生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定课件.ppt

实验：组成生物体的实验：组成生物体的还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定还原性糖鉴定还原性糖鉴定脂肪鉴定脂肪鉴定蛋白质鉴定蛋白质鉴定一、实验材料一、实验材料1. 1. 、还原糖的鉴定实验：应该选择含糖量高、还原糖的鉴定实验：应该选择含糖量高. .颜色为白色或近于白色的颜色为白色或近于白色的 植物组织，以苹果植物组织，以苹果. .梨为最好。梨为最好。 、脂肪鉴定实验：含脂肪丰富的花生种子。、脂肪鉴定实验：含脂肪丰富的花生种子。 、蛋白质鉴定实验：含蛋白质丰富的大豆或鸡蛋清溶液。、蛋白质鉴定实验：含蛋白质丰富的大豆或鸡蛋清溶液。 （避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖）（避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖）2.2.斐林试剂：甲液：质量浓度为斐林试剂：甲液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/ml0.05g/ml的的CuSO4CuSO4溶液溶液3.3.苏丹苏丹或苏丹或苏丹溶液。溶液。4.4.双缩脲试剂双缩脲试剂A A：质量浓度为：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的 NaOHNaOH溶液溶液 双缩脲试剂双缩脲试剂B B：质量浓度为：质量浓度为0.01g/ml0.01g/ml的的CuSO4CuSO4溶液（分开加）溶液（分开加）二、实验原理二、实验原理1 1、还原性糖、还原性糖+ +斐林试剂斐林试剂 砖砖红色沉淀红色沉淀 2 2、脂肪、脂肪+ +苏丹苏丹染液染液 橘黄色橘黄色 脂肪脂肪+ +苏丹苏丹染液染液 红色红色 3 3、蛋白质、蛋白质+ +双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色紫色水浴加热水浴加热4 4、斐林试剂和双缩脲试剂的比较：、斐林试剂和双缩脲试剂的比较：现配现用，先现配现用，先混合再使用混合再使用先加先加A液后加液后加B液液需加热煮沸需加热煮沸不需加热不需加热还原性糖中醛基被氢氧化铜氧还原性糖中醛基被氢氧化铜氧化，氢氧化铜被还原为氧化铜化，氢氧化铜被还原为氧化铜具有两个以上肽键的化合物在具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与碱性条件下与CU2+形成络合物形成络合物砖红色砖红色紫色紫色都有都有NaOHNaOH和和CUSOCUSO4 4两种成两种成分分颜色颜色不同点不同点斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂使用方法使用方法反应条件反应条件反应原理反应原理相同点相同点选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织制备组织液制备组织液 （制浆（制浆 过滤过滤 取液）取液）呈色反应（加刚配置的斐林试剂）蓝色呈色反应（加刚配置的斐林试剂）蓝色 水浴加热水浴加热 砖红色砖红色结论：植物组织中含有还原糖结论：植物组织中含有还原糖1、还原糖的鉴定：、还原糖的鉴定：三、实验过程：三、实验过程：注入注入2ML2ML苹果组苹果组织样液织样液注入注入2ML2ML刚配制刚配制好的斐林试剂好的斐林试剂振荡、混合摇匀振荡、混合摇匀溶液蓝色溶液蓝色沸水浴沸水浴2MIN2MIN试管中砖红试管中砖红色沉淀色沉淀2、脂肪的鉴定：、脂肪的鉴定：取材：花生种子取材：花生种子(浸泡浸泡34h），将子叶削成薄片），将子叶削成薄片 取最理想的薄片取最理想的薄片制片制片 在薄片上滴苏丹在薄片上滴苏丹染液（染液（23min） 去浮色（用去浮色（用50酒精）酒精） 制成临时装片制成临时装片 观察：低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察，可看观察：低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察，可看到橘黄色圆形小颗粒到橘黄色圆形小颗粒双缩脲试剂双缩脲试剂 B34滴滴选材：黄豆种子（蛋白液）选材：黄豆种子（蛋白液）制备组织样液：大豆组织研磨液或蛋白质稀释液制备组织样液：大豆组织研磨液或蛋白质稀释液 