免疫实验二：沉淀反应与溶血试验-陈玮琳、翁莉霞.ppt

医学免疫学实验,实验二,（一）沉淀反应1、单向琼脂扩散试验（示教）2、双向琼脂扩散试验3、对流免疫电泳试验（二）补体参与的免疫反应1、溶血反应2、补体结合试验（原理）,一定条件,Ag、Ab比例合适,（一）沉淀反应,可溶性Ag+Ab沉淀物,沉淀反应可在溶液中进行，也可在琼脂等凝胶中进行,1、单向琼脂扩散试验（定量）,2、双向琼脂扩散试验（定性或半定量）,Ag,Ab,Ab,？,Ag,Ab,？,Ag,Ab,？,Ag,：标本中无Ag,：标本中有Ag（相同抗原?）,（在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线）,标本,阳性对照,Ab,？,Ag,Ab,？,Ag,Ab,？,Ag,：标本中无Ag,：标本中有Ag（相同抗原）,标本,阳性对照,2、双向琼脂扩散试验（定性）（请按照实验指导讲义方法进行操作）,Ab,Ag,Ag,?,?,?,?,Ab,？,Ag,1.Makeaagarplate(withoutAborAg),2.Punchwells,Addsamples:Anti-AFPpositivecontrol(AFP)Testsample(AFP?),Ab,Ag,？,Ab,？,Ag,Ab,？,Ag,：noAg(AFP)insampleserum,：sameAg(AFP)insampleserum,Result(1):,4.incubationandobserveresults,：noAg(AFP)insampleserum,：sameAg(AFP)insampleserum,Ab,Ag,Ag,Ag,Ag,?,?,?,?,Ab,Result(2):,sampleserum(AFP?),AFP,(positivecontrol),Anti-AFP,Ab,Ag,Ag,?,?,?,?,sampleserum(AFP?),Anti-AFP,Result(3):,Ab,？,Ag,AFP,(positivecontrol),明天下午看结果，,3、对流免疫电泳原理图：,Ab,Ag,pH8.6,电泳力：电渗力：合力：运动方向：,14,对流免疫电泳检测方法：,Ab,阳性对照（Ag）,待测标本（？Ag）（有沉淀线：有Ag；无沉淀线：无Ag）,？,对流免疫电泳检测方法（加样图）：,Ab（抗AFP）,阳性对照（Ag）（阳性血清，含AFP）,待测标本（？Ag，？AFP）（有沉淀线：有Ag，AFP；无沉淀线：无Ag，无AFP）,？,（二）补体参与的免疫反应1、溶血反应,补体SRBC+AbSRBC-Ab溶血（溶血素）,请按照实验指导讲义方法进行操作2人/组注意观察溶血现象请分析：为何第3、4管不溶血，分别缺什么成分？,2、补体结合试验（检测原理）,？,补体,Ab,？,Ab,补体,反应系统（待测系统）,指示系统,溶血素,溶血素,SRBC,SRBC,有Ag,无Ag,不溶血,溶血,（标本中有Ag）,（标本中无Ag）,