选修一-第34讲[精选].doc

第34讲微生物技巧 最新考纲天下 卷考情1.微生物的不离跟 培养 2.培养 基对微生物的抉择 感化 3.某种微生物数量 的测定4.微生物在其余 方面的应用 2018·天下 卷(37)、2018·天下 卷(37)、2018·天下 卷(37)、2017·天下 卷(37)、2016·天下 卷(39)、2016·天下 卷(39)考点一微生物的试验 室培养 1.培养 基(1)不雅 点 ：人们按照微生物对营养物资 的差别 需要 ，配制出供其成长 繁殖 的营养基质。(2)营养构成 ：一般都含有水、碳源、氮源跟 无机盐。别的 ，还需要 满意 微生物成长 对pH、氧气以及特不营养物资 的请求 。(3)种类按照物理性子 可分为液体培养 基、固体培养 基、半固体培养 基。按照身分 的起源 可分为天然 培养 基跟 剖析 培养 基。按照功能 用途可分为抉择 培养 基、鉴不培养 基等。2.无菌技巧 (1)含意 ：在培养 微生物的操纵 中，所有 防止杂菌污染的方法。(2)常用方法3.年夜 肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏卵白 胨固体培养 基(2)纯化年夜 肠杆菌的方法纯化培养 道理 ：想方想法 在培养 基上掉 掉 落 由一个细胞繁殖 而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。纯化年夜 肠杆菌的要害 步调 ：接种。常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养 基外表连续 划线的操纵 ，将聚拢 的菌种逐步稀释疏散 到培养 基的外表。如以下列图：b.稀释涂布平板法：是将菌液进展一系列的梯度稀释，而后 将差别 稀释度的菌液分不涂布到琼脂固体培养 基的外表，进展培养 。(3)菌种的保存 方法对于 频仍 应用 的菌种，可以 采纳暂时 收藏 的方法。对于 需要 暂时保存 的菌种，可以 采纳甘油管藏的方法。点悟(1)用稀释涂布平板法统计样品中菌落的数量 每每 比理论数量 “低。这是因为 当两个或多个细胞连在一起 时，平板上不雅 看 到的只是一个菌落。而显微计数法因为 不克不及 辨别 逝世 菌与活菌，故所得数值可以比理论值“偏高。(2)平板划线法只实用 于微生物的提纯，不实用 于微生物的计数，同时在最后一次划线的末了 处的菌种最纯。以以下列图中图1为“倒平板相干 操纵 ，图2为微生物接种方法。请考虑 ：(1)请用笔墨 跟 箭头写出图1中准确 的倒平板操纵 流程。提醒 CBAD(2)图示B为何需要 使锥形瓶的瓶口通过分 焰？为何需进展D操纵 ？提醒 B操纵 是通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养 基。D操纵 是平板冷凝后，皿盖上会凝集 水珠，凝集 后的培养 基外表的湿度也比较高，将平板颠倒 ，既可以 使培养 基外表的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养 基，形成 污染。(3)图2中E、F依次使用何种方法进展接种？其接种东西 依次是什么？其接种后后果 图解应如以以下列图中a仍然 b？提醒 平板划线法稀释涂布平板法接种环涂布器Ea、Fb微生物试验 室培养 及无菌操纵 技巧 (2018·天下 卷，37)生物选修1：生物技巧 实践在花费 、生涯 跟 科研实践中，经常通过消毒跟 灭菌来防止杂菌的污染。答复以下咨询 题：(1)在试验 室中，玻璃跟 金属材质的试验 器具(填“可以 或“不可以 )放入干热灭菌箱中进展干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采纳巴氏消毒法或高温刹时 消毒法，与煮沸消毒法比拟 ，这两种方法的长处 是_。