TPSA定量测定作业指导书.doc

TPSA定量测定作业指导书1. 原理本产品采用的是基于双抗体夹心法原理的酶促化学发光免疫分析方法.纯化的特异性鼠单克隆抗体预先包被在微孔板的表面,加入待测样本后，样本中的相应抗原与微孔板表面的特异性抗体相结合，同时也会和辣根过氧化物酶（HRP）标记的另一株特异性单克隆抗体相结合，这样在微孔板表面形成了特异性抗体-抗原-酶标抗体的免疫复合物，洗涤后加入发光底物，测定相对发光强度，与同事测定的标准曲线相比较，计算出样本中相应抗原的浓度。2. 标本采集：2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。2.2 标本种类：血清或血浆。2.3 标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。3. 标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8不超过72小时，-20可长期保存，避免反复冻融。4. 标本运输：室温运输。5. 标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。6. 试剂：6.1 试剂名称：T-PSA诊断试剂盒。6.2 试剂生产厂家：北京源德生物医学工程有限公司6.3 包装规格：96人份6.4 试剂盒组成：T-PSA诊断试剂。6.5 试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8条件，有效期12个月。7. 仪器设备：7.1 仪器名称：MPC-1型微孔板单光子计数仪7.2 仪器厂家：北京源德生物医学工程有限公司7.3 仪器型号：MPC-1型7.4 仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。8. 试剂准备8.1 使用前，试剂盒应平衡至室内温度（20-30，通常放置30分钟以上）。8.2 冻干后严格按要求量加入蒸馏水复溶，轻摇混匀，静置15-20分钟至其完全溶解。8.3 1袋固体洗涤剂荣誉500ml蒸馏水中，液体洗涤剂用纯化稀释20倍后使用。8.4 液体试剂使用前充分混匀。9. 操作步骤9.1 试验设计：根据校准品，指控品和样本数量拆取微孔板条，在板架上放好微孔板条。9.2 加样：每孔加入校准品，指控品或样本20ul，然后再一次加入100ul酶结合物。9.3 温育：盖好盖板膜，在振荡器上振荡30分钟，振荡时室内温度应于20-30之间。9.4 洗板：机洗或手洗。吸出或倒出反应液，加入洗涤液洗五次，洗涤液量每次每孔不少于300ul，末次洗板后将板拍干。9.5 检测：用加样器向每孔中分别加入A.B液各50ul，振荡片刻，避光放置5分钟，测定相对发光强度。10. 结果计算：推荐使用双对数回归方法处理数据。 11. 参考范围：测定例数百分位数（%）90939597993769（男性）2.133.054.576.3911.78 12. 临床意义：12.1 前列腺增生，急性细菌性前列腺炎等可引起T-PSA升高。12.2 前列腺癌患者T-PSA明显升高，比F-PSA升高更明显，F/T比值下降。13. 操作性能：Flexible Protocol TM Processing技术为免疫检测程序的最优化步骤，此技术被运用于样本处理，试剂处理，吸样处理和分析处理等整个检测过程中，检测程序各步骤被处理或完全独立的分析基元，不同的分析技术，步骤和过程可在同一台仪器上同时进行，使整个分析表现(如灵敏度，特异性，精密度，准确性等)达到最佳状态，同时使分析过程成为真正的随机连读分析步序，达到最快出结果的速度。14. 超出范围结果处理：检测样本中T-PSA值在50ng/ml范围内可直接报告，如结果大于50ng/ml，可做相应的稀释后重测。15. 方法局限性：检测样本不能溶血，脂血或黄疸血，不同批量试剂不能混用，必须使用原厂试剂。16. 当检验系统(仪器)不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统(仪器)不能工作时，可联系厂家代理商，进行紧急维修，如一时不能修好，如别实验室有同类仪器可到别的仪器上测试，如别的实验室无同类仪器，可改用其它方法进行检测(如酶联免疫法)。17. 参考文献：朗江明等临床免疫诊断学，2003.318. 其他：18.1 试剂只用于体外检测试剂。18.2 仪器必须严格按保养和维护进行。18.3 保持消耗品的清洁，消耗品必须在原包装条件下保存。18.4 样品中如有颗粒物质必须离心驱除，注意溶血，脂血或黄疸血的可能干扰，如是冷冻样品，融解后必须彻底混匀，避免样品反复冻融。18.5 只有人源样品可用于检测。18.6 所有废品应进行相应的处理后装在专用塑料袋中，丢弃在指定地点。