组织学和胚胎学.ppt
组织学和胚胎学 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life, there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、一、组织学研究内容和意义组织学研究内容和意义1 、组织学研究内容组织学研究内容细胞：细胞：是人体的形态结构、生理功能、是人体的形态结构、生理功能、 和生长发育的基本单位。和生长发育的基本单位。组织：组织：细胞群细胞外基质细胞群细胞外基质(extracellular matrix)(extracellular matrix) 四大基本组织四大基本组织(basic tissue)(basic tissue) 上皮组织上皮组织(epithelial tissue)(epithelial tissue) 结缔组织结缔组织(connective tissue)(connective tissue) 肌肌 组组 织织(muscular tissue)(muscular tissue) 神经组织神经组织(nerve tissue) (nerve tissue) v器官器官:各种基本组织按一定的规律有机地结合在一起各种基本组织按一定的规律有机地结合在一起,具有一定的形态结构。具有一定的形态结构。v系统系统:功能相关的器官组成系统功能相关的器官组成系统,完成连续的生理过完成连续的生理过程程.2.组织胚胎学与其他学科间的关系组织胚胎学与其他学科间的关系v生理学生理学v病理学病理学v妇产科学妇产科学v外科学外科学v从哲学角度看：洞察人体自身的微观世界，从哲学角度看：洞察人体自身的微观世界，其完美、巧妙、精细、丰富，令人叹为观止，其完美、巧妙、精细、丰富，令人叹为观止，能极大满足我们求职和视觉欣赏欲望能极大满足我们求职和视觉欣赏欲望v显微镜的发明于显微镜的发明于1616世纪末的荷兰。世纪末的荷兰。v16651665年年HookeHooke提出提出“细胞细胞”，开创了，开创了用显微镜研究生物构造的先河。用显微镜研究生物构造的先河。 透射电子显微镜透射电子显微镜(Electron Microscope EM)(Electron Microscope EM) 最大分辩率为最大分辩率为0.2nm. 0.2nm. 显微镜观察常用的长度计量单位显微镜观察常用的长度计量单位 1 1微米微米( (micrometermicrometer mm )=1/1000 )=1/1000毫米毫米(mm)(mm) 1 1纳米纳米( (nanometernanometer nmnm)=1/1000)=1/1000微米微米(m)(m) 光学显微镜光学显微镜(Light Microscope(Light Microscope) )最大分辨率最大分辨率为为0.2m .0.2m . 甲醛甲醛 酒精酒精复合固定剂复合固定剂酒精酒精石蜡石蜡5-10m5-10mHEHE特殊染色特殊染色 常用常用HEHE染色染色苏木精苏木精(hematoxylin):(hematoxylin): 染细胞核及细胞质内核糖体染细胞核及细胞质内核糖体 成紫兰色。成紫兰色。伊伊 红红(eosin):(eosin): 染细胞质及胶原纤维成粉红色染细胞质及胶原纤维成粉红色染色Silver stainingSilver staining2、其他组织切片的制作方法、其他组织切片的制作方法v冰冻切片：冰冻切片：: :可保存蛋白质的结构和性质可保存蛋白质的结构和性质取材取材速冻速冻冰冻切片冰冻切片染色染色封固封固v铺片：疏松铺片：疏松CTCT或肠系膜等或肠系膜等v涂片：涂片：体液标本：如血液、精液、脑脊液等体液标本：如血液、精液、脑脊液等v磨片：磨片：如牙、骨等坚硬组织可磨成薄片如牙、骨等坚硬组织可磨成薄片骨磨片骨磨片bone ground sectionsilver stain血涂片血涂片blood smearWright staining 铺铺 片片Stretched preparation特殊显微镜特殊显微镜（1 1）荧光显微镜）荧光显微镜: :(fluorescence icroscope(fluorescence icroscope）紫外线为光源，紫外光激发标本中的紫外线为光源，紫外光激发标本中的荧光物质产生各种颜色的荧光荧光物质产生各种颜色的荧光（2 2）相差显微镜）相差显微镜(phase contrast microscope)(phase contrast microscope)观察体外培养的活细胞形态结构观察体外培养的活细胞形态结构光光细胞内不同折射率结构时细胞内不同折射率结构时, , 速度和方向发生速度和方向发生变化变化特殊物镜转化为光密度差异特殊物镜转化为光密度差异. .