紫菀药材的高效液相色谱指纹图谱与定量分析.docx

紫菀药材的高效液相色谱指纹图谱与定量分析生长在同一地段而致误采。其二是三脉叶马兰生长范围较广而且量多，某些药农见利忘义有意伪充。药材切成饮片后，形状上较难分辩，但二者的头状花序较易区分，刘寄奴的呈椭圆形，白色似米粒，小花全为管状花，其叶脉羽状，无离基三出脉。药材具芳香气，味淡。而三脉叶马兰头状花序呈半球形，较大，小花有舌状花和管状花，其叶有离基三出脉和羽状脉。气微，苦、辛。二者的显微特征差异较大，刘寄奴药材外表具“字形非腺毛，腺毛顶面观呈鞋底形；叶主脉底部钝圆略呈圆锥形，上外表稍突起，且中央微凹。叶图三脉叶马兰的粉末显微特征非腺毛草酸钙针晶方晶腺毛簇晶花粉粒叶下表皮及气孔肉组织与茎髓薄壁细胞中有草酸钙簇晶散在。三脉叶马蓝无“字形非腺毛，叶主脉上下面突起明显，底部钝圆呈半圆形。髓部薄壁细胞内含多数短小的草酸钙针晶。二者花粉粒的形态和大小，外表特征差异也较明显。参处理，过滤，取滤液加乙醇稀释至适量浓度。于岛律型紫外分光度计上，在波长范围内测定其紫外光谱。结果：刘寄奴考文献在波长处有一最大吸收峰，在波长处有肩峰；而三脉叶马兰仅在波长处有一最大吸收峰。中国医学科学院药用植物资源开发研究所，中国医学科学院药物研究所等中药志第四册京：人民卫生出版，：讨论刘寄奴的混杂原因可能有二：其一是二者均李时珍本草纲目校点本，上册北京人民出版社，：来源于菊科植物，在开花之前茎叶的形状和色泽均有类似之处，其生长环境与习性类似，且二者常混杂一收稿紫菀药材的高效液相色谱指纹图谱与定量分析周军辉伍蔚萍谢子民孙文基西北大学陕西省生物医药重点实验室，西安；西安市药品检验所，西安摘要目的：建立紫菀药材的反相液相色谱定性和定量鉴别分析方法。方法：。色谱柱×，斗，流动相为甲醇乙腈：磷酸梯度洗脱，流速为，检测波长为，柱温为。紫菀药材经甲醇超声处理，进行指纹图谱分析，并对紫菀药材中的主要成分槲皮素进行含量测定。结果在该色谱条件下，份不同紫菀药材的指纹图谱中可检出个共有峰作为定性鉴别；紫菀药材中槲皮素的含量在一之间。结论：本方法样品处理简便，准确性好，可用于紫菀药材的质量控制。关键词紫菀槲皮素反相高效液相色谱法紫菀为菊科植物的枯燥根在我们制定的紫菀指纹图谱中，含有分离较好的槲皮素色谱峰，这样，既能够得到指纹图谱提供的紫菀化学成分组成信息，又可测定槲皮素有效成分的含量。及根茎，有润肺下气、消痰止咳的功能，用于痰多喘咳，新久咳嗽，劳嗽咳血，是很多常用的止咳平喘复方中药制剂中的重要药物之一。槲皮素为紫菀中已知的有效成份之一，当代药理研究表明，它具有较好的祛痰、止咳和一定的平喘作用。?仪器与试药高效液相色谱仪，包括中药材第卷第期年月万方数据泵、二极管阵列检测器、自动进样器和工作站。甲醇、乙腈均为色谱纯，美国；其它试剂均为分析纯。槲皮素对照品中国药品生物制品鉴定所，批号。份紫菀药材分别采自河北祁州年月和年月，购自西安空军医院、陕西西安藻露堂药店、河北某地及河北定州，分别编号为、。以上样品均经过陕西省生物医药重点实验室鉴定，留样保存于陕西省生物医药重点实验室。以上样品粉碎后过目筛，。枯燥，密封保存，待用。实验部分对照品溶液的配制精细称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成每含¨的溶液，摇匀。供试品溶液的配制精细称取紫菀粉末，置具塞锥形瓶中，精细参加甲醇溶液，超声，取出，放冷，补足减失重量，离心，取上清液，蒸干，参加适量甲醇溶解，转移至量瓶，用甲醇稀释至刻度，斗滤膜过滤。色谱条件的选择优化色谱柱×，；柱温：。；流速：；检测波长：使用二极管阵列检测器记录不同波长的色谱图，结果表明，在检测波长下，槲皮素有较大吸收，色谱图中色谱峰较多，信息丰富，故选择为检测波长；流动相：磷酸水溶液，甲醇乙腈，：，梯度洗脱：，；，；，。方法学研究线性关系考察分别精细汲取不同体积的槲皮素对照品储备液，用甲醇稀释调配成系列对照品溶液，分别进样“，测定峰面积积分值，以槲皮素进样量斗为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得到槲皮素的线性方程为：一，。结果表明，槲皮素在¨范围内线性关系良好。重复性实验取同一批号紫菀材料五份，按“项方法制得供试品溶液。