2022年微生物知识点复习 .pdf
学习必备欢迎下载第一章绪论微生物学一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学微生物丰富的多样性以及独特的生物学特性（个体小、繁殖快、分布广等）使其在整个生命科学中占据着举足轻重的地位。表 1-1 重大事件1928 Griffith 发现细菌转化（对其激励的研究导致DNA 是遗传物质的确证）1929 Fleming 发现青霉素1944 Avery 等证实转化过程中DNA 是遗传信息的载体1953 DNA 双螺旋结构1995 第一个独立生活的细菌（流感嗜血杆菌）全基因组序列测定完成1996 第一个自养生活的古生菌（詹氏甲烷球菌）基因组测序完成1997 第一个真核生物（啤酒酵母）基因组测序完成巴斯德1）彻底否定了“自生说”曲颈瓶实验2）免疫学预防接种3）证明发酵是于微生物引起的4）其它贡献巴斯德消毒法柯赫1）微生物基本操作技术a）固体培养基分离纯化微生物（细菌纯培养方法的建立）b）配置培养基（实验室内对各种微生物培养）c）流动蒸汽灭菌d）染色观察和显微摄影2）病原细菌研究a）证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌b）发现了肺结核的病原菌（诺贝尔奖）c）柯赫原则证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则微生物的生物学特性1）极端环境下生存繁殖2）代谢途径和功能（化能营养，厌氧生活，生物固氮，不释放氧的光合作用）共有的基本生物学特性：生长繁殖代谢共用一套遗传密码，同源基因易操作性：个头小，结构简单，生长周期短，易大量培养，易变异，重复性强等优势第二章微生物的纯培养和显微技术无菌操作（火焰附近进行无菌箱或操作室内无菌环境进行）无菌技术用于分离， 培养微生物的器具事先不含任何微生物。在转接， 培养微生物时防止其它微生物的生长常用灭菌方法高压蒸汽灭菌（杀灭所有微生物（休眠体）。营养成分不被破坏）高温干热灭菌（玻璃器皿）固体培养基获得纯培养的方法不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。涂布平板使用较多但有时涂布不均匀精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 7 页学习必备欢迎下载稀释倒平板操作较麻烦，对好氧菌热敏菌效果不好平板划线稀释摇管法选择培养富集培养微生物的保藏技术（干燥保藏法）常用方法：沙土管保存（产孢子的微生物，芽孢杆菌放线菌等）和冷冻真空保藏冷冻保藏使其代谢作用停止保护剂（降低脱水作用防止细胞膜冻伤）普通光学显微镜分辨率最小可分辨距离=0.5 /（nsin）提高分辨率的方法油镜？ n 变大？为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和工作距离决定显微镜性能的因素？光学显微镜的制样活体观察（压滴法，悬滴法，菌丝埋片法）染色观察细菌染色法1）死菌 A）正染色a）简单染色法b）鉴别染色法（革兰氏染色法等）B）负染色：荚膜染色法等2）活菌：用美篮或TTC等作活菌染色细菌的形态和排列：球状（不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式。常被作为分类依据）杆状（排列方式常因生长阶段和培养条件而发生变化。一般不作为分类依据）螺旋状放线菌的形态结构孢子丝的形态结构？原核生物的细胞大小球菌（ 0.5-1m 直径）杆菌（ 0.2-1m 直径1-80m 长度）螺旋菌（0.3-1m 直径1-80m 长度 两端之间距离而非实际长度）测量细菌大小的方法1）显微镜测微尺2）投影法或显微照相后根据放大倍数计算表示大小的方法球菌直径杆菌螺旋菌长度和宽度测量单位 m？霉菌的形态结构霉菌菌体分支或不分枝菌丝构成菌丝呈管状无隔膜菌丝有隔膜菌丝酵母菌形态结构以芽殖或裂殖来进行无性繁殖的单细胞真菌，极少可产生子囊孢子进行有性繁殖一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形第三章微生物细胞的结构与功能原核生物特点和种类特点：一大类细胞微小、细胞膜无核膜包裹（只有称作核区的裸露DNA） 、的原始单细胞生物。1）基因组由无核膜包裹的双链环状DNA 组成 2）缺乏由单位膜分隔、包围的细胞器3）核糖体为 70S 型种类： 2 个 1）域细菌域a）狭义的细菌b）放线菌c）蓝细菌 d）支原体e）立克次氏体f）衣原体。共同特点：细胞壁含有独特肽聚糖（支原体无壁）细胞膜含有酯键连接的脂质，DNA 序列中一般没有内含子。