肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书.pdf
肌酸激酶同工酶 MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）说明书【产品名称】通用名称：肌酸激酶同工酶 MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）英文名称：Creatine kinase MB（CLIA）【包装规格】230 人份/盒、250 人份/盒、2100 人份/盒【预期用途】用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌酸激酶同工酶 MB 的含量。肌酸激酶主要催化高能磷酸键从 ATP转移 到肌酸 ，生成磷酸肌酸。肌酸激酶是二 聚体酶 ，包括 骨骼肌CK-MM， 脑组织 CK-BB ，心肌CK-MB 和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式。 CK-MB 分子量 80,000 ，由两个亚单位组成(每个亚基 MW= 40000)：亚单位 M 表示肌肉型，亚单位B 表示脑型。CK-MB 主要存在于心肌组织，占CK 总活性的20%，骨骼肌中也有微量分布。血清中 CK-MB 含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义。 CK-MB 在心肌损伤早期即可出现于循环血中，于心肌损伤后 2-6 小时开始升高，在12-24 小时内达到峰值，之后降至正常水平 (3672 小时)，CK-MB 测值的升降伴随 ECG 演变和胸痛病史。CK-MB 含量和时间变化，对评估心肌损伤发病时间、梗死体积以及再灌注后损伤有重要意义。此外，骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中，也伴随有 CK-MB 含量升高。临床诊断上，CK-MB经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I 联合检测。在心肌损伤相关疾病诊断上，肌钙蛋白 I 特异性强，肌红蛋白和CK-MB 早期敏感性高，三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性。【检验原理】肌酸激酶同工酶 MB 测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下：第一步：将样本与包被着 CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及 CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的 CK-MB 和包被在磁珠上的 CK-MB 单克隆抗体结合，同时CK-MB单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中 CK-MB 另一位点结合。反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质。第二步：将化学发光底物（3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）添加到反应管内，发光底物 AMPPD 能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量，所产生的光子数与样本内 CK-MB 的浓度成正比。样本内分析物的量由定标曲线来确定。【主要组成成分】试剂组分名试剂组分名称称成分成分原料及含量原料及含量223030 人份人份/ /盒盒装量装量225050 人份人份/ /盒盒22100100 人份人份/ /盒盒磁珠包被物（Ra）包被着抗 CK-MB 抗体的超顺抗体（小鼠单抗，IgG）的超顺磁性微粒，悬浮于缓冲液，含防腐剂抗 CK-MB 抗体（小磁性微粒， 0.2 g/L； Tris 缓冲液，50 mmol/L；ProClin 300，0.5g/L；叠氮钠，0.9 g/L抗 CK-MB 抗体-碱性磷酸酶标记物，3 mg/L；MES 缓冲液，50 mmol/L；ProClin 300，0.5g/L；叠氮钠，0.9 g/L22.4 mL22.7 mL包被着抗CK-MB23.8 mL26.6 mL酶标记物（Rb）鼠单抗，IgG ）-碱性磷酸酶标记物溶于缓冲液，含防腐剂23.5 mL26.3 mL注：不同批号试剂盒中各组分不能互换。第 1 页 共 5 页各组分位置见试剂瓶主视图（左）和俯视图（右）：需要但未提供的配套仪器和材料（迈瑞提供）需要但未提供的配套仪器和材料（迈瑞提供）（1）校准品：肌酸激酶同工酶MB校准品；（2）质控品：心肌标志物复合定值质控品；（3）全自动免疫检验系统用底物液；（4）清洗液；（5）迈瑞CL系列全自动化学发光免疫分析仪；（6）反应杯。【储存条件及有效期】28保存，有效期 365 天。上机使用后，在28的贮存环境下有效期为28天。生产日期见包装或标签。【适用仪器】230人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪8个机型：CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、CL-1200i、CL-2600i、CL-2800i。