2022年无菌检查用培养基适用性验证报告 .pdf

文件文件编号： VR-03-49页码： 0/8 无菌检查用培养基适用性验证报告审核批准表O方案经以下部门审核和批准后生效项目职责签字日期起草质保部质保部审核质保部长批准质量副总精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 1/81. 验证目的：为证明硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改进马丁培养基适合于细菌，真菌的无菌检查，总结本验证报告。2. 参照标准：中国药典 2010 版二部附录 XI H 无菌检查法。3. 验证项目：硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改进马丁培养基适用性检查。4. 试验材料：4.1. 被验证培养基：品名：硫乙醇酸盐流体培养基规格：批号：生产厂家：品名：营养肉汤培养基规格：批号：生产厂家：品名：改进马丁培养基规格：批号：生产厂家：4.2. 仪器设备：4.2.1. 压力蒸汽灭菌器：型号：编号：4.2.2. 双人净化工作台：型号：编号：4.2.3. 电热鼓风干燥箱：型号：编号：4.2.4. 生化培养箱 (23 28) ：型号：编号：4.2.5. 恒温培养箱 (3035)型号：编号：4.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液部门职责质保部负责对验证进行总结和评价批准方案及报告质保部负责制定确认方案及报告的编制质保部负责确认过程的相关检测，确保检验结论正确可靠质保部负责确认过程的相关检测，确保检验结论正确可靠精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 2/84.4. 验证用培养基：4.5. 验证用菌株：5. 菌液制备：5.1. 取经培养 1824 小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤新鲜培养物 1ml 加入到 9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中， 10倍稀释至小于 100cfuml 的菌悬液备用。5.2. 取经培养 2448 小时的白色念珠菌的改进马丁培养物1ml 加入到 9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中， 10 倍稀释至小于 100cfu ml 的菌悬液备用。6. 菌液计数：每种菌液接种 2 个平皿分别取上述制备的金黄色葡萄糖球菌、 铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌各 1ml 加入培养皿，每种菌液平行做 2 皿，注入不超过 45营养琼脂培养基1520ml，置 3035培养箱培养二天，取上项制备的白色念珠菌菌液1ml 加入培养皿，平行做2 皿，注入不超过45的玫瑰红钠琼脂培养基约1520ml，置 2328培养箱培养三天。硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基29.25g，加 1L 蒸馏水，加热煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121灭菌 15min。名称生产厂家批号营养琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基验证菌株代次培养基培养温度培养时间小时金黄色葡萄球菌CMCC B26 00330351824 铜绿假单胞菌 CMCCB10 10430351824 枯草芽孢杆菌 CMCCB63 50130351824 生孢梭菌CMCC(B)6494130351824 白色念珠菌CMCC F98 001 23282448 黑曲霉菌CMCC(F)98003232857 天精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 3/8营养肉汤培养基的配制：取营养肉汤培养基18g，加 1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121灭菌 15min。改进马丁培养基的配制：取改进马丁培养基28.5g，加 1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到到试管中，每只试管装量9ml，121灭菌 15min。硫乙醇酸盐流体培养基和营养肉汤培养基5 支，置于 3035的培养箱中培养14天；改进马丁培养基 5 支，置于 2328的培养箱中培养14 天，逐日观察情况。表 1 培养基的无菌性检查表注： “+”为生长，“- ”为不生长7.1. 硫乙醇酸盐流体培养基等灵敏度检查至少应进行3 次独立的平行试验。硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基29.25g，加 1L 蒸馏水，加热培养基名称管数培养时间天备注1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 硫乙醇酸盐流体培养基1 2 3 4 5 营养肉汤培养基1 2 3 4 5 改进马丁培养基1 2 3 4 5 结论精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 4/8煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121灭菌 15min。营养肉汤培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基18g，加 1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121灭菌 15min。