(3)密闭空间内的氛围 可采纳紫外线照耀 消毒，其缘故是紫外线能。在照耀 前，适量 喷洒，可强化消毒后果 。(4)水厂供应的自来水平日 是通过(填“氯气“乙醇或“高锰酸钾)消毒的。(5)某同学 在应用 高压蒸汽灭菌锅时，假设 压力到达 设定请求 ，而锅内并不 到达 响应 温度，最可以的缘故是。剖析 (1)在试验 室中，能耐高温的、需要 保持 枯燥 的物品，如玻璃器皿跟 金属材质的试验 器具等可以 放入干热灭菌箱中进展干热灭菌。(2)巴氏消毒法或高温刹时 消毒法与煮沸消毒法比拟 ，其长处 表示 为在到达 消毒目标 的同时，营养物资 丧掉 较少。(3)紫外线照耀 能消毒的缘故是其可以 破坏微生物细胞中的DNA分子。在使用紫外线照耀 前，适量 喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒后果 。(4)自来水平日 采纳氯气消毒。(5)采纳高压蒸汽灭菌时，假设 压力到达 设定请求 ，而温度未到达 响应 请求 ，最可以的缘故是不 排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷氛围 。谜底 (1)可以 (2)在到达 消毒目标 的同时，营养物资 丧掉 较少(3)破坏DNA构造消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷氛围 排尽1.无菌技巧 前提 结果常用方法应用 范畴 消毒较为平跟 的物理或化学方法仅杀逝世 物体外表或内部的部分微生物煮沸消毒法一样平常 用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌剧烈理化因素 杀逝世 物体表里 所有 的微生物，包含 芽孢跟 孢子灼烧灭菌法接种东西 干热灭菌法玻璃器皿、金属器具高压蒸汽灭菌法培养 基及容器2.两种纯化细菌的方法的比较比较工程平板划线法稀释涂布平板法要害 操纵 接种环在固体平板培养 基外表连续 划线一系列的梯度稀释涂布平板法操纵 本卷须知每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要充足 高，为确保试验 胜利 用够 增加 稀释度的范畴 菌体猎取 在存在 清楚菌落特点 的地区 的菌落中挑取菌体从合适稀释度的平板上的菌落中挑取菌体长处 可以 按照菌落的特色 获得某种微生物的单细胞菌落既可以 获得单细胞菌落，又能对微生物进展计数缺点 不克不及 对微生物计数操纵 庞杂 ，需要 涂布多个平板 考点二微生物的抉择 跟 计数1.泥土 中剖析 尿素的细菌的不离与计数(1)道理 与流程(2)统计菌落数量 时，培养 基外表成长 的1个菌落，起源 于样品稀释液中1个活菌。为了保障 结果准确，一般抉择 菌落数在30300的平板进展计数。(3)从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的盘算 方法是(均匀菌落数C÷涂布的稀释液体积V)×稀释倍数M点悟使用稀释涂布平板法胜利 统计菌落数量 标 要害 是恰当 的稀释度(4)试验 结果分析与评估 2.剖析 纤维素的微生物的不离(1)纤维素酶及纤维素剖析 菌抉择 道理 、方法(2)试验 流程(3)不离纤维素剖析 菌所用的两种培养 基比较不离纤维素剖析 菌的试验 中先用抉择 培养 基，再用鉴不培养 基。抉择 培养 基为液体培养 基，以纤维素作为碳源跟 能源 的微生物可以 畸形 成长 ，而其余 绝年夜 多数微生物不克不及 畸形 成长 。鉴不培养 基含琼脂，为固体培养 基，细菌可在培养 基上形成 肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用 于鉴不(抉择 、鉴不)培养 基。3.