血清肌酐CREA测定.doc
血清肌酐CREA测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理 肌酸酶 肌酐+ H2 O 肌酸 肌酸酶 肌酐+ H2 O 肌氨酸+尿素 肌氨酸氧化酶 肌氨酸+O2+ H2 O 甘氨酸+甲醛+H2 O2 过氧化物酶 4-AAP+TOOS+ H2 O2 醌亚胺色素 注：TOOS：为N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺；4-AAP：为4-氨基安替比林 在上述反应中，醌亚胺色素的生成量与样本中的肌酐浓度成正比，通过在波长550nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中肌酐的浓度。3 标本采集 3.1 病人准备：早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。3.2 类型：血清，肝素血浆，尿液。3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：425保存可稳定7天；-20保存至少可稳定3个月。尿液的稳定性：2025保存可稳定2天；48保存可稳定6天；-20保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测，结果乘50后报告。3.4 标本运输 常温条件下运输3.5 标本拒收的标准：细菌污染的标本不能作测定。4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司CREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成：试剂1（R1） TOOS 0.2g/L 肌酸酶 40KU/L 肌氨酸氧化酶 10KU/L 抗坏血酸氧化酶 1KU/L 试剂2（R2） 4-氨基安替比林 0.2g/L 肌酐酶 350KU/L 过氧化物酶 2KU/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：在28避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。 试剂1与试剂2启用后，在210避光的条件下可稳定30天。4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的UREA校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以CREA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以umol/L报告。9 参考值范围 血清/血浆女性 4584umol/L男性 59104umol/L 我室参考值：女性 41-84 mmol/L 男性 41104umol/L10 临床意义肌酐是通过肾脏经由肾小球滤过作用排泄的废物。健康人血浆中肌酐的浓度相当稳定，与每天水的摄取量、活动和生成尿量无关。因此血浆肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即肾功能受损。肌酐清除率能较好地评估肾小球滤过率（GFR），通过它能较好地检出肾病和监视肾功能。为此，在规定的时间内同时收集血清和尿液，进行肌酐检测。肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄。在肾脏疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至肾脏实质性损害,血清肌酐值才增高。在正常肾血流条件下，肌酐值如升高至176353mol/L,提示为中度至严重的肾损害。所以,血肌酐测定对晚期肾脏病临床意义较大。11 操作性能11.1试剂空白吸光度（550nm、1cm光径、37）：0.10。 11.2线性范围：202000mol/L，线性相关系数（r）0.990。 11.3准确度：用相对偏差（RE%）表示测定结果的不准确度，相对偏差（RE%）10%。 11.4精密度：批内精密度：变异系数（CV%）5%；批间精密度：相对极差（%）10%。 11.5分析灵敏度：20mol/L。 11.6稳定性：试剂在28贮存12个月进行检验，各项检验结果应符合线性范围和准确度指标的要求。12 超出范围结果处理 本法对肌酐的检测范围为202000mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L的氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 当肌酐测定值>442mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。14 方法局限性14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。 14.2样本中胆红素浓度20mg/dL、抗坏血酸浓度50mg/dL、血红蛋白浓度500mg/dL、甘油三酯浓度1500mg/dL，对测定结果均无干扰。 15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献 16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版。16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。