呈色反应：组织样液呈色反应：组织样液2ml(无色）无色） 结论结论：组织样液中有蛋白质：组织样液中有蛋白质 选材：黄豆种子（蛋白液）选材：黄豆种子（蛋白液）制备组织样液：大豆组织研磨液或蛋白质稀释液制备组织样液：大豆组织研磨液或蛋白质稀释液 呈色反应：组织样液呈色反应：组织样液2ml(无色）无色） 结论结论：组织样液中有蛋白质：组织样液中有蛋白质 3、蛋白质的鉴定：、蛋白质的鉴定：双缩脲试剂双缩脲试剂A2ml震荡摇匀震荡摇匀紫色紫色3、蛋白质的鉴定：、蛋白质的鉴定：双缩脲试剂双缩脲试剂A2ml注意：事先留出大豆组织样液，与化学试剂发生反应后的颜色对比注意：事先留出大豆组织样液，与化学试剂发生反应后的颜色对比四、实验注意：四、实验注意：1 1只有可溶于水且具备还原性的糖才能与斐林试剂发生特殊的颜色反应（葡萄糖、只有可溶于水且具备还原性的糖才能与斐林试剂发生特殊的颜色反应（葡萄糖、 果糖、麦芽糖）果糖、麦芽糖）2 2斐林试剂必须现配现用，否则，斐林试剂很不稳定，时间一长，沉淀在底部无法斐林试剂必须现配现用，否则，斐林试剂很不稳定，时间一长，沉淀在底部无法 发生反应。发生反应。3 3可溶性糖的选材要选择可溶性糖的选材要选择含糖量较高、颜色白色或接近白色的植物组织，以苹果、含糖量较高、颜色白色或接近白色的植物组织，以苹果、 梨最好，这样颜色反应就明显。若选用色素较深的材料，对颜色反应就会起掩盖作用。梨最好，这样颜色反应就明显。若选用色素较深的材料，对颜色反应就会起掩盖作用。4 4斐林试剂在使用时应先把甲和乙混合，然后再加入。因为我们所要的就是新制的斐林试剂在使用时应先把甲和乙混合，然后再加入。因为我们所要的就是新制的 CuSO4CuSO4，加入后的颜色是由浅蓝色，加入后的颜色是由浅蓝色 棕色棕色 砖红色沉淀。砖红色沉淀。5 5沸水浴加热时切记试管底部不要与烧杯底部相接触，以免试管受热不均而发生爆裂。沸水浴加热时切记试管底部不要与烧杯底部相接触，以免试管受热不均而发生爆裂。6 6蛋白质鉴定时所加试剂应先加双缩脲试剂蛋白质鉴定时所加试剂应先加双缩脲试剂A A，再加双缩脲试剂，再加双缩脲试剂B B，因为双缩脲试剂的本，因为双缩脲试剂的本 质就是在碱性环境下的质就是在碱性环境下的Cu2+Cu2+，而且，而且B B液要求量适中，否则多余的液要求量适中，否则多余的B B液将会与液将会与A A液发生反应液发生反应 生成生成CuCu（OHOH）2 2显色而遮盖原有的颜色。显色而遮盖原有的颜色。7 7用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷。用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷。8 8鉴定可溶性还原性糖和蛋白质时要留下部分组织样液为对照，这样更有说服力。鉴定可溶性还原性糖和蛋白质时要留下部分组织样液为对照，这样更有说服力。9 9脂肪的鉴定中选切片时，要选最薄的切片，否则细胞相互重叠，看不清实验效果。脂肪的鉴定中选切片时，要选最薄的切片，否则细胞相互重叠，看不清实验效果。1010注意区分斐林试剂和双缩脲试剂的不同。注意区分斐林试剂和双缩脲试剂的不同。课堂检测课堂检测:1、在过氧化氢酶中加入双缩脲试剂，其结果应该是（、在过氧化氢酶中加入双缩脲试剂，其结果应该是（ ） A、产生气泡、产生气泡 B、溶液呈蓝色、溶液呈蓝色 C、溶液呈紫色、溶液呈紫色 D、产生砖红色沉淀、产生砖红色沉淀 2、用斐林试剂可以鉴定还原糖的存在，用双缩脲试剂可以鉴定蛋白质的、用斐林试剂可以鉴定还原糖的存在，用双缩脲试剂可以鉴定蛋白质的存在，在医学上，还常用上述两种试剂进行疾病的诊断。能够诊断的存在，在医学上，还常用上述两种试剂进行疾病的诊断。能够诊断的疾病是（疾病是（ ） A、糖尿病、肠炎、糖尿病、肠炎 B、糖尿病、胃炎、糖尿病、胃炎 C、肾炎、胃炎、肾炎、胃炎 D、糖尿病、肾炎、糖尿病、肾炎3、鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品、鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品,不需要用的化学试剂是不需要用的化学试剂是( ) A 斐林试剂斐林试剂 B苏丹苏丹IV染液染液 C 双缩脲试剂双缩脲试剂 D红墨水红墨水4、在还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是（、在还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是（ ） 甘蔗的茎甘蔗的茎 油菜籽油菜籽 花生种子花生种子 梨梨 甜菜的块根甜菜的块根 豆浆豆浆 鸡蛋清鸡蛋清 A、 B 、 C、 D、 CDDD6、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定中、实验中，以下操作错误的是、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定中、实验中，以下操作错误的是 （ ）A只有脂肪的鉴定需要使用显微镜只有脂肪的鉴定需要使用显微镜B用双缩脲试剂鉴定蛋白质有需要加热用双缩脲试剂鉴定蛋白质有需要加热C使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用D可溶性还原糖的鉴定，应用沸水浴加热产生砖红色沉淀可溶性还原糖的鉴定，应用沸水浴加热产生砖红色沉淀7用显微镜观察时，如果由低倍镜换高倍镜后，视野的变化是（用显微镜观察时，如果由低倍镜换高倍镜后，视野的变化是（ ）。）。A由暗变亮，观察到的细胞小由暗变亮，观察到的细胞小 B由亮变暗，观察到的细胞大由亮变暗，观察到的细胞大C由暗变亮，观察到的细胞多由暗变亮，观察到的细胞多 D由亮变暗，观察到的细胞多由亮变暗，观察到的细胞多5将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量水混合，装入一容器内，调整将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量水混合，装入一容器内，调整PH至至 20，保存于，保存于37的水浴锅内，过一段时间后，容器内剩余的物质是（的水浴锅内，过一段时间后，容器内剩余的物质是（ ）。）。 A淀粉、胃蛋白酶、多肽、水淀粉、胃蛋白酶、多肽、水 B唾液淀粉酶、麦芽糖酶、胃蛋白酶、多肽、水唾液淀粉酶、麦芽糖酶、胃蛋白酶、多肽、水 C唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水 D唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水ABBA和和CC淀粉酶在淀粉酶在40时活性相对较高，淀粉酶催化淀粉水解产生的还原糖多时活性相对较高，淀粉酶催化淀粉水解产生的还原糖多E酶失活酶失活剩余的淀粉遇碘变蓝剩余的淀粉遇碘变蓝答：在答：在20和和100之间每隔一定温度设置一个实验组，其它实验条件保持一致。之间每隔一定温度设置一个实验组，其它实验条件保持一致。以反应液和上述试剂（或答碘液或答班氏试剂或答斐林试剂）发生颜色反应的程度以反应液和上述试剂（或答碘液或答班氏试剂或答斐林试剂）发生颜色反应的程度为指标确定最适温度。为指标确定最适温度。8、将某种玉米子粒浸种发芽后研磨匀浆、过滤，得到提取液。取、将某种玉米子粒浸种发芽后研磨匀浆、过滤，得到提取液。取6支试管分别加入等量的淀支试管分别加入等量的淀粉溶液后，分为粉溶液后，分为3组并分别调整到不同温度，如图所示，然后在每支试管中加入等量的玉米组并分别调整到不同温度，如图所示，然后在每支试管中加入等量的玉米子粒提取液，保持各组温度子粒提取液，保持各组温度30分钟后，继续进行实验（提取液中还原性物质忽略不）：分钟后，继续进行实验（提取液中还原性物质忽略不）：（1）若向）若向A、C、E三支试管中分别加入适量的班氏试剂或斐林试剂，沸水浴一段时间，观三支试管中分别加入适量的班氏试剂或斐林试剂，沸水浴一段时间，观察该三支试管，其中液体颜色呈砖红色的试管是察该三支试管，其中液体颜色呈砖红色的试管是_；砖红色较深的试管是；砖红色较深的试管是_，颜，颜色较深的原因是色较深的原因是_ _；不变；不变色的试管是色的试管是_，不变色的原因是，不变色的原因是_。（2）若向）若向B、D、F三支试管中分别加入等量的碘液，观察三支试管，发现液体的颜色是蓝三支试管中分别加入等量的碘液，观察三支试管，发现液体的颜色是蓝色，产生该颜色的原因是色，产生该颜色的原因是_。（3）以上实验的三种处理温度不一定是玉米子粒提取液促使淀粉分解的最适温度。你怎样）以上实验的三种处理温度不一定是玉米子粒提取液促使淀粉分解的最适温度。你怎样设计实验才能确定最适温度？（只要求写出设计思路）设计实验才能确定最适温度？（只要求写出设计思路） A B C D E F 甲组（2 0 ）乙组（4 0 ）丙组（1 0 0 ）