按“项下色谱条件分别测定，得到相应色谱图数据，用计算机辅助类似度评价系统评价整体类似度，结果以相关系数法计算，分别为、，。计算槲皮素峰的面积，分别为、，中药材第卷第期年月万方数据；计算槲皮素峰的保留时间分别为、，。精细度实验取紫菀药材祁州一份，按“项方法制得其供试品溶液。按拟定的色谱条件平行测定次，得相应色谱图数据，并用计算机辅助类似度评价系统评价整体类似度，结果以相关系数计算，分别为、，。计算槲皮素峰的面积，分别为、，槲皮素峰的保留时间分别为、，。稳定性实验按“项下制备供试品溶液，按“项下色谱条件分别在，进样。得到相应色谱图数据，用计算机辅助类似度评价系统评价整体类似度，结果以相关系数法计算，分别为、，。计算槲皮素峰的面积，分别为、，；计算槲皮素峰的保留时间分别为、，。加样回收率精细称取已知含量的样品粉末份，准确加人一定量的槲皮素对照品，按“项下色谱条件测定槲皮素的含量，计算回收率。结果平均回收率，为。系统适用性按“项方法处理种不同产地的样品，得到相应的供试品溶液。在拟定色谱条件下分别测定，结果均以槲皮素峰计算理论塔板数。结果表明，理论塔板数以槲皮素峰计算不得暑图紫菀药材和槲皮素对照品色谱图?表不同紫菀药材图谱中共有峰相对保留时间比拟共有峰相对保留时间样品编号了！表不同紫菀药材图谱中共有峰相对峰面积比拟比拟批供试品的图谱发现，其中有个色谱峰是批供试品所共有的。计算图谱中各共有色谱峰相对于参照峰，槲皮素的相对保留时间【。和相对峰面积值。见表、。计算每个紫菀样品的色谱图中槲皮素峰的面积积分值。图批不同紫菀药材色谱图类似度评价及样品分析以、和峰作为标记峰，分别用中南大学计从下至上依次为，低于。算机辅助类似性评价系统和西北大学中草药指纹图谱比对系统计算批不同批次的紫菀药材类似度，结果见图和表。标准指纹图谱的建立与槲皮素定量分析分别精细汲取槲皮素对照品溶液适量和批供试品溶液各恤，注入液相色谱仪，色谱图见图。?讨论中药材第卷第期年月万方数据样品处理经过中曾使用水煮醇沉法，甲不尽一样如表中两种软件的相关系数法计算结果，因而应制定适宜的类似度软件评价标准，使结果具有一定的统一性。醇超声和甲醇超声等不同方法，其中甲醇超声所得槲皮素的含量最高，甲醇超声稍次之，水煮醇沉方法所得样品中槲皮素含量最低。但使用甲醇超声法得到的样品的色谱图基线噪音明显，容易使色谱柱污染，柱效降低；而使用甲醇超声能够避免以上问题，并更多兼顾紫菀药材中极性不同的化合物的提取，制定的指纹图谱更反映紫菀药材的全貌。因而，选用甲醇超声提取方法。且超声能够使槲皮素基本提取完全。从西安药材市场购得紫菀伪品两批，采用本文方法得到的色谱图与紫菀色谱图有明显不同。与紫菀标准指纹图谱比拟，两者类似度均低于。致谢：感谢西北大学分析科学研究所生物及经过分析化学实验室提供西北大学中草药指纹图谱比对系统，中南大学中药当代化研究中心提供计算机辅助类似性评价系统。通讯联络人由表能够看出，使用不同的类似度评价软件，基于一样的数学模型，计算同样的数据，结果也收稿，；，：，?：旬，：一，；高效液相色谱法鉴别儿茶及其混伪品林静吟许晓峰广州市越秀区正骨医院，广州；广州中医药大学，广州儿茶为豆科植物儿茶的去皮枝、干的枯燥煎膏，具有收湿生肌敛疮的成效，可用于溃疡不敛、湿疹、口疮、跌扑伤痛、外伤出血等。常作为外科、骨科制剂的原料。在药材采购经过中发现部分批次的儿茶原料药为混伪品，以致影响制剂的质量。用经典的化学反响检测均显阳性反响，不能作为鉴别根据。采用高效液相色谱法对正品及混伪品中的儿茶素及表儿茶素进行定量检测，即可加以区分，方法简便，结果准确可靠。生物制品检定所提供、儿茶浸膏及混伪品均经广州中医药大学中药鉴定教研室周诚副教授鉴定；甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。方法与结果色谱条件：色谱柱：，；流动相：枸橼酸溶液一，二甲基甲酰胺一四氢呋喃：，等度洗脱，流速：，检波波长，柱温：。仪器与实验材料对照品溶液制备：精细称取儿茶素对照品，加高效液相色谱仪德国；甲醇水：配制成的溶液，即得。另精细称取表儿茶素对照品，加甲醇水：配制成的溶液，即得。?二极管阵列检测器；电子天平德国；儿茶素、表儿茶素对照品由中国药品中药材第卷第期年月万方数据