250 人份/盒和2100 人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪系列机型：CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、CL-1200i、CL-2000i、CL-2200i、 CL-2600i、CL-2800i、CL-5000i、CL-5200i、CL-5600i、CL-5800i、CL-4600i、CL-4800i、CL-3600i、CL-3800i、CL-6000i、CL-6200i、CL-8000i、CL-8200i、CL-9000i、CL-9200i。【样本要求】推荐使用血清样本或者 EDTA、肝素类抗凝剂采血管收集的血浆样本。按照通用的静脉穿刺措施来收集所有的血液样本；样本在检测前必须按照采血试管生产商建议的方式进行离心，并确保已去除了残余的细胞类物质；离心前，必须确保血清样本已经完全凝结，对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间；样本应没有气泡，若存在气泡推荐使用一次性吸头吸走气泡，操作过程中注意防止样本间的交叉污染；如果离心后的样本上覆盖着脂质层，那么需转移清澈的样本至新的样本管，不能转移脂质层；样本中若含有纤维蛋白或其它颗粒物质，或者样本经过冻融，测试前必须进行离心处理；不建议使用严重溶血（血红蛋白500mg/dL）和热灭活的样本。样本应尽可能及时测定，若在 6 小时内无法完成测定，可将样本置于低温下保存。样本在 28环境下可稳定 2 天；在-20或低于-20的环境下可稳定 90 天。样本应尽量避免反复冻融，反复冻融次数不宜超过5 次。不同生产商的采血试管，由于原材料和添加剂不同，可能导致不同的结果。迈瑞化学发光试剂盒没有对所有可能应用的采血试管类型和生产商进行测试，每个实验室需自行判断其使用的采血试管和血清分离产品的适用性。【检验方法】检测程序检测程序试剂瓶首次装载上机，应在封口撕开前轻轻地翻转30 次，观察试剂瓶确保超顺磁性微粒已完全悬浮；若超顺磁性微粒仍附着在试剂瓶底部，继续翻转试剂瓶直至其完全悬浮为止；若仍然无法悬浮，则该瓶试剂不能使用，第 2 页 共 5 页请联系客户服务。请勿翻转封口已撕开的试剂瓶。有关试剂装载的功能和操作方法，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“准备试剂”章节。必要时，需申请校准。有关申请校准的内容，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节。系统每次测定需使用样本量为 10 L。申请测试前，应准备好测试所需所有材料，并仔细阅读化学发光免疫分析仪使用说明书，以获得系统操作规程、样本管理、使用注意事项、维护和保养等相关信息。申请测试的主要步骤如下：（1）进入样本申请界面，根据测试需要输入样本编号、样本架编号、位置号、样本类型、备注等信息；（2）选中测试项目，在项目选项中选择样本杯类型，输入重复次数等信息；（3）准备测试样本并正确放置后，点击启动按钮开始测试。化学发光免疫分析仪会依次执行以下操作：（a）样本处理系统将样本架传送到吸样位；（b）反应杯装载及调度系统将反应杯从上料区加载到加样位；（c）加样系统完成样本的分注及样本针的清洗；试剂处理系统提供测试所需的试剂，并将每个试剂混匀后送到吸试剂位等待吸取；加样系统完成试剂的分注及试剂针的清洗；（d）反应混合液由反应液混匀系统对其进行混匀，并在反应盘中孵育；（e）孵育完成后，磁分离系统使用化学发光分离液对反应混合液进行清洗分离；（f）底物系统向完成磁分离的反应杯中注入经过预热的底物液，混匀、孵育、等待光测；（g）光测反应系统将每个反应杯送至信号采集位采集信号，用以计算发光值；（h）计算出样本中的肌酸激酶同工酶 MB 的含量。有关样本测试的功能和操作方法，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“样本测试”章节。校准校准使用配套的试剂盒和校准品执行校准测试。试剂盒开始校准前，应先将试剂盒二维条形码中的主校准曲线信息以及校准品二维条形码中的校准品赋值信息扫描导入系统。化学发光免疫分析仪通过校准品测试的结果调节主校准曲线，得到当前系统的校准曲线。仪器操作软件具有校准判断功能，自动完成校准曲线有效性的检查。所有测试前均需要有效的校准曲线，以下情况需重新进行校准：（1）使用新批号的试剂盒；（2）同一批号的试剂盒在分析仪上使用超过 28 天；（3）质控值超出规定范围。有关校准测试的详细说明，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节。质控质控为确保测试结果的可靠性，至少每 24 小时对高、低两个水平的心肌标志物复合定值质控品各检测一次；此外，每执行完一次校准测试、更换试剂批次、执行维护和故障处理操作后，也建议进行质控测试。质控品测试值应该在规定的范围内。若超出规定的范围，用户应对系统进行检查，如：质控品的位置、效期、保存方法，校准过程，仪器的性能、状态等，必要时需重新校准。重新测试后若结果仍超出范围可联系客户服务。有关质控测试的详细说明，参见化学发光免疫分析仪使用说明书“质控测试”章节。计算计算通过所保存的校准数据，系统软件使用一条加权的四参量对数曲线（4PLC）数学方式，自动地确定病人的测试结果。