菌株抉择 道理 的比较泥土 中剖析 尿素的细菌剖析 纤维素的微生物抉择 培养 基的身分 ：尿素作为唯一 的氮源判定 方法：在培养 基中参加 酚红唆使 剂，假设 pH落低，唆使 剂变红，说明细菌能剖析 尿素抉择 培养 基的身分 ：纤维素作为唯一 的碳源判定 方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成 白色复合物，当纤维素被剖析 后，培养 基出现以纤维素剖析 菌为核心 的透明圈1.(2018·天下 卷，37)生物选修1：生物技巧 实践将马铃薯去皮切块，加水煮沸必定 时刻 ，过滤掉 掉 落 马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中参加 必定 量蔗糖跟 琼脂，用水定容后灭菌，掉 掉 落 M培养 基。答复以下咨询 题：(1)M培养 基假设 用于真菌的抉择 ，那么培养 基中应参加 链霉素以克制 的成长 ，参加 了链霉素的培养 基属于培养 基。(2)M培养 基中的马铃薯浸出液为微生物成长 供给 了多种营养物资 ，营养物资 范例 除氮源外另有 (答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参加 剖析 的生物年夜 分子有(答出两点即可)。(3)假设 在M培养 基顶用 淀粉代替 蔗糖，接种泥土 滤液并培养 ，平板上长出菌落伍 可通过参加 显色剂抉择 出能产淀粉酶的微生物。参加 的显色剂是，该方法能抉择 动身 生淀粉酶微生物的道理 是_。(4)甲、乙两位同学 用稀释涂布平板法测定某一泥土 样品中微生物的数量 ，在统一 稀释倍数下掉 掉 落 以下结果：甲同学 涂布了3个平板，统计的菌落数分不是110、140跟 149，取均匀值133；乙同学 涂布了3个平板，统计的菌落数分不是27、169跟 176，取均匀值124。有人认为 这两位同学 的结果中，乙同学 的结果可托 度低，其缘故是_。剖析 (1)在微生物学中，将赞成 特定种类的微生物成长 ，同时克制 或禁止 其余 种类微生物成长 的培养 基，称做抉择 培养 基。假设 M培养 基是用于真菌的抉择 ，那么应参加 链霉素以克制 细菌的成长 ，其属于抉择 培养 基。(2)马铃薯浸出液中含有淀粉、卵白 质、脂质、无机盐、水等多种物资 ，因此，除氮源外此中 另有 微生物成长 所需要 的碳源、无机盐等营养因素 。进入细胞的氮源可参加 剖析 卵白 质、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物年夜 分子。(3)参加 显色剂碘液后，淀粉遇碘变蓝，而淀粉的水解产品 那么不发生 这种反应 。假设 在M培养 基顶用 淀粉代替 蔗糖，接种泥土 滤液并培养 ，泥土 中能发生 淀粉酶的微生物可将淀粉剖析 ，菌落周围就会出现透明圈，如斯 ，咱们 就可以 通过是否 发生 透明圈来抉择 能发生 淀粉酶的微生物了。(4)乙同学 的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操纵 过程 中可以出现了过错 ，结果的重复性太差，不克不及 庞杂 地将3个平板的计数值用来求均匀值。谜底 (1)细菌抉择 (2)碳源、无机盐卵白 质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，发生 淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成 透明圈(4)乙同学 的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差迥异 ，结果的重复性差2.(2019·山东湖北部分重点中学联考)从泥土 中不离尿素剖析 菌跟 纤维素剖析 菌，存在 以下类似的操纵 过程 ：(1)在过程 的抉择 培养 基是培养 基，过程 的抉择 培养 基是培养 基。