普通光镜图像相差显微镜图像（3 3）激光共聚焦显微镜）激光共聚焦显微镜: : ( (Confocal laser scanning microscope)组成组成: :激光光源激光光源 共聚焦扫描系统共聚焦扫描系统电子光学系统电子光学系统 计算机图象分析计算机图象分析系统系统. .对细胞非侵入式对细胞非侵入式光学断层扫描成光学断层扫描成像像 ( (二维或三维二维或三维分析分析).).Practical arrangement of a confocal microscope. Light from a laser source hits the specimen and is reflected. A beam splitter directs the reflected light to a pinhole and a detector. 1932 1932年年Ruska;KnollRuska;Knoll发明了电子显微镜发明了电子显微镜（electron microscope)electron microscope)，使观察工具的分辨率，使观察工具的分辨率由由0.20.2m m提高到提高到0.2nm.0.2nm.戊二醛、戊二醛、 树脂包埋树脂包埋 超薄切片超薄切片 醋酸铀醋酸铀锇酸双重固定锇酸双重固定 （505080nm 80nm 厚）厚） 柠檬酸铅柠檬酸铅( (二二) )电子显微镜术电子显微镜术电镜图透射电镜图，浆细胞透射电镜图，浆细胞电镜扫描图扫描电镜扫描电镜图图，血细胞，血细胞( (三三) )组织化学组织化学(histochemistry) (histochemistry) 与细胞化学与细胞化学(cytochemistry)(cytochemistry) 组织化学术组织化学术：应用化学、物理、生物化学、应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术与组织免疫学或分子生物学的原理和技术与组织学技术相结合而产生的技术，能在组织切学技术相结合而产生的技术，能在组织切片片定位、定性、定量地显示定位、定性、定量地显示某种物质的存某种物质的存在与否、以及分布状况。在与否、以及分布状况。 细胞化学术细胞化学术：应用于游离细胞的样品：应用于游离细胞的样品。 1. 1.一般组织化学一般组织化学例：显示糖原或蛋白多糖的例：显示糖原或蛋白多糖的 过碘酸过碘酸-雪夫氏反应雪夫氏反应( (PASPAS反应反应) ) （periodic acid Schiff reaction)periodic acid Schiff reaction) 多多 糖糖 + HIO+ HIO44多醛多醛 + Shiff+ Shiff试剂试剂 （乙二醇基（乙二醇基) ) ( (乙二醛基）乙二醛基） 紫红色沉淀物紫红色沉淀物 PAS猫小肠上皮的猫小肠上皮的PAS PAS 染色染色(immunocytochemistry(immunocytochemistry）定义:利用抗原与抗体特异性结合的原理,检测细胞内蛋白质及膜表面受体、抗原等大分子物质的存在和分布。组织切片 标记了的抗体 2. 2.免疫组织化学免疫组织化学抗原抗体复合物抗原抗体复合物抗原抗原( (六六) )细胞培养术及组织工程细胞培养术及组织工程细胞培养细胞培养（cell cultrue)cell cultrue)是把从机体取的得的细胞是把从机体取的得的细胞在体外模拟体内的条件下在体外模拟体内的条件下进行培养的技术进行培养的技术（in vitro).in vitro).组织工程（组织工程（tissue engineeringtissue engineering） 利用细胞培养术在体外模拟构建机体组利用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。织或器官的技术。二二. .组织学的学习方法组织学的学习方法v加强结构与功能结合加强结构与功能结合v加强理论与实践的结合加强理论与实践的结合v建立断面与立体的关系建立断面与立体的关系v注意勤奋学习与技巧注意勤奋学习与技巧