细胞壁功能1）固定外形，提高机械强度，免受渗透压等外力损伤2）为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必须3）阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质（分子质量大于800）进入细胞，免受溶菌酶消化酶青霉素等损伤4）赋予细菌具有特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 7 页学习必备欢迎下载革兰氏阳性菌细胞壁组成1）肽聚糖a）双糖单位b）四肽尾或四肽侧链c）肽桥或肽间桥2）磷酸壁a）壁磷酸壁b）膜磷酸壁阴性菌细胞壁组成1）肽聚糖2）外膜 a）脂多糖b）磷脂 c）脂蛋白3）外膜蛋白4）周知空间，外膜与细胞膜之间的狭窄空间，呈胶状，存在多种周质蛋白。5）外膜与内膜间的黏合位点（直接接触点）区别表 3-1 P52or46 革兰氏染色的机理细胞壁化学成分的差异引起物理特性（脱色能力）的不同结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色沙黄复燃青霉素溶菌酶的作用机制肽聚糖？古生菌细胞壁与真细菌不同的地方1）假肽聚糖细胞壁-1,3 糖苷键（不被溶菌酶水解）2）独特多糖细胞壁3）硫酸化多糖细胞壁 4）糖蛋白细胞壁5）蛋白质细胞壁缺壁细菌： 1）L 型细菌 2）原生质体G+3）球状体G- 4）支原体衣原体不同点p55？革兰氏阳性菌和阴性菌的细胞壁的独特成分肽聚糖？原核生物细胞膜（一般不含胆固醇，能量代谢的地方含有呼吸光合作用有关的蛋白质）与真核不同古生菌细胞质膜与真细菌比较1）醚键连接亲水头和疏水尾2）疏水尾的长链烃异戊二烯的重复单位3）独特的单分子层膜或单、双分子层混合膜4）甘油 C3 分子，连接不同基团5）多种独特脂质细胞质与内含物贮藏物 P53or59 表原核生物细胞核特点：核区又称拟核，指原核生物所特有的无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。不能与细胞浆完全分开？芽孢某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体能形成芽孢的细菌有什么产芽孢细菌种类芽孢抗药机制？确定不是耐热伴孢晶体在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体* 内毒素糖被包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质荚膜（负染色）鞭毛（运动）阳性菌和阴性菌鞭毛结构不同之处基体（不一样）钩形鞘鞭毛丝（一样）如何在没显微镜的情况下判断细菌有无鞭毛1）穿刺法扩散区2）平板培养基菌落外形细菌毛的概念和功能长在细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面的功能。牢固粘附于（宿主的呼吸道、消化管、泌尿生殖道等的黏膜上），进一步定殖治病。第四章微生物的营养碳源速效碳源迟效碳源氮源生理酸性盐生理碱性盐缓冲物质碳氮比 C/N 适当的碳氮比有助于微生物发酵分解无机盐生理功能作为酶活性中心的组成部分，维持生物大分子和细胞结构的稳定性，调节并维持细胞的渗透压平衡，控制细胞的氧化还原电位，作为某些微生物生长的能源物质。大量元素磷硫镁钙钠钾铁微量元素锌锰钼硒钴铜钨镍精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 7 页学习必备欢迎下载生长因子微生物生长所必须且需要量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。1）维生素酶的辅基或辅酶参与新陈代谢2）氨基酸正常生长3）嘌呤和嘧啶酶的辅酶或辅基，合成核苷核苷酸和核酸水 水活度 aw 微生物的营养类型自养 /异养光能/化能无机/有机无机自养有机异养表 4-9 营养缺陷性某些菌株发生突变后，失去合成某种对该菌株生长必不可少的物质的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖配置培养基的原则1）选择适宜的营养物质2）营养物质浓度及配比3）控制 pH条件 4）控制氧化还原电位5）原料来源的选择6）灭菌处理培养基的类型根据成分天然培养基合成培养基物理性状固体半固体液体半固体培养基中凝固剂含量比固体培养基少作用区别固体分离鉴定活菌计数菌种保藏半固体观察微生物的运动特征，分类鉴定噬菌体效价滴定的用途分类基础培养基加富培养基鉴别培养基（加入某种特殊化学物质与某种代谢产物化学反应特征性变化，区分开来快速分类鉴定分离和筛选）选择培养基（从混杂的微生物群体中分离加入相应的特殊营养物质或化学物质）鉴别与选择区别营养物质进入细胞的方式：扩散、主动运输、基团转位各自特点第五章微生物的代谢发酵糖酵解4 种途径EMP途径、 HM 途径、 ED途径、磷酸解酮酶发酵的生理功能?