医疗卫生机构消毒灭菌效果监测.ppt

医疗卫生机构消毒/灭菌效果监测麦麦 苗苗2006年8月2一、监测依据2006年8月3l监测的目的是为了控制感染。揭示医院感染的发生、发展规律及医院感染管理的现状，为控制医院感染提供依据、方向和途径。l不以控制为目的监测是无意义的监测，不以监测为依据的控制是盲目的控制。2006年8月4l医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一，消毒效果的监测是评价其消毒设备、消毒药剂、消毒方法、消毒效果是否达标的唯一手段。2006年8月5l监测人员需经过专业培训。l掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具备熟练的检验技能。l选择合理的采样时间。l遵循严格的无菌操作。医院消毒效果监测时需遵循以下原则：2006年8月6医院消毒/灭菌效果监测相关的法律法规、规范、标准和规定：1.中华人民共和国传染病防治法2.中华人民共和国传染病防治法实施办法3.医疗机构管理条例4.医疗机构管理条例实施细则5.消毒管理办法2006年8月76.医院感染管理规范（试行） old 7. 医院感染管理办法（2006）new8.消毒技术规范9.医院消毒卫生标准10.消毒与灭菌效果的评价方法与标准11.医院消毒供应室验收标准（试行） 12.内镜清洁消毒技术操作规范（2004）13.医疗机构口腔诊疗器械消毒技术操作规范 二、监测要点2006年8月9w监测频率:年度综合性监测每年至少一次w监测内容: 1.医院感染病例监测（医院感染发病率、医院感染罹患率 、漏报率） 2.对医院内部日常监测检查（规章制度、报告、检验单、学习培训等）2006年8月103. 消毒/灭菌效果监测消毒/灭菌物品监测：消毒物品不得检出致病性微生物，灭菌物品不得检出任何微生物。使用中的消毒剂/灭菌剂：进行生物和化学监测。压力蒸汽灭菌器：进行工艺监测、化学监测和生物监测。紫外线消毒：紫外灯管照射强度监测。血液净化系统：透析入口液、透析出口液监测。2006年8月114. 环境卫生学监测: 重点部门（对手术室、重症监护病房/室（ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌间、治疗室、换药室等）w空气消毒效果的监测w物体表面消毒效果的监测w医护人员手消毒效果的监测三、监测采样 2006年8月13空气采样:l采样时间:消毒处理后与进行医疗活动之前这段时间内采样。l布点方法： 高度：与地面垂直高度150cm布点数：室内面积30m2，取室内一条对角线上的3点（中心一点，两端各距墙1m两点）；室内面积 30m2，取五点（中心一点，东、西、南、北均距墙1m的四点）2006年8月14l采样方法：采样方法：一般用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。l注意事项：注意事项： 采样平板直径不同，以后计算公式代入值不同。平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条。采样前，不要有人员在室内走动，关闭门窗，至少静态10分钟以后再采。工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。2006年8月152006年8月16物体表面采样：l采样时间：消毒处理后4小时内进行采样。l采样面积：被采表面 100cm2,取全部表面；被采表面 100cm2,取100cm2。2006年8月17l采样方法：用5cm5cm的标准灭菌规格版，放在被检物体表面，用浸有无菌采样液的棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，去掉手接触部分，将棉拭子放入10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。2006年8月185cm横竖来回各五次2006年8月19l注意事项：规格板要干热法灭菌处理。不规则物体表面的采样，尽量准确估算实际面积。2006年8月202006年8月21医护人员手采样l采样时间：消毒后从事诊疗操作前进行采样。l采样方法：被检人五指并拢，手心向上。将浸有采样液的棉拭子从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积按30cm2计算），并随之转动采样棉拭子，去掉手接触部位，装入试管内送检。2006年8月22l注意事项：不同的洗手法，标准要求不同。双手都要采样。洗手后不要接触未消毒的物品。用消毒巾擦干，或控干手上的水分。2006年8月23医疗用品采样l采样时间 在消毒/灭菌处理后，存放有效期内采样。