(填“固体或“液体)。的具体 办法 是_；的抉择 办法 是_。(2)在过程 样品梯度稀释后，一般只将稀释度为104106分不接种到3个平板培养 基上。接种的常用方法为，(3)过程 采纳的鉴不方法较庞杂 。周围出现透明圈但不克不及 100%断定 为纤维素剖析 菌的菌落，缘故是： _。剖析 (1)将微生物接种在固体培养 基上培养 ，才能形成 菌落，可见，过程 的抉择 培养 基是固体培养 基。进展梯度稀释并接种前要进展过程 所示的抉择 培养 ，因此过程 的抉择 培养 基是液体培养 基。抉择 培养 的目标 是抉择 尿素剖析 菌，因此 具体 的办法 是应以尿素为唯一 氮源；抉择 培养 的目标 是抉择 纤维素剖析 菌，因此 的抉择 办法 是以纤维素为唯一 碳源。(2)常采纳稀释涂布平板(或平板划线)法，将稀释度为104106倍的菌液分不接种到3个平板培养 基上。(3)刚果红可与纤维素形成 白色复合物，但并不跟 纤维素水解后的纤维二糖跟 葡萄糖发生 色彩 反应 。当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红纤维素复合物就无奈 形成 ，培养 基中会出现以纤维素剖析 菌为核心 的透明圈。可见，过程 采纳倒平板时参加 刚果红染液的鉴不方法较庞杂 。因为 不剖析 纤维素(或剖析 刚果红或淀粉)的微生物菌落也可以出现透明圈，因此 周围出现透明圈的菌落，不克不及 100%断定 为纤维素剖析 菌。谜底 (1)固体液体以尿素为唯一 氮源以纤维素为要紧碳源(2)稀释涂布平板法(或平板划线法) (3)倒平板时参加 刚果红染液不剖析 纤维素(或剖析 刚果红或淀粉)的微生物菌落也可以出现透明圈抉择 培养 基与鉴不培养 基的比较种类制备方法道理 用途举例抉择 培养 基培养 基中参加 某些化学物资 按照某些微生物对某些物资 或情况 前提 的嗜好、抗性而计划 从浩繁 微生物中“不离所需的微生物，镌汰 不需要 的微生物参加 青霉素不离掉 掉 落 酵母菌跟 霉菌鉴不培养 基培养 基中参加 某种唆使 剂或化学药品按照微生物发生 的某种代谢产品 与培养 基中的特定试剂或化学药品反应 ，发生 清楚的特点 变更 而计划 “鉴不差别 种类的微生物(注：未镌汰 其余 微生物)伊红美蓝培养 基可以 鉴不年夜 肠杆菌澄清易错易混·强化科学思维 易错易混易错点1“成长 因子是否 为所有 微生物所必须 ？其是否 在所有 培养 基中均需参加 ？点拨碳源、氮源、水分、无机盐、成长 因子是微生物成长 必须 的五年夜 营养身分 ，但年夜 多数培养 基中都含碳源、氮源、水分、无机盐四类物资 ，可以不需额外增加 “成长 因子(如维生素)，这是因为 很多 微生物可自行剖析 这些成长 因子，而对那些剖析 才能有限或不克不及 剖析 成长 因子的微生物(如乳酸菌)，那么需在培养 基中增加 诸如维生素等成长 因子。易错点2进展微生物不离或计数时怎样 计划 “三组(两种对比 组与重复组)？其感化 是什么？点拨(1)两种对比 组感化 比较揣摸 培养 基的制备是否 及格 即“是否 有杂菌污染，需将“未接种的培养 基同时进展培养 。(此培养 基假设 无菌落成长 那么及格 )揣摸 抉择 培养 基“是否 存在 抉择 感化 ，需设破 牛肉膏卵白 胨培养 基进展接种后培养 ，不雅 看 两种培养 基上菌落数量 ，进展比照得出论断 。(假设 抉择 培养 基上菌落种类远少于对比 组，那么其可具“抉择 感化 )(2)重复组的设置及感化 为打扫 “偶然因素 对试验 结果的烦扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，抉择 菌落数均在30300且数量 相差不年夜 的三个平板，用“均匀值代入计数公式予以盘算 菌落数。易错点3进展平板划线时，划线前、划线终了及中间各区划线时是否 均需灼烧接种环？