微生物检验实验室气单胞菌属检验标准操作规程.doc

微生物检验实验室气单胞菌属检验标准操作规程1概述气单胞菌属包括嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌等，临床上嗜水气单胞菌最为常见。2标本类型 血液、痰、粪便等标本。3鉴定3.1形态与染色 革兰阴性杆菌。3.2培养特性 在血琼脂平板上35培养1824小时，呈灰白色或淡灰色菌落，有狭窄的溶血环。在麦康凯琼脂上呈无色、半透明菌落。3.3生化反应 氧化酶试验阳性；发酵葡萄糖、蔗糖、L-阿拉伯糖，产酸产气，不发酵乳糖；TSI为K/A；七叶苷、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均阳性；O/129耐药。3.4鉴别要点3.4.1 本菌属特征 氧化酶试验阳性，发酵葡萄糖、L-阿拉伯糖等多种糖类，硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶试验阴性，O/129耐药。3.4.2 气单胞菌属种间鉴别见表5-42表5-42 气单胞菌属鉴别的关键性试验菌种VP赖氨酸精氨酸鸟氨酸蔗糖甘露醇头孢噻吩豚鼠气单胞菌-+-+R嗜水+-+R简氏+-+R舒VV+-S尺骨-+-V+R维罗纳气单胞菌温和变种 +-+S维罗纳气单胞菌维罗纳变种 +-+S注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11%89%菌株阳性，“S”为敏感，“R”为耐药。3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验 参见氧化酶试验标准操作规程3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4质控参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。5质量控制见质量管理程序6检验结果解释与分析大多数气单胞菌产生-内酰胺酶，对青霉素、氨苄西林、羧苄西林、替卡西林耐药，但对广谱的头孢菌素、氨基糖苷类、氯霉素、四环素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和喹诺酮类药物敏感。7临床意义气单胞菌为水中常居菌，可引起人类肠内感染和肠外感染，为引起夏季腹泻的常见病原菌。肠内感染主要表现为腹泻（水样便，严重出现痢疾样脓血便），肠外感染主要为菌血症、伤口感染、心内膜炎、脑膜炎等疾病。8鉴定流程仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验氧化酶试验阳性麦康凯平板菌落呈无色、半透明菌菌落粪便、痰等气单胞菌属参考文献 1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23；2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.20082 周庭银编著. 临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，20073 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，20064 MurrayPR.Manual O/F Clinical Mircrobilogy.9th ed.Washington:ASM Press,20075 ISO 15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007 （周庭银） 编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：