l采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液器按无菌检查法执行。不能用破坏性方法取样的医疗用品，用浸有采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面100cm2, 取全部表面；被采表面100cm2,取100cm2。2006年8月24l注意事项灭菌物品采样有环境要求。接触皮肤和黏膜的医疗用品，消毒标准要求不同。2006年8月25内窥镜采样l消毒后内窥镜的采样方法：内窥镜（如胃镜、肠镜）内腔面：用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。内窥镜外表面：按医疗用品表面方法采样，从活检出口向上计算面积，采集100cm2。2006年8月26从活检出口接从内镜活检孔口注入2006年8月27血液透析系统采样l标本采集： 单一透析系统：采样点为透析液进口及出口，消毒后用无菌试管接原液10ml即可。疑有透析液污染或严重感染病例时，应增加采样点，如：原水口、软化水出口、反渗水出口、透析液配液口。 l监测时间：每月一次。 检查结果超过参考标准时，须再复查。怀疑或确定病人在治疗中有热原反应或菌血症时，应随时检测。2006年8月28消毒/灭菌剂采样l采样时间:正在使用中的消毒/灭菌剂。l采样方法：用10ml无菌试管吸取一定量消毒剂，注入干燥无菌试管，待检。l监测频率：含氯消毒剂、过氧乙酸等每日监测一次 2%戊二醛每周一次（重点科室每日监测）采样中常用溶液2006年8月30中和剂的选择中和剂是中和残留消毒剂的药物，其作用是正确测定化学消毒剂的杀菌能力，防止消毒后残余消毒剂继续和微生物作用。中和剂的使用是要经过鉴定筛选的。 理想中的中和剂标准是：能有效中和相应的消毒剂及其对细菌有害的产物。中和剂本身及其反应物对细菌无害。中和剂与消毒剂无协同作用。对培养基中的营养成分无破坏作用，不形成对细菌有害的副产物，并且不影响培养基的透明度。 2006年8月31先将消毒剂1.0mL与中和剂溶液9.0mL混合，制成中和产物溶液。对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3（W/V）吐温80和0.3卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3（W/V）吐温80。以中和被检样液的残效作用。 2006年8月32w无水磷酸氢二钠 2.83gw磷酸二氢钾 1.36gw蒸馏水加至 1000mlw将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调 pH 至 7.27.4，于 121 压力蒸汽灭菌 20min备用。磷酸盐缓冲液 （PBS，0.03mol/L，pH7.2）2006年8月33无菌检验用洗脱液w吐温-80 1g w蛋白胨 10g w氯化钠 8.5g w蒸馏水 1000mlw将各成分加入到 1000ml 0.03mol/L PBS液中，加热溶解后调pH至 7.27.4，于121 压力蒸汽灭菌20min备用。2006年8月34营养肉汤培养基w蛋白胨 10g w牛肉膏 5g w氯化钠 5g w蒸馏水 1000mlw将各成分溶解于蒸馏水中，调 pH 至 7.27.4，分装，于 121 压力蒸汽灭菌 20min备用。2006年8月35压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌效果监测是一组综合监测，包括工艺监测、化学监测、生物监测。2006年8月36工艺监测w工艺监测：应每锅监测，并详细记录（锅号、压力、温度、时间、灭菌物品、灭菌操作者签名等项）。 2006年8月37化学监测u监测原理化学指示剂是将某些热敏物质与辅料配制成印墨印制在特殊纸上制作而成。印墨的印记在饱和压力蒸汽下规定的温度、作用时间下，色块颜色变成标准色（多为黑色或灰黑色），间接指示压力蒸汽灭菌基本条件得到满足，表示灭菌合格。色块变色标准的设计是根据生物指示剂芽孢的耐热参数制定而成。下排气压力蒸汽灭菌化学指示卡在121饱和蒸汽下作用20min,变至标准色；预真空压力蒸汽灭菌化学指示卡在132饱和蒸汽下作用3min，变至标准色。 2006年8月38u冷空气测试图（又称B-D试纸），用于监测预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器内是否残留冷空气，冷空气是否排除。在灭菌之前测试，不指示灭菌合格与否。u监测时间：于新灭菌柜安装调试之后或灭菌器维修之后；用于每天灭菌器使用之前。2006年8月39u操作方法：准备标准测试包将1张B-D试纸放于包的中层，包好放于灭菌器底部靠前端；按照正常灭菌程序运行，测试结束，取出B-D试纸观察色条颜色变化。