其目标 是否 一样？点拨平板划线法纯化年夜 肠杆菌时差别 阶段均需灼烧接种环但其目标 有所差异。第一次操纵 ：杀逝世 接种环上原有的微生物。每次划线之前：杀逝世 前次 划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种开门见山 起源 于前次 划线的末了 。划线终了后：杀逝世 接种环上残存的菌种，防止菌种污染情况 跟 沾染 操纵 者。易错点4不清楚 “自养与“异养型微生物其培养 基身分 的清楚差异点拨(1)自养型微生物所需的要紧营养物资 是无机盐，碳源可来自年夜 气中的CO2，氮源可由含氮无机盐供给 。(2)异养型微生物所需的营养物资 要紧是无机物，即碳源必须 由含碳无机物供给 ，氮源也要紧是由含氮无机物供给 ，部分异养型微生物也可以 使用无机氮源。标准答题甲醛是一种起源 广泛 的挥发性无机污染物，存在 剧烈的致癌跟 致畸感化 ，使用微生物落解甲醛来治理 甲醛污染，存在 高效、环保、无二次污染等长处 。如图甲为收罗 活性污泥作为优良 菌源，通过抉择 不离出能以甲醛为唯一 碳源的高效落解菌的试验 过程 。请分析答复以下咨询 题：(1)上述试验 材估中 ，不需要 进展灭菌处理 的是，培养 基灭菌的常用方法为。该试验 过程 所用的抉择 培养 基只能以甲醛作为唯一 碳源，其缘故是_。(2)应怎样 确认增加 甲醛的培养 基是否 起到了抉择 感化 ？ _。(3)由的不离活性污泥中细菌的接种方法(如图乙)为法，接种时，对接种环应进展，在第二次及以后划线时，老是 从上一次划线的末了 开始，如斯 做的目标 是_。 (4)为研究 甲醛初始浓度对菌株落解甲醛才能的妨碍 ，进展了响应 试验 。当甲醛的初始浓度小于1 200 mg/L时，菌株可以 完整 落解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1 600 mg/L时，48小时后菌株对甲醛的落解才能特不 弱，乃至 掉 掉 落 落解才能，其缘故可以是。为了使该试验 所得结果准确可靠，还应当 设置的对比 试验 ，以打扫 甲醛天然 挥发对试验 结果的烦扰。(5)纯化菌株时，平日 应用 的划线东西 是。划线的某个平板培养 后，第一划线地区 的划线上都不连续 地长满了菌，第二划线地区 所划的第一条线上无菌落，其余 划线上有菌落。形成 划线无菌落可以的操纵 掉 误有。答卷采样错因分析答题不标准，经历 不准确。准确 谜底 ：高压蒸汽灭菌。混淆 两种对比 组用途准确 谜底 ：制备一个接种的牛肉膏卵白 胨培养 基同时培养 ，不雅 看 这两种培养 基上的菌落数量 不雅 点 理解不透，混淆 “消毒与“灭菌。准确 谜底 ：灼烧灭菌审题缺点 ，解答掉 误：看到“对比 试验 即盲目作答，未看到咨询 题后面的“以打扫 甲醛天然 挥发对试验 结果的烦扰。准确 谜底 ：不接种甲醛落解菌随堂·真题&猜测 1.(2016·天下 卷，39)氛围 中的微生物在重力等感化 下，可以 必定 程度地沉落。某研究 小组欲用平板收集 课堂 氛围 中的微生物，以理解课堂 内差别 高度氛围 中微生物的分布情况。试验 步调 如下：设置 培养 基(身分 ：牛肉膏、卵白 胨、NaCl、X、H2O)；制作 无菌平板；设置空缺 对比 组跟 假设 干试验 组，进展相干 操纵 ；将各组平板置于37 恒温箱中培养 一段时刻 ，统计各组平板上菌落的均匀数。答复以下咨询 题：(1)该培养 基中微生物所需的氮起源 于。假设 要实现 步调 ，该培养 基中的身分 X平日 是。(2)步调 中，试验 组的操纵 是_。(3)假设 在某次考察 中，某一试验 组平板上菌落均匀数为36个/平板，而空缺 对比 组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次考察 中出现了现象。