微生物检验实验室志贺菌属标准操作规程.doc

微生物检验实验室志贺菌属标准操作规程1.概述志贺菌属也是人类主要肠道病原菌之一。该菌属分为4个群（种）：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。其中福氏志贺菌为该菌属最为常见的志贺菌。2.标本类型粪便、肛拭子标本。3.鉴定3.1 形态染色 革兰阴性细小杆菌，大小为1um（24um）。无芽胞，无荚膜，无动力，无鞭毛，有菌毛。3.2 培养特性 在麦康凯琼脂平板上呈无色透明的小菌落；在SS琼脂平板上因不发酵乳糖而形成无色透明或半透明的较小菌落；在XLD琼脂平板上产生红色的菌落；在HE琼脂平板上菌落呈淡绿色。宋内志贺菌在麦康凯琼脂平板上可出现两种菌落，一种粉红色（迟发酵乳糖），另一种无色透明。3.3 生化反应 氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖；甲基红、硝酸盐还原试验阳性，动力、V-P、枸橼酸盐、H2S、醋酸盐试验均阴性。3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征 SS平板上无色菌落或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，尿素酶、H2S试验阴性。符合上述特性者，可通过血清凝集试验作出诊断。如血清不凝集，应进一步鉴别。3.4.2 志贺菌属各菌种的鉴别：见表5-40。表5-40 志贺菌属各菌种的生物学特性（阳性%）生化试验 痢疾志贺菌 福氏志贺菌 鲍氏志贺菌 宋内志贺菌ONPG 30 1 10 90鸟氨酸脱羧酶 0 0 2 98乳糖 0 1 1 2甘露醇 0 95 97 99海藻糖 90 65 85 100吲哚 45 50 25 0注：“2”为迟缓发酵（48h以上）。3.5操作步骤3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验参见 三糖铁标准操作构规程 。3.5.2 血清学鉴定 参见 志贺菌血清学检测标准操作规程 。3.5.3 从SS琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。4. 药敏参见 药物敏感性试验标准操作规程 及CLSI M100-S20最新版本文件。5.质量控制参见 质量管理程序 。6.检验结果解释与分析一般志贺菌不进入血液，所以只取粪便和肛拭子标本作培养。本菌大多数菌株对氯霉素、链霉素、氨苄西林耐药，多数菌株对卡那霉素、庆大霉素敏感。7.临床意义志贺菌属是肠杆菌科中引起人类感染性腹泻最常见的病原菌之一，主要引起人类细菌性痢疾，其中福氏和宋内志贺菌最为常见。菌痢主要有三种临床类型，即急性细性痢疾、慢性细菌性痢疾和携带者。典型的急性菌痢初期为水样便，数日后为脓血便，伴里急后重。8.鉴定流程粪便或肛拭增菌培养(GN肉汤)志贺菌属初步鉴定：TSI,KIA/MIU仪器或手工鉴定血清鉴定培养(SS、MAC)菌落观察：SS上无色、透明或半透明较小菌落参考文献 1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2008编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：