l结果判定：若为均匀一致变色即说明排除冷空气性能良好；反之若变色不均匀，有浅颜色区说明灭菌器内存在冷空气团。2006年8月40u适用范围121压力蒸汽灭菌化学指示卡：专用于下排气式压力蒸汽灭菌效果监测。132压力蒸汽灭菌化学指示卡：专用于预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌效果监测。化学指示卡监测法：包内中央部位。每包监测。 压力蒸汽灭菌指示胶带：用于贴封灭菌包，指示该物品包是否经过灭菌处理，作为灭菌标识物而不表示灭菌是否合格。化学指示胶带监测法：包外。每包监测。 2006年8月41u使用方法和结果判断化学指示卡和指示胶带作为日常监测使用。领取灭菌包时首先查验指示胶带是否变色，变成黑色即表示此包经过灭菌处理。化学指示卡作为灭菌指示剂放于灭菌包中心，勿将指示卡色块与金属物品和玻璃直接接触，以免被冷凝水浸湿，影响变色。在使用灭菌包时打开包首先观察化学指示卡色块变色情况，变色达到标准色块表示可以使用，否则更换并查找原因。2006年8月42u注意事项选用合格指示剂，必须选用国家批准的有效期内的卫消准字号卫生许可证产品。合理使用指示器材，指示器材不可相互代替，严格按照指示的用途使用。正确分析检测结果，当发现指示器材变色不合格时，要认真分析原因，切不可随便下结论；灭菌处理后指示色块出现花白点并有水浸湿痕，可能是被冷凝水或蒸气含水量过高浸湿，若色块均匀变浅未达到标准色则可能为其他因素致灭菌失败。2006年8月43生物监测生物监测是指用标准菌株（国际标准菌株为嗜热脂肪杆菌芽孢）制成的干燥菌片或由菌片和培养基组成的管即生物指示剂进行的监测。通过生物指示剂是否全部被杀灭来判断灭菌物品包内各种微生物是否完全被杀灭。生物监测是判断灭菌效果的直接指标，属于裁定性监测。2006年8月44u生物指示剂使用方法在压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包标准试验包（下排气式） 3件平纹长袖手术衣 4块小手术巾 2块中手术巾 1块大手术巾 30块10108层纱布敷料 包大小为3030252006年8月45标准测试包（预真空和脉动预真空式）16条4166大小全棉手术巾每条长边折成3层，短边折成2层，叠放。包的大小为2323152006年8月46手提式压力灭菌器用通气贮物盒（22136）代替。盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。2006年8月47干热灭菌效果监测 适用于耐高温诊疗用品、油脂、粉末、玻璃、金属制品常用160 2h。l化学检测法：用既能指示温度又能指示时间化学指示剂。观测颜色和性状的改变。l物理检测法：热电偶温度检测仪。l生物监测法：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372）株。361培养48小时。2006年8月48环氧乙烷灭菌效果监测l化学检测法：环氧乙烷化学指示剂。l仪器监测法：测定EO气体浓度（气相色谱或红外分析）。l生物监测法：枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372）株，每月一次。根据柜内容积放置菌片，柜容积5m3，至少放置10片；5m310m3，每增加1m3，增加1个菌片；10m3，每增加2m3，增加1个菌片。2006年8月49紫外线消毒效果监测l紫外线辐照计测定法：开灯 5min 后，将测定波长为 253.7nm 的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离 1m 的中央处，待仪表稳定后，读取紫外线灯管的辐照度值。l紫外线强度指示卡监测法：开启紫外线灯5min后，将指示卡置紫外灯下垂直距离1m处，有图案一面朝上，照射1min（紫外线照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。2006年8月50l生物监测法：同空气消毒和表面消毒效果检测方法l结果判断： 普通30W直管型紫外灯， 新灯辐照强度90uW/cm2， 使用中灯管辐照强度70uW/cm2， 高强度灯管辐照强度180uW/cm2为合格。2006年8月51注意事项： 测定时电压 220VV，温度 2025，相对湿度60，紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用(要求一年校准一次)指示卡应获得卫生许可批件，并在有效期内使用。放于灯管中央部位，仪器探头与拉杆保持垂直。1米2006年8月52监测样品送检时间 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6小时,若样品保存于0-4条件时,送检时间不得超过24小时。