假设 将30(即366)个/平板作为本组菌落数的均匀值，该做法(填“准确 或“不准确 )。剖析 (1)牛肉膏跟 卵白 胨都含有卵白 质的水解产品 ，都可以 作为氮源；平板为固体培养 基，故需要 参加 凝集 剂琼脂。(2)试验 探究 的是课堂 内“差别 高度氛围 中微生物的分布，此中 变量为差别 高度，故需在差别 高度下放置开盖平板。同时，为了保障 单一变量，需要 保障 开盖放置时刻 不合 。为了保障 明验可靠性，需要 设置多个平行组。(3)在完整 准确 的操纵 情况下，空缺 对比 组中不该 出现菌落。假设 出现菌落，说明操纵 过程 中存在杂菌污染，属于试验 掉 误，一实在验数据均不该 采纳。谜底 (1)牛肉膏、卵白 胨琼脂(2)将各试验 组平板分不放置在课堂 差别 高度的位置上，开盖裸露 一段时刻 (3)污染不准确 2.(2019·东北师年夜 附中调研)年夜 肠杆菌是遗传学跟 微生物学中经典的方法 生物。科研职员 要对年夜 肠杆菌进展研究 ，起首 要纯化年夜 肠杆菌，请联合 所学常识 ，答复以下咨询 题：(1)纯化年夜 肠杆菌起首 需要 制备培养 基。在年夜 肠杆菌培养 过程 中，除考虑 营养前提 外，还要考虑 、温度等前提 。(2)可以 估算 出样品中年夜 肠杆菌密度的接种培养 方法是，估算 值一般比理论值偏(填“年夜 或“小)。(3)滤膜法可计数水样中的年夜 肠杆菌。将过滤过待测水样的滤膜紧贴在培养 基上，这属于微生物培养 中操纵 。按照培养 基的物理形状来分，该培养 基属于培养 基。(4)如图是年夜 肠杆菌的纯化培养 的一种方法，12345表示 操纵 次序 ，培养 后可不雅 看 到所需菌落的地区 是，接种终了后将培养 皿放入恒温箱中培养 。剖析 (1)纯化年夜 肠杆菌起首 需要 制备牛肉膏卵白 胨固体培养 基。年夜 肠杆菌的培养 过程 中，除考虑 营养前提 外，还要考虑 温度、酸碱度跟 浸透压等前提 。(2)接种年夜 肠杆菌最常用的是平板划线法跟 稀释涂布平板法，此中 可以 估算 出样品中年夜 肠杆菌密度的是稀释涂布平板法。因为 两个或两个以上细胞聚拢 在一起 ，不雅 看 到的每每 是一个菌落，故估计 数值一般偏小。(3)过滤过待测水样的滤膜紧贴在培养 基上，是将样品中的年夜 肠杆菌接种到培养 基上，固体培养 基适于计数。(4)图中5地区 就可掉 掉 落 所需要 的菌落。接种终了后要将平板颠倒 放入恒温箱中培养 。谜底 (1)牛肉膏卵白 胨固体浸透压(或酸碱度)(2)稀释涂布平板法小(3)接种固体(4)5颠倒 课后·强化练习 (时刻 ：30分钟)1.(2019·山东泰安一模)洗衣机内部的情况 特不 潮湿，洗衣机应用 时刻 越长，内部繁殖 微生物的机会 就越年夜 。研究 职员 使用洗衣机内桶反面的残留物进展了相干 试验 。请答复：(1)要制备固体培养 基培养 残留物中的微生物，培养 基中一般应含有。在倒平板操纵 后，将平板颠倒 ，如斯 做的目标 是_。(2)以下各项中，需要 消毒的是，需要 灭菌的是。培养 基与培养 皿；玻棒、试管，烧瓶跟 吸管；试验 操纵 者的双手。(3)为了检测残留物中含有微生物的情况，要将残留物制成水样稀释，而后 将稀释水样用涂布器分不涂布到琼脂固体培养 基的外表进展培养 ，这种方法称为。用该方法统计菌落数时是否 需要 对比 组？。什么缘故 ？ _。谜底 (1)水，碳源，氮源跟 无机盐防止培养 皿盖上凝集 的水珠落入培养 皿形成 污染，还可使培养 皿外表的水分更好的挥发(2)(3)稀释涂布平板法需要 因为 需要 揣摸 培养 基是否 被杂菌污染2.(2019·四川雅安三诊)微生物的应用 范畴 相称 广泛 ，但优良 菌种的选育是根底跟 要害 ，是清楚改良 跟 进步产品 种类、产量以及品质 的先决前提 。以以下列图是菌株不离跟 抉择 的一般流程，据此答复以下咨询 题。