提供 ADP 和 NADH 酵母的发酵类型？同型异型乳酸发酵双歧发酵无氧呼吸电子受体NO3-,NO2-,SO42-S2O32- 等外源受体自养微生物的生物氧化类型氨 硫 氢 铁能量转换底物水平磷酸化氧化磷酸化光合磷酸化1）环式光合磷酸化2）非环式光合磷酸化 3）嗜盐菌紫膜的光合作用次级代谢与次级代谢产物（抗生素、激素、生物碱、毒素、维生素）P129or144 第六章微生物的生长繁殖及其控制繁殖方式：细菌：二分裂酵母菌真菌（霉菌）？微生物的生长规律1）延缓期 2）对数生长期3）稳定生长期4）衰亡期生长曲线主要特点如何缩短延缓期1）改变遗传特性2）利用对数生长期的细胞作为“种子”3）接种前后培养基尽可能相似4）适当扩大接种量稳定生长期哪些代谢产物？收获期？衰亡期哪些代谢产物？计算产量常数K值公式K=总生长量 /所消耗基质的总量同步生长群体细胞能处于同一生长阶段，并同时进行分裂的生长方式获得同步生长的方法1）机械法a）离心法b）过滤分离法c）硝酸纤维素滤膜法2）环境条件控制技术a）温度 b）培养基成分控制c）其他连续培养微生物以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去丝状真菌的生长繁殖方式：菌丝的断片生长繁殖断裂增殖自然界无性和 （或） 有性孢子生长繁殖酵母菌：芽殖裂殖环境对微生物生长的影响营养物质、水活度、温度、pH 和氧150 页表 6-6 微生物与氧的关系精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 7 页学习必备欢迎下载微生物生长的测定：计数法（直接间接）测量结果的区别活菌死菌误差？重量法生理指标法微生物生长繁殖的控制：抗微生物剂： 抑菌剂（非选择性消毒防腐，选择性）、杀菌剂、 溶菌剂常用消毒物质浓度 （表6-8） 作用机制抗代谢物磺胺结构类似物取代正常成分，代谢紊乱抑制生长抗生素： 产生抗生素的细菌？作用机理抑制细胞壁合成、破坏细胞质膜、 作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化、抑制蛋白质和核酸合成（156 页图 or175 页）抗性菌株抗性机理1） 2）3）4） 如何避免抗药菌出现1）2）3）4）5）高温灭菌机理？常用高温杀菌方法（煮沸法间歇灭菌法84 消毒法？）高压蒸汽灭菌法：温度压力时间？辐射灭菌：紫外线使DNA 分子中相邻的嘧啶形成嘧啶二聚体，抑制DNA 复制与转录杀菌波长机制？过滤除菌高渗作用超声波干燥第七章病毒病毒定义特点：1）具有化学大分子特征2）只含一种核酸3）没有酶或酶系极不完全4）严格的活细胞内寄生5）个体微小6）抗生素不敏感干扰素敏感又具有生命基本特性既具有细胞外的感染性颗粒形式，又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群病毒的宿主范围分类噬菌体植物病毒动物病毒形态、结构、基因组、化学组成、对脂溶剂的敏感性研究病毒的方法分离与纯化测定噬菌斑（噬（蚀）斑测定？琼脂叠层法）包含体？包涵体？壳体的结构壳体蛋白单体分子（蛋白质亚基）以次级键结合包膜结构病毒以芽出方式成熟时，由细胞膜衍生而来。脂双层膜，包膜糖蛋白毒粒的结构类型4 种裸露（有包膜）的二十面体、裸露（有包膜）的螺旋动物病毒： DNA 以双链为主RNA以单链为主？病毒的蛋白质类型结构蛋白1）壳体蛋白2）包膜蛋白3）毒粒酶病毒的复制一步生长曲线潜伏期隐蔽期病毒的复制周期1）吸附 2）侵入 3）脱壳 4）病毒大分子的合成，病毒基因组的表达与复制5）装配与释放图 7-12？ 7-8 非增殖性感染的类型：流产感染、限制性感染、潜伏感染整合的病毒基因组温和噬菌体溶源性反应溶源性（以溶源状态存在的噬菌体不能完成复制循环，噬菌体基因组长期存在与宿主细胞内，没有成熟噬菌体产生。） 溶源性噬菌体动物病毒的整合感染：逆转录病毒= 反转录亚病毒因子：卫星病毒朊病毒不设科、属第 8 章 微生物遗传3 个经典实验Griffith 的转化实验Avery 选择性破坏细胞成分实验T2 噬菌体的感染实验证明核酸是遗传物质微生物基因组结构特点原核真核？大肠杆菌啤酒酵母质粒（独立于染色体外自主复制）和转录因子 （位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的 DNA 序列）细胞中除染色体以外的遗传因子质粒的类型1）致育因子2）抗性因子3）Col 质粒 4）毒性质粒5）代谢质粒6）隐秘质粒质粒提取（ 212 页上方？）