四、检验及结果评价2006年8月54空气消毒效果l检验：细菌总数：将琼脂平板，置于361温箱培养 48h，计数细菌菌落数。致病菌检验金黄色葡萄球菌：溶血性链球菌： 2006年8月55l检验结果计算方法：A为平板面积（cm2）T为平板暴露时间（min）：5minN为平均菌落数（cfu）9cm直径的平皿 计算常数为157TAN50000)(cfu/m3细菌总数2006年8月56结果判定类区域空气： 细菌总数10cfu/m3 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）类区域空气： 细菌总数200cfu/m3 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌） 类区域空气： 细菌总数500cfu/m3 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）2006年8月57无菌检验无菌检验是指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适合于无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。2006年8月58无菌检验前准备 l洗脱液与培养基无菌性试验:无菌试验前 3d，于需-厌养培养基与霉菌培养基内各接种 1ml 洗脱液，分别置 3035与 2025培养 72h，应无菌生长。l阳性对照管菌液制备: 金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 生孢梭菌CMCC(B)64941 白色念珠菌CMCC（F）980012006年8月59无菌操作l小件医疗器械(缝合针、针头、刀片等)取5件直接浸入 6 管需-厌氧培养管(其中一管作阳性对照)与 4 管霉菌培养管。 培养基用量为 15ml/管。l大件医疗器械(手术钳、镊子等)取 2 件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入 5ml 无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需-厌氧培养管与霉菌培养基。 接种量为 1ml/管，培养基用量为 15ml/管。2006年8月60培 养l在待检样品的需-厌氧培养管中，接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液 1:1000 稀释 1ml。l将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于 3035培养 5d，霉菌培养管与阴性对照管于 2025培养 7d。l培养期间逐日检查是否有菌生长，如培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观上判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养 48h72h 后，观察是否再现混浊或在斜面上有无菌落生长，并在转种的同时，取培养液少量，涂片染色，用显微镜观察是否有菌生长。2006年8月61结果判定l灭菌合格：阳性对照在 24h 内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长。如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长。l灭菌不合格：如需-厌氧菌及霉菌培养管中（除阳性对照外）任何1管显混浊并证实有菌生长。2006年8月62注意事项送检时间不得超过 6h，若样品保存于 04，则不得超过24h。被采样本表面积100cm2取全部表面；被采样本表面积100cm2，取 100cm2。若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。2006年8月63无菌保持液l检验方法： 吸取被检样液1.0ml加入9.0ml中和剂混匀，取1.0ml接种15ml需-厌氧菌培养管（6管，其中1管为阳性对照）3035培养5d，霉菌培养管（共4管，其中1管作为阳性对照）与阴性对照管于2025培养7d。l结果判定： 同无菌检出,为合格。2006年8月64l生物学监测检验:灭菌处理之后将灭菌包在无菌室内取出菌片接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 ，于56条件下培养24h观察初步结果，连续培养7d观察最终结果；生物指示剂菌管可以在现场或实验室内 取出挤碎管内安瓿让培养液浸透菌片，置于56条件下培养48h观察结果。