改进马丁培养基的配制：取改进马丁培养基28.5g，加 1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到到试管中，每只试管装量9ml，121灭菌 15min。取每管装量为 12ml 的硫乙醇酸盐流体培养基9 支，分别接种小于100cfu/ml 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2 支，另 1 支不接种作为空白对照，培养 3 天；取每管装量为 9ml 的改进马丁培养基5 支，分别接种小于 100cfu/ml 的白色念珠菌、黑曲霉各2 支，另 1 支不接种作为空白对照，培养5 天。逐日观察结果。空白对照管应无菌生长， 假设加菌的培养基管生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。表 2培养基灵敏度检查表菌种类型培养基装量ml培养基管数支硫乙醇酸盐流体培养基天备注1 2 3 金黄色葡萄球菌12 1 12 1 枯草芽孢杆菌12 1 12 1 铜绿假单胞菌12 1 12 1 生孢梭菌12 1 12 1 空白对照12 1 菌种类型培养基装量ml培养基管数支营养肉汤培养基天备注1 2 3 金黄色葡萄球菌12 1 12 1 枯草芽孢杆菌12 1 12 1 铜绿假单胞菌12 1 12 1 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 5/8生孢梭菌12 1 12 1 空白对照12 1 菌种类型培养基装量ml培养基管数支改进马丁培养基天备注1 2 3 4 5 白色念珠菌9 1 9 1 黑曲霉9 1 9 1 空白对照9 1 结论注： “+”为生长，“- ”为不生长8 验证周期：同种培养基的不同批号，不同生产厂家均应进行适用性验证。9 结论：无菌检查用培养基适用性验证报告书验证项目无菌检查用培养基适用性验证验证目的无菌检查用培养基适合于细菌，真菌的培养2014 年月日至 2014 年月日，验证小组根据批准的“验证方案”对无菌检查用培养基进行无菌检查和灵敏度验证，验证方案在实施过程中未做修改；根据中华人民共和国药典2010 年版二部附录无菌检查法培养基的适用性检查，结果_ 。验证人员会签：部门职责人员会签质保部负责对验证进行总结和评价批准方案及报告质保部负责制定确认方案及报告的编制质保部负责确认过程的相关检测，确保检验结论正确可靠质保部负责确认过程的相关检测，确保检验结论正确可靠批 准 人：批准日期：精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 6/8无菌培养基的适用性检查记录培养基： 1. 硫乙醇酸盐流体培养基批号： _ 检验日期： 2. 营养肉汤培养基批号： _ 检验日期：3. 改进马丁培养基批号： _ 检验日期：一、培养基的无菌性检查培养温度：硫乙醇酸盐流体培养基改进马丁培养基培养基名称管数培养时间天备注1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 硫乙醇酸盐流体培养基1 2 3 4 5 营养肉汤培养基1 2 3 4 5 改进马丁培养基1 2 3 4 5 结论注： “+”为生长，“- ”为不生长二、培养基的灵敏度检查1. 菌液制备：1金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 第_代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml2枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501 第代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml 3铜绿假单胞菌 CMCC(B) 10104 第_代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml 4生孢梭菌 CMCC(B)64941 第_代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml 5白色念珠菌 CMCC(F)98001 第代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml 6黑曲霉 CMCC(F)98003 第代0.9%无菌 NaCl 溶液至含菌量 CFU/ml精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 8 页制药文件文件编号： VR-03-49页码： 7/82. 检查结果细菌培养温度 _ 3天霉菌及酵母菌培养温度_ 5天菌种类型培养基装量ml培养基管数支硫乙醇酸盐流体培养基天备注1 2 3 金黄色葡萄球菌12 1 12 1 枯草芽孢杆菌12 1 12 1 铜绿假单胞菌12 1 12 1 生孢梭菌12 1 12 1 空白对照12 1 菌种类型培养基装量ml培养基管数支营养肉汤培养基天备注1 2 3 金黄色葡萄球菌12 1 12 1 枯草芽孢杆菌12 1 12 1 铜绿假单胞菌12 1 12 1 生孢梭菌12 1 12 1 空白对照12 1 菌种类型培养基装量ml培养基管数支改进马丁培养基天备注1 2 3 4 5 白色念珠菌9 1 9 1 黑曲霉菌9 1 9 1 空白对照9 1 结论注： “+”为生长，“- ”为不生长三、结论： 本品按 中华人民共和国药典2010 年版二部 附录无菌检查法培养基的适用性检查，结果 _。检查人 / 日期：复核人 / 日期：精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 8 页