(1)采样：泥土 有“微生物的天然 培养 基之称，在寻寻 目标 菌株时要按照。(2)富集：工资 把持 前提 使目标 菌种占上风 ，同时其余 微生物成长 ，比方 培养 霉菌时需将培养 基的pH调至。(3)不离：从物理性子 上看，不离需要 配制培养 基，并采纳法灭菌，不离过程 可采纳接种。(4)抉择 ：按照菌落_特点 进展判定 (至少答两点)。剖析 (1)差别 的微生物对生涯 情况 的请求 差别 ，因此在寻寻 目标 菌株时，要到响应 的情况 中寻寻 。(2)在微生物富集步调 ，要工资 把持 前提 克制 其余 微生物成长 ，并使得目标 菌种占上风 ，如培养 霉菌时需将培养 基的pH调至酸性，不仅 需利于霉菌的成长 ，还可以 克制 其余 杂菌的成长 。(3)不离菌种应当 采纳固体培养 基，常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法；接种菌种前需要 使用高压蒸汽灭菌法对固体培养 基进展灭菌处理 。(4)差别 的菌落存在 差别 的特点 ，可以 按照菌落的形状 、巨细 、隆起程度、色彩 、透明度等特点 进展判定 。谜底 (1)微生物对生涯 情况 的请求 ，到响应 的情况 中寻寻 (2)克制 或禁止 酸性(3)固体高压蒸汽灭菌平板划线法或稀释涂布平板法(4)形状 、巨细 、隆起程度、色彩 、透明度3.嗜盐菌常分布在晒盐场、盐湖、腌成品 中，某生物兴趣 小组对嗜盐菌进展了如下探究 跟 分析，请答复以下咨询 题：(1)获得嗜盐菌的第一步是从合适的情况 中收罗 菌样，而后 按必定 的方法不离、纯化。培养 嗜盐菌的培养 基较一般培养 基中含量高。(2)如图是采纳差别 接种方法接种嗜盐菌后纯化培养 的后果 图，此中 图方法不合实用 于微生物的计数，出现图A结果的缘故是在操纵 时。在进展计数时，终极 拔取 菌落数在范畴 内的平板进展计数，不克不及 选用菌落数过多的平板的缘故是_。(3)在试验 过程 中，无菌操纵 是特不 主要 的，对试验 过程 中应用 的玻璃器皿平日 应用 法进展灭菌。剖析 (1)由题意可知，嗜盐菌可以 成长 在高盐的情况 中，故与一般培养 基比拟 ，培养 嗜盐菌的培养 基中盐含量较高。(2)获得图A所示后果 的接种方法为稀释涂布平板法，获得图B所示后果 的接种方法为平板划线法，在微生物计数时应当 选用稀释涂布平板法接种。图A中菌落会合 在平板的某地区 ，说明在操纵 过程 中涂布不均匀。在计数时，为了保障 结果准确，一般抉择 菌落数在30300的平板进展计数，假设 菌落数过多，菌落重叠 的概率年夜 ，将发生 较年夜 偏差 。(3)对玻璃器皿的灭菌平日 应用 干热灭菌法。谜底 (1)盐(NaCl)(2)B涂布不均匀30300菌落数过多，菌落重叠 的概率年夜 ，将发生 较年夜 偏差 (公道 即可)(3)干热灭菌4.(2019·山西太原模拟)反刍动物 如牛跟 山羊，存在 特不的器官瘤胃，瘤胃中生涯 着多种微生物，研究 职员 从牛胃中抉择 纤维素酶高产菌株，并对其落解纤维素才能进展了研究 ，请答复：(1)在样品稀释跟 涂布平板步调 中，以下选项不需要 的是(多项抉择 )。A.酒精灯 B.培养 皿C.显微镜 D.无菌水E.接种环(2)向试管内分装含琼脂的培养 基时，假设 试管口粘附有培养 基，需要 用酒精棉球擦净的缘故是_。(3)刚果红可与形成 白色复合物，研究 职员 在刚果红培养 基平板上，抉择 到了多少 株有透明落解圈的菌落(见图1)。图中落解圈巨细 与纤维素酶的有关。图中落解纤维素才能最强的菌株是(填图中序号)。(4)纤维素酶高产菌株在20 暂时保存 时，菌液中常需参加 必定 量的收藏 。(5)研究 职员 用抉择 到的纤维素酶高产菌株A跟 B，在差别 温度跟 pH前提 下进展发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图2，推测菌株更合实用 于人工瘤胃发酵，来由 是_。