压力蒸汽灭菌器2006年8月65l结果判定：溴甲酚紫蛋白胨水培养基可因细菌生长繁殖而使其pH值发生改变从而使溴甲酚紫指示剂颜色发黄。所以，当培养液颜色变黄时即表示有菌生长为阳性，判定为灭菌不合格；若培养后培养液仍为紫色者表示无菌生长为阴性，判定为灭菌合格。2006年8月66 注意事项:u使用菌片进行监测首先要注意无菌操作;自制培养基注意配方标准、pH适当、灭菌合格。u培养温度必须满足：嗜热脂肪杆菌最适合生长温度为55-65范围，容易出现的问题经常是培养温度不够，生长不好，甚至阳性对照亦不变颜色。判断结果注意仔细观察，有时培养管刚从培养箱内取出呈灰色，不易观察，可以待其冷却时再观察。u监测频率：生物监测每月至少进行1次。2006年8月67 医院器械按使用时发生交叉感染的危险程度，分为三个消毒等级: 严格：进入正常无菌组织或血管系统的器械。要求无菌。如腹腔镜。 半严格：主要指与完整的粘膜接触而一般不穿透无菌组织的器械。如上消化道内窥镜至少应该接受高水平消毒。 不严格：通常不接触患者或仅接触完整皮肤。如听诊器。医疗用品2006年8月68l医疗用品卫生标准： 进入无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜：无菌。接触黏膜：细菌总数20cfu/g或100cm2；接触皮肤：细菌总数200cfu/g或100cm2；*气管镜、胃镜、肠镜要求达到高水平消毒。*腹腔镜、脑室内窥镜、关节镜要求无菌。2006年8月69内窥镜l菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml， 加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45-48营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35培养48小时后计数。l致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml分别接种9cm血平皿、中国兰平皿和SS平皿，均匀涂布，35培养48小时，观察有无致病菌生长。2006年8月70l内窥镜内腔面：细菌菌落总数（cfu/镜）=平均平板菌落数20l内窥镜镜身 ：22cm)(cfu/cm采样面积稀释倍数平均平板上菌落数细菌总数内镜检验结果计算2006年8月71内镜结果判定l消毒后的内镜应当每季度进行生物学监测并做好监测记录。l灭菌后的内镜应当每月进行生物学监测并做好监测记录。l消毒后的内镜合格标准为：细菌总数20cfu/件，不能检出致病菌；l灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。2006年8月72血液透析系统l菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml， 加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45-48营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35培养48小时后计数。l致病菌检验:金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌2006年8月73l结果计算：细菌菌落总数（cfu/ml）=平均平板菌落数2l结果判定： 透析入口液，细菌总数200cfu/ml。 透析出口液，细菌总数2000cfu/ml。2006年8月74手和皮肤黏膜消毒效果l细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打 80 次。用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的 45的营养琼脂 15ml18ml，边倾注边摇匀。待琼脂凝固，置 361温箱培养 48h，计数菌落数。2006年8月75l致病菌检测：l注意事项:将样品在用电动混合器混合20s或在手掌上用力振敲 80 次。取液时要准确，尽量减少吸管使用中产生的误差。 倾注时琼脂培养基温度不得超过48，以防损伤细菌。倾注和摇动时，动作应尽量平稳，以利细菌分散均匀，便于计数菌落。不要使培养基外溢。将平皿盖好，即刻轻轻摇动混匀，平放于台上。待琼脂凝固后，置36温箱内培养。 