结果单位以 ng/mL 的形式给出。稀释稀释高于检测范围上限的血清或血浆样本可使用配套的样本稀释液进行稀释，建议稀释比例为 1:2（可由迈瑞全自动化学发光免疫分析仪自动稀释或手动稀释） 。如使用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪自动稀释，系统软件会自动给出乘以稀释倍数后的样本浓度；如使用手动稀释，需将测试得到的样本浓度乘以稀释倍数，以得到样本的实际浓度。【参考区间】第 3 页 共 5 页对广东地区医院 854 例（其中男性 436 例、女性 418 例）外表健康的成年人血清样本进行测试分析，测试数据采用非参数法进行处理，计算得出第 99 百分位和 97.5 百分位的参考区间上限如下：参考区间分析参考区间分析男性女性例数例数4364189999 百分位数（百分位数（ng/mLng/mL）6.364.9797.597.5 百分位数（百分位数（ng/mLng/mL）5.033.68由于地理、人种、性别及年龄等差异，建议各实验室建立自己的参考区间。【检验结果的解释】在解释测定结果时，需参照该病人的整体临床情况，包括：症状、病史以及其它相应的数据和信息。【检验方法的局限性】检测结果仅供临床参考，不能单独作为诊断或排除病例的依据。试剂盒检测范围为 0.1 ng/mL 300 ng/mL。对于 CK-MB 含量低于检测上限的样本，可以进行定量测定；若样本含量高于检测上限，那么以大于该值来报告结果（300 ng/mL） ；或使用配套的样本稀释液对样本进行稀释。当 CK-MB 浓度达到 20000 ng/mL 时，未出现钩状效应。人血清或血浆中的嗜异性抗体可以与试剂盒组份中的免疫球蛋白反应，干扰体外免疫检测1。经常与动物有接触或者使用免疫球蛋白或免疫球蛋白碎片进行治疗或诊断的病人，可能会产生此类抗体，从而使检测结果出现异常值；如接受过小鼠单克隆抗体制剂治疗或诊断的病人，其样本中可能含有人抗小鼠抗体（ HAMA） ，使用含有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此类样本时，其检测值可能会假性升高或假性降低2, 3。迈瑞化学发光试剂盒组份中含有抗干扰成份，可以有效降低样本中 HAMA 造成的影响，但少数样本依然有可能存在干扰问题。需要借助临床检查、病史或其他相关资料才能正确判断患者病情。【产品性能指标】最低检测限最低检测限不大于 0.1 ng/mL。线性线性试剂盒在 0.1 ng/mL300 ng/mL 区间内，其相关系数（r）不低于 0.9900。重复性重复性变异系数 CV 6%。批间差批间差变异系数 CV 10%。分析特异性分析特异性当样品中甘油三酯浓度 3000 mg/dL、胆红素浓度 20 mg/dL、血红蛋白浓度 500 mg/dL、总蛋白 10 g/dL时，测试结果的干扰偏差在10% 范围内。准确度准确度对具有溯源性的两个浓度水平的正确度控制品进行检测，检测结果与标定浓度的相对偏差在10% 范围内。【注意事项】本试剂盒仅供体外诊断使用；在使用本试剂盒时，必须遵循所有实验室试剂操作的注意事项；本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床管理应结合其症状 /体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况综合考虑；由于方法学或抗体特异性等原因，使用不同生产商的试剂对同一份样本进行检测可能会得到不同的检测结果，用不同试剂检测所得结果不应直接相互比较，以免造成错误的医学解释；建议实验室在发给临床医生的检测报告注明所用试剂特征。系列监测中如果改变试剂类型，则应进行额外的连续性检测并与原有试剂结果进行平行比较以重新确定基线值；本产品含有动物源性物质，可能存在潜在生物风险。对所有样本和反应废弃物都应视为传染源对待，所有废弃物必须按照当地法规进行处置；叠氮钠可能会与铅以及铜制的管件发生反应，形成具有高危爆炸性的金属叠氮物。在倾弃这种液体时，应以大量的水进行冲洗，防止叠氮物的集结4。第 4 页 共 5 页R43：如接触皮肤可引起致敏作用；S28-37：接触到皮肤后应立即用大量肥皂和水冲洗。应佩戴适用的手套。【标识的解释】【参考文献】1.2.3.4.Boscato Lm, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988; 34:27-33.Kricka L. Interferences in immunoassays - still a threat. Clin Chem 2000; 46: 10371038.Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: 613621.DHHS (NIOSH) Publication No. 78-127, August 1976. Current Intelligence Bulletin 13 - Explosive Azide Hazard.粤械注准 20152400848【说明书核准日期及修改日期】批准日期：2015-8-6修改日期：2017-10-11【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】第 5 页 共 5 页P/N：046-006216-00(4.0)