=琼脂糖凝胶电泳电泳提取出现的特性？基因突变和修复基因突变类型1）碱基变化a）同义突变b）错义突变c）无义突变d）移精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 7 页学习必备欢迎下载码突变 2）表型变化a）营养缺陷型如何筛选（影印平板）b）抗药性突变型如何筛选（加有相应抗生素的平板上）c）条件致死突变型d）形态突变型基因突变的分子基础证明基因突变非对称性的3 个实验变量实验、涂布实验、影印实验1）自发突变 a）特性 b）分子基础2）诱发突变常用诱变剂a）碱基类似物b）插入染料 c）直接起化学反应的诱变剂d）辐射和热紫外线诱变的机理和注意事项？e）生物诱变因子 3）埃姆斯实验和用途（检测环境中存在的致癌物质）DNA 损伤的修复光复合作用细菌基因水平转移1）F+*F-杂交 2）Hfr*F- 杂交 3）F转导特点？转导（局限性与普遍性的区别）1）被转导的基因共价地与噬菌体DNA 连接，与噬菌体DNA一起进行复制、包装以及被导入受体细胞2）局限性转导颗粒携带特殊的染色体片段并将固定的个别基因导入个体。细菌的遗传转化：感受态如何获得人工感受态239 页：微生物育种常用微生物育种方法原生质体融合概念第 10 章267 页：微生物与基因工程的关系（6 点） 1）基因资源2）基因工程载体3）基因工程工具酶 4） 基因克隆的宿主5） 基因表达的生物反应器6） 基因工程理论研究常用载体工具酶宿主：大肠杆菌酵母菌枯草杆菌常用筛选方法1）抗生素抗性选择法2）插入失活法3）显色法第 11 章微生物在生态系统中的作用1）有机物的主要分解者2）物质循环中的重要成员3）生态系统中的初级生产者4）物质和能量的贮存者5）地球生物演化中的先锋种类碳循环氮循环 1）固氮 2）氨同化 3）氨化作用4）硝化作用5）硝酸盐还原6）反硝化作用生物固氮特点硫循环状态（3 点）环境中的微生物：微生物种群的相互作用各种相互作用的概念极端环境下的微生物动物体中的微生物人体微生物的分布共生固氮根瘤菌和共生植物的共生关系微生物与环境保护：微生物对污染物的生物降解：专一性的酶促反应污水处理过程中微生物的组成（ 319 页）异样细菌数量最多作用最大活性淤泥法生物膜法第 12 章rRNA 作为进化的指征1）rRNA 参与生物蛋白质的合成过程，必不可少，功能保持不变2）16SrRNA分子既含有高度保守序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域，亲缘关系研究 3）16SrRNA相对分子质量大小适中，便于序列分析4）测量各类生物进化的工具系统发育树的提出者伍斯域（三域三界）微生物分类1）古生菌 2）细菌 3）真核生物培养物：一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。 菌株：从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株。微生物的命名原则：双名法？双名法又称二名法，以拉丁文表示， 通常以斜体字或下划精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 7 页学习必备欢迎下载双线以示区别。第一个是属名，是主格单数的名词，第一个字母大写；后一个是种名，常为形容词，须在词性上与属名相符，小写。只鉴定到属可用sp 表示微生物分类鉴定的特征和技术1）形态学特征易于观察和比较。依赖于多基因的表达，具有相对的稳定性。2）生理生化特征与微生物的酶和调节蛋白质的本质和活性直接相关核酸的碱基组成和分子杂交DNA 的碱基组成【（G+C ） %】 用途稳定的特征？核酸分子杂交1）DNA-DNA 杂交 2）DNA-rRNA 杂交 核酸探针微生物鉴定实验常规鉴定大致的工作步骤第 14 章 感染与免疫感染途径 1)呼吸道感染2)消化管感染3)创伤感染4)接触感染5）垂直传播细菌的致病性1）侵袭力病原菌突破宿主防线，并能于宿主体内定居、繁殖、扩散的能力2）毒素内毒素外毒素微生物的种类特点分离纯化培养基第3章 原核生物第4章 营养和培养基第5章 微生物的特殊代谢类型：有氧和无氧氧化第六章第七章 形态结构增值复制第八章 微生物基因组结构特点质粒类型基因水平转移突变表型变化埃姆斯试验第九章 不考第十章 微生物在生态系统中的地位作用氮循环微生物与环境间的相互作用了解微生物的分布活性淤泥方法处理污水第十一章rRNA 作为进化指正系统发育树分类鉴定的命名原则分类鉴定中G+C的意义第十四章复习到炎症之前第十五章微生物生物技术重要产物宿主 酶第十六章精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 7 页