2006年8月76l采样结果计算方法：手面积：60cm2稀释倍数:10倍22cm)(cfu/cm采样面积稀释倍数平均平板上菌落数细菌总数2006年8月77结果判定、类区域工作人员： 细菌总数5cfu/cm2 不得检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌类区域工作人员 细菌总数10cfu/cm2 不得检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌类区域工作人员 细菌总数15cfu/cm2 不得检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员不得检出沙门氏菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌2006年8月78物品和环境表面消毒效果 l细菌总数检测:检测方法同手执行。l小型物体表面的结果计算，用 cfu/件表示。l致病菌检测: l采样结果计算方法：物表面积：100cm2稀释倍数: 10倍22cm)(cfu/cm采样面积稀释倍数平均平板上菌落数细菌总数2006年8月79结果判定、类区域物表： 细菌总数5cfu/cm2 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）类区域物表： 细菌总数10cfu/cm2 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）类区域物表： 细菌总数15cfu/cm2 不得检出致病菌（金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌2006年8月80消毒/灭菌剂浓度测定l消毒剂浓度监测浓度测试纸(卡)法：用相应消毒剂浓度测试纸(卡)进行现场测试。 2%戊二醛：用3M1.8%戊二醛浓度测试卡。 含氯消毒剂、过氧乙酸、二氧化氯：G-1型消毒浓度试纸。化学滴定法：含氯消毒剂有效氯含量，戊二醛含量，过氧乙酸含量及二氧化氯含量测定方法参照医院消毒技术规范20.8规定方法执行。2006年8月81消毒液染菌量测定l涂抹法:用无菌吸管吸取消毒液 1.0ml，加入 9.0ml 含有相应中和剂的采样管内混匀。用无菌吸管吸取上述溶液 0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做2个。一平板置 20 培养 7d，观察霉菌生长情况，另一个平板置35温箱培养 72h记数菌落数，同时检测致病菌。l结果计算：消毒液染菌量(cfu/ml)每个平板上的菌落数502006年8月82l倾注法：用无菌吸管吸取消毒液 1.0ml，加入到 9.0ml 含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀。分别取 0.5ml 放入 2 只灭菌平皿内，加入已熔化的 4548 的营养琼脂 15ml18ml，边倾注边摇匀。待琼脂凝固，一平板置 20培养 7d，观察霉菌生长情况;另一个平板置361培养 72h，计数菌落数，同时检测致病菌。l结果计算： 消毒液染菌量(cfu/ml)每个平板上的菌落数202006年8月83l结果判断: 消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。2006年8月84检测结果为“0”时报告方式 l内镜内腔面：平板菌落数为“0”，细菌菌落总数应报告为10cfu/镜。2006年8月850.5cfu/0.5cfu/平板细菌菌落总数（cfu/镜）=平均平板菌落数20计算所得细菌菌落总数为10cfu/镜2006年8月86l内窥镜镜身：平板菌落数为“0”，细菌菌落总数应报告为5cfu/100cm2或镜（样液作10倍稀释） 例：采样面积100cm2，平行的两个平板每个平板接种1ml样液，经培养后，若两个平板只有一个平板生长1个菌落（平均1ml样液检出0.5个菌），两个平板平均菌落数为0.5cfu/平板，代人公式计算所得细菌菌落总数为5cfu/100cm2。因此，当平板菌落数为“0”时，细菌菌落总数应报告为5cfu/100cm2。2006年8月87l透析液： 平板菌落数为“0”，细菌菌落总数应报告为1cfu/ml。（样液未作稀释）同胃镜 注：当平板菌落数不为“0”时，细菌菌落总数报告方式，应通过该公式进行计算所得数据作为报告依据。2006年8月88其它检测结果为“0”时报告方式l空气：细菌菌落总数应报告为1cfu/m3。l物体表面应报告为1cfu/cm2。l医护人员手应报告为1cfu/cm2。l消毒液染菌量应报告为20cfu/ml。2006年8月89参考公共场所卫生标准检验方法细菌总数报告要求：10以内，按实有数值报告；10 检验值 100，采用二位有效数字，二位有效数字后面的数值，四舍五入。检验值100，以10的指数来表示。2006年8月90欢迎有问题互相探讨，联系方式：wEmail:LJGDC2006年8月91