微生物检验实验室抗酸染色标准操作规程.doc

微生物检验实验室抗酸染色标准操作规程1目的规范抗酸染色标准操作规程。2原理抗酸菌具有耐受酸性介质脱色的生物状，此类细菌在石碳酸（苯酚）的协同作用下，被复红染色剂着色，能够耐受酸性酒精脱色，显微镜观察时保持紫色红色；而其他脱落细胞或标本中的非抗酸菌被酸性酒精脱色，可被复染剂亚甲蓝染为蓝色。3试剂3.1 Kinyoun溶液。碱性品红 40g 乙醇（95%） 200ml石碳酸 80ml 蒸馏水 1000ml3.2 Gabett溶液亚甲蓝 10g 无水酒精 300ml硫酸 200ml 蒸馏水 500ml4质控每天用龟分支杆菌ATCC93326做阳性对照，大肠埃希菌ATCC25922做阴性对照。5.操作步骤5.1 初染 涂片上滴加石碳酸复红液，用火焰加热至产生蒸汽，约5分钟，水洗。5.2 脱色 第二液脱色约1分钟，轻轻摇动玻片，无红色脱色或略呈粉红色时为止，水洗。5.4 复染 第三液复染30秒，水洗。自然干燥后镜检。6.结果判断抗酸杆菌呈红色。7.注意事项7.1 每张玻片只能涂一份标本，禁止将2份或2份以上的标本涂在同一张载玻片上。7.2 为防止交叉感染，标本应先高压灭菌后再涂片染色。7.3 在涂抹痰标本时，严禁对载玻片进行加热。7.4 菌龄为1824小时为佳。8.临床意义只针对用于结核病、麻风病等的细菌检查，初步诊断。9.安全防护措施9.1 操作人员要戴口罩、手套和穿隔离衣。9.2 涂片制备 痰标本要高压灭菌或者在标本中加入等量0.5%“84”消毒液（含有效氯2500mg/L）后涂片。气管刷片送检的玻片，紫外线灯下照射30分钟进行染色镜检。或者对于进行抗酸染色的痰标本（因使用的容器原因不能高压灭菌）。9.3 镜检后的玻片均浸泡在含有效氯1000mg/L的消毒液中，高压灭菌后处理。9.4 所有标本、污染物丢弃之前，都需经高压灭菌、焚烧或浸泡杀菌剂中。参考文献 1 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，20072 王钦升，周正明，高屹主编.实用医学培养基手册.北京：人民军医出版社，1999 （周庭银） 编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：