行灭菌B.将用于微生物的培养皿，接种用具和培养将用于微生物的培养皿，接种用具和培养基等进行灭菌。基等进行灭菌。C.为避免周围环境中微生物的污染，实验操为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行作应在酒精灯火焰附近进行D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触具与周围的物品相接触3.培养基，培养皿，接种环，实验操作者的培养基，培养皿，接种环，实验操作者的双手，空气，牛奶所采用的灭菌，消毒方双手，空气，牛奶所采用的灭菌，消毒方法依次是（法依次是（ ）化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法A. B. C. D. 4.高温灭菌的原理是（高温灭菌的原理是（ ）A.每种微生物的最适温度都是一定的每种微生物的最适温度都是一定的B.微生物对于高温环境不适应微生物对于高温环境不适应C.高温破坏了细胞内的蛋白质，核酸，影响高温破坏了细胞内的蛋白质，核酸，影响其生命活动其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度高温降低了环境中氧的浓度三、实验操作三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）将将50ml培养基培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为压力为100kPa、温度为、温度为121，灭菌，灭菌1530min。将。将培培养皿养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160170 下灭菌下灭菌2h。待培养基冷却到待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）附近倒平板。（倒平板操作见课本） 平板划线法平板划线法: : 通过接种环在琼脂固体培养基表面通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作连续画线的操作, ,将聚集的将聚集的菌种逐步稀菌种逐步稀释分散到培养基的表面释分散到培养基的表面. . 在数次画线后在数次画线后, ,可以分离到由可以分离到由一个细一个细胞胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体, ,这就是这就是菌落菌落. .