KJ02--维生素B1的测定(精).ppt

1. VB1作用作用1）维生素B1又称硫胺素 ，主要作用是以辅酶的方式参加糖代谢。2）抑制胆碱酯酶的活性，减少乙酰胆碱的水解。 功能主治：维生素B1主要用于防治维生素B1缺乏症(脚气病)，多发性神经炎，小儿麻痹后遗症以及小儿遗尿症和心肌炎等的辅助治疗，清除运动后疲劳；对解除某些药物如链霉素、庆大霉素等引起的听觉障碍有帮助；也用于食欲不振，消化不良；在糖代谢率增高(如发热、甲亢、大量葡萄糖输入)时亦需要适当补充 。2. VBVB1 1存在形式存在形式在生物体内通常以硫胺焦磷酸盐（在生物体内通常以硫胺焦磷酸盐（TPPTPP）的形式存在。）的形式存在。 多存在于酵母、谷物、肝脏、大豆、肉类多存在于酵母、谷物、肝脏、大豆、肉类 。 酵母酵母谷类谷类动物肝脏动物肝脏大大豆豆肉肉类类（一）结构（一）结构维生素维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵盐类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱季铵盐类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱性基团，可与酸成盐。性基团，可与酸成盐。氯化氯化4-甲基甲基-3(2-甲基甲基- 4-氨基氨基- 5-嘧啶基嘧啶基)-甲基甲基-5-(2-羟基乙基羟基乙基)噻唑鎓盐酸盐噻唑鎓盐酸盐氨基嘧啶噻唑环VB1呈白色结晶或结晶性粉末。呈白色结晶或结晶性粉末。1.溶解性溶解性在乙醇中微溶，乙醚中不溶。在乙醇中微溶，乙醚中不溶。干燥品在空气中可迅速吸收干燥品在空气中可迅速吸收4%的水分，其的水分，其水溶液呈酸性。水溶液呈酸性。2.硫色素反应硫色素反应噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化具有荧光的硫色素，其硫色素溶于正丁醇呈蓝色荧光。氧化剂氧化具有荧光的硫色素，其硫色素溶于正丁醇呈蓝色荧光。3.紫外吸收特性紫外吸收特性在在246nm的波长测定吸光度，结果在的波长测定吸光度，结果在70.29g/mL101.53g/mL范围范围内线性关系良好。内线性关系良好。4.与生物碱沉淀试剂反应与生物碱沉淀试剂反应与某些生物碱（如碘化汞钾、硅钨酸等）反应生成组成恒定的沉淀。与某些生物碱（如碘化汞钾、硅钨酸等）反应生成组成恒定的沉淀。5.氯化物的特性氯化物的特性维生素维生素B1为盐酸盐，水解有氯离子，可以进行氯化物的鉴别反应。为盐酸盐，水解有氯离子，可以进行氯化物的鉴别反应。CH2NNH3CNH2CH3NNaSC2H4OHONNH3CNH2HClNSCH3C2H4OHCH2NaOHNNH3CNNNaSCH3C2H4OH-H2O三、鉴别反应三、鉴别反应（一）硫色素荧光反应（一）硫色素荧光反应硫色素硫色素SCH3C2H4OHNNH3CNNH 环合环合NNH3CNNSCH3C2H4OH H2(O)VB1结构具有嘧啶环和氨基，显生物碱特性。可与多种生物碱沉淀结构具有嘧啶环和氨基，显生物碱特性。可与多种生物碱沉淀或显色或显色 剂反应。剂反应。VB1碘化汞钾碘化汞钾产生淡黄色沉淀产生淡黄色沉淀碘碘产生红色沉淀产生红色沉淀硅钨酸硅钨酸白色沉淀白色沉淀苦酮酸苦酮酸扇形白色结晶扇形白色结晶（三）氯化物反应（三）氯化物反应（四）硫元素反应（四）硫元素反应（五）红外分光光度法（五）红外分光光度法VB1共热共热NaOHNa2SPb（NO3）2PbS1）滴加硝酸银，即产生白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加）滴加硝酸银，即产生白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸银，沉淀复生成。硝酸银，沉淀复生成。2）加二氧化锰，混匀后，加硫酸湿润，缓慢加热，产生氯气，用湿润的淀）加二氧化锰，混匀后，加硫酸湿润，缓慢加热，产生氯气，用湿润的淀粉碘化钾试纸检验显蓝色。粉碘化钾试纸检验显蓝色。样品加水溶解，水浴蒸干，在样品加水溶解，水浴蒸干，在105干燥干燥2个小时测定。个小时测定。维生素维生素B1及其制剂常用的含量测定方及其制剂常用的含量测定方法有非水滴定法、紫外分光光度法和法有非水滴定法、紫外分光光度法和硫色素荧光反应法。硫色素荧光反应法。硫色素荧光法是维生素硫色素荧光法是维生素B1的专属性反应，用于维生素的专属性反应，用于维生素B1及其及其制剂的含量测定。制剂的含量测定。ChP2010用非水溶液滴定法测定其原料用非水溶液滴定法测定其原料药，片剂和注射液均采用紫外分光光度法药，片剂和注射液均采用紫外分光光度法硫色素荧光法硫色素荧光法1）原理）原理维生素维生素B1铁氰化钾铁氰化钾碱性溶液碱性溶液硫色素硫色素紫外光紫外光ex365nm蓝色荧光蓝色荧光em435nm2) 方法步骤方法步骤1.铁氰化钾的制备铁氰化钾的制备2.对照品溶液的制备对照品溶液的制备3.样品溶液的制备样品溶液的制备4.测定方法测定方法vml供试品溶液中维生素供试品溶液中维生素B1的的ug数数=（A-b)/(S-d)*C对照品对照品*v对照品对照品A和和S分别为供试品溶液和对照品测得的平均荧光对数；分别为供试品溶液和对照品测得的平均荧光对数；b和和d则分别为则分别为其相应的空白读数。其相应的空白读数。3）注意事项）注意事项OVERThanks