高效液相法测定尼莫地平片剂的含量-.doc
【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流高效液相法测定尼莫地平片剂的含量-.精品文档.高效液相法测定尼莫地平片剂的含量摘要：目的：通过HPLC方法测定尼莫地平片剂的含量。方法:在色谱条件：选择Diamonsil C18 (200 mm×4.6 mm,5m)为色谱柱,流动相：甲醇：水（68:32）,检测波长：238 nm, 进样量10l，1.0mL/min流速,柱温为室温（25）条件下进行检测。结果：尼莫地平在11.07ug·mL-1 55.35ug·mL-1范围内线性关系良好，线性方程为：Y =6921.2X-4311.6（r=0.9994）, 平均回收率为100.97%，RSD=1.5%。结论:采用高效液相色谱方法，可有效评估尼莫地平片剂中尼莫地平的含量,本法简单、灵敏度高、结果准确。关键词：HPLC法; 尼莫地平;含量尼莫地平(Nimodipine,NMD)为1, 4 双氢吡啶类钙通道拮抗剂,主要用于扩张脑血管及改善脑功能1，该药难溶于水，属脂溶性药物2。尼莫地平片剂测定多以紫外分光光度法为主，但因该法存在有关物质方面干扰，专属性较差3，本文由此出发考察高效液相法在其含量测定方面的应用效果。1 材 料1.1 仪器与试药岛津 LC-202010ACHT 型高效液相色谱仪；超声波清洗器；甲醇由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供由国药集团化学试剂有限公司提供，为色谱醇；尼莫地平对照品（中国药品生物制品检定所，批号：160112-160223）；尼莫地平片（牡丹江灵泰药业股份有限公司，国药准字H23022380，规格：20mg，批号为：160123、160321、160628）。2 方法2.1高效液相色谱法2.1.1 色谱条件波长选择：以流动相做空白对照，于200-400nm波长下对尼莫地平对照品溶液进行全波长扫描，结果显示在238nm处尼莫地平有最大吸收；以空气为对照，对流动相进行全波段扫描显示，其在238nm内基线平行，无干扰，故确定检测波长238nm。色谱柱选择Agilent C18 (150 mm×4.6 mm,5 m)Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5 m)，流动相：甲醇：水（6832）,检测波长：238 nm, 进样量10l，1.0 mL/min流速,柱温为室温（25）。2.1.2 溶液的制备2.1.2.1 供试品溶液的制备精密称取10片尼莫地平片，粉碎后混合均匀，精密称取上述供试品适量置于25ml容量瓶中，加入流动相适量稀释，摇匀至澄清后，稀释至对应刻度，取适量溶液经微孔滤膜（0.25um）过滤后，待用。2.1.2.2 对照品溶液的制备采用十万分之一天平称取尼莫地平对照品11.07mg于100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即得。2.1.3 方法学验证2.1.3.1 精密度试验在相同色谱条件下，取对照品重复进样6次，每次10ul，分别测定峰面积，并计算6组数据所得的相对标准偏差RSD，结果为 1.2%<2.0%，符合药典规定4，提示，本组方法精密度良好。2.1.3.2 重复性试验选择同批号尼莫地平片6份，精密称定后，根据供试品“2.1.2.1”项操作制备溶液，采用“2.1.1项”下色谱条件，进样10ul，采集6份样品的色谱图，计算溶液的相对标准偏差RSD = 1.3% （小于2.0%），符合标准规定，提示本组方法具有较好的重复性。2.1.3.3 稳定性试验于2h、4h、8h、12h、24h取尼莫地平供试品溶液，采用相同色谱条件，进样10ul，根据测得的色谱峰面积，供试品组RSD为1.6%<2.0%，提示供试品溶液在24h内较为稳定。2.1.3.4 回收率考察取“2.1.2.1”项供试液，保存至3个锥形瓶内，依次加尼莫地平对照品0.409mg、1.231mg和2.141mg，根据 “2.1.1”项色谱条件，进样10ul，对峰面积进行测定，得到回收率分别为：101.11%、100.84%和100.97%，平均100.97%，RSD 1.5%，与药典标准相符4。2.1.4 线性关系考察采用移液管精密移取“2.1.2.2”的尼莫地平对照品溶液1.0ml、2.0ml、3. 0ml、4.0ml、5.0ml于10ml容量瓶中，使用流动相稀释至刻度，澄清后，采用微孔滤膜过滤，得到系列标准溶液。结合对应色谱条件，进样10ul，测定样品色谱峰面积，以峰面积和浓度为坐标，建立标准曲线，得到方程为：Y =6921.2X-4311.6（r=0.9994），提示，尼莫地平浓度在11.07ug·mL-1 55.35ug·mL-1范围内与峰面积存在良好的线性关系。2.2 样品中尼莫地平含量测定结合“2.1.1项”下色谱条件，分别测定尼莫地平对照品溶液与3批尼莫地平片供试品溶液，供试品制备同“2.1.2.1”项操作，采用自身对照法对供试品内含有的尼莫地平含量进行测定。3 结果结果显示，高效液相法测定尼莫地平片中尼莫地平平均含量（与标识量比较）为（100.67±0.83）%，见下表1。表尼莫地平片中尼莫地平含量测定结果（%）批号尼莫地平含量160123160321160628高效液相色谱法100.92101.1199.984.讨论尼莫地平(C21H26N2O7)属二氢吡啶类钙拮抗剂，其在238nm和234nm的波长处均有吸收，但研究显示5 前者的灵敏度比后者高,故本文选择238nm作为检测波长。流动相选择方面，由于尼莫地平几乎不溶于水而溶于甲醇，美国药典33版6中显示其流动相为甲醇-四氢呋喃-水( 20:20:60)，考虑上述方法对四氢呋喃纯度及色谱柱要求较高，故本文尝试采用甲醇-水系统作为流动相备选，最终选择甲醇-水（68:32）作为流动相，此时尼莫地平与杂质分离度较高为4.1，且峰形较好，保留时间在7.5min左右。需注意的是尼莫地平对光敏感，故在测定过程中注意避光操作及保存。通过本文结果我们可知，高效液相色谱法测定尼莫地平准确性高、精密度好、重现性好和相关性均符合相关要求，可通过色谱柱作用将尼莫地平及其有关物质有效分离，提高测定的专属性，值得推广使用。参考文献1 潘文, 李豫, 雷宇,等. 高效液相色谱法同时测定血清中尼莫地平和尼群地平浓度J. 中国药业, 2012, 21(2):25-26.2 李帅, 李文莉, 廖彬,等. 高效液相色谱法测定尼莫地平固体制剂的溶出度J. 中南药学, 2012, 10(7):494-497.3 郝桂明, 华莲, 唐素芳. HPLC 法测定尼莫地平软胶囊的含量及有关物质J. 药物分析杂志, 2012, 32(3): 464-467.4 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部) S.北京: 化学工业出版社,2010.附录 XIX 194.5 郭利民, 李宪为. RPHPLC法测定尼莫地平含量及含量均匀度J. 解放军药学学报, 2002, 18(5):308-309.6 Rajani B, Mukkanti K. Optimized and validated RP-HPLC method for estimation of nimodipine in tablet dosage formJ. Int. J. Res. Pharm. Chem, 2014, 4: 105-109.