谜底 (1)CE(2)防止培养 基污染棉塞(3)纤维素量与活性菌2(4)甘油(5)B发酵过程 会产热跟 产酸，B菌株在较高温度跟 酸性情况 下酶的活性更高5.(2019·石家严正 点高中摸底)牛奶富含矿物资 跟 满意 人体成长 发育所需的多种氨基酸，消化率高达98%。暂时饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶也是多种病菌的转达 载体。如图是牛奶消毒及细菌检测试验 的过程 。请答复以下相干 咨询 题：(1)培养 基中的卵白 胨为细菌的成长 供给 的营养物资 要紧有(填两个)，对培养 基常采纳法进展灭菌。(2)步调 称为消毒法，步调 是_。(3)步调 的接种方法是_。微生物培养 过程 中，为防止冷凝水妨碍 细菌的成长 ，需将培养 皿培养 。(4)将接种后的培养 基放入中培养 ，36 h后掏出 ，统计3个平板上的菌落数分不是87、83跟 85。通过消毒后的牛奶中，细菌数年夜 概 是个/mL。剖析 (1)培养 基中的卵白 胨为细菌的成长 供给 的营养物资 要紧有碳源、氮源跟 维生素；常采纳高压蒸汽灭菌法对培养 基进展灭菌。(2)图中步调 把牛奶放在80 恒温水浴锅中煮15 min，采纳的是巴氏消毒法，步调 是梯度稀释。(3)接种微生物常用平板划线法跟 稀释涂布平板法，此中 只需稀释涂布平板法可以 用于微生物计数。微生物培养 过程 中，为防止冷凝水妨碍 细菌的成长 ，需将培养 皿颠倒 培养 。(4)将接种后的培养 基放入恒温培养 箱中，培养 36 h后，统计3个平板上的菌落数分不是87、83跟 85，由图可知稀释倍数为103，因此，通过消毒后的牛奶中，细菌数年夜 概 是(878385)/3×1038.5×104(个/mL)。谜底 (1)碳源、氮源(跟 维生素)高压蒸汽灭菌(2)巴氏梯度稀释(3)稀释涂布平板法颠倒 (4)恒温培养 箱8.5×1046.(2019·四川广安眉山一诊)经人工诱变获得的天冬氨酸缺点 型菌株，菌体自身不克不及 剖析 天冬氨酸，必须 从外界情况 中猎取 天冬氨酸才能成长 繁殖 。以以下列图是科研职员 使用“影印法抉择 天冬氨酸缺点 型菌株的部分过程 (注：全然 培养 基中不含氨基酸，完整 培养 基中含所有 种类的氨基酸)。答复以下咨询 题：(1)过程 接种的方法是。待测培养 皿中的培养 基是(答“全然 或“完整 )培养 基。(2)过程 是将印在统一 块丝绒布上的菌落，先后转印至两个差别 的平板上。该过程 应当 先转印到(答“全然 或“完整 )培养 基上，缘故是_。(3)实现 过程 的转印并在28 的培养 箱中培养 2天后，两个平板上出现的菌落有的一样，有的差别 。完整 培养 基上出现的菌落A跟 菌落B中，不可以是天冬氨酸缺点 型菌株的是菌落(答“A或“B)，缘故是_。(4)为了进一步判定 抉择 到的菌株确实是天冬氨酸缺点 型菌株，科研职员 又制备了甲、乙两个平板，这两个平板中营养身分 的差异是。将待判定 菌种接种到两个平板中，置于合适前提 下培养 一段时刻 后，假设 不雅 看 到两个平板中菌落的成长 情况是，那么说明该菌株是天冬氨酸缺点 型菌株。剖析 (1)分析图解可知，过程 导致 菌落均匀分布，因此该方法为稀释涂布平板法；两种培养 基分不培养 是为了抉择 出氨基酸缺点 型菌株，因此与全然 培养 基比拟 ，待测培养 皿中特有的身分 有氨基酸，类似于完整 培养 基。(2)过程 应将印在丝绒布上的菌落先转印至全然 培养 基上，缘故是防止全然 培养 基中混入氨基酸。(3)比较全然 培养 基跟 完整 培养 基中的菌落可知，B菌落在全然 培养 基上能成长 繁殖 ，说明它能剖析 天冬氨酸，不可以是天冬氨酸缺点 型菌株。(4)为了进一步判定 抉择 到的菌株确实是天冬氨酸缺点 型菌株