ATP快速检测作业指导.doc

Hygiena SystemSURE PlusTM ATP荧光仪作业指导1.目的：现场检测清洗消毒效果，以确保食品卫生的安全。2.适用范围：适用于对食品接触器具和生产环境、加工人员手的消毒效果检测以及对生产过程微生物污染水平的分析、检测和加工前清洁消毒的评价。3.ATP检测程序的建立：1.确定控制点和关键控制点ATP检测限定值的建立 2. 彻底清洁产品表面，重复两到三次以到达最佳清洁度Hygiena 为用户提供了参考限定值：合格<10RLU不合格<30RLU警惕10-30RLU间3.在每个控制点上进行 ATP 卫生监控检测，重复检测510次4.计算这些结果（RLU）数值的平均值和标准偏差（s.d）用户可根据自身情况和不同检测环节建立自己的限定值5.按以下方式设置限定值： Pass（合格） <= Mean RLU Caution （警惕） >= Mean RLU < Mean + 3 (s.d) Fail （不合格） >= Mean RLU + 3 (s.d) 6.设置检测频率与周期7.根据ATP快速检测结果制定纠偏措施3.1 确定控制点和关键控制点:需要检测的主要是食品接触的区域和难以清洗的区域。食品接触区域包括食品直接和间接接触的表面。l 食品直接接触区域指那些如有污染存在会直接污染产品的区域。l 食品间接接触区域指有冷凝物溅出、或有可能有灰尘或液体滴落或进入产品的区域。难清洗区域包括漏斗口、O环、管口以及表面不规则的区域、角落、沟槽和缝隙。a) 肉制品加工生产线食品直接接触区域控制点:（仅供参考）编号：检测项目：检测部位：1.注射机/搅拌机桶壁 、叶片、盘2.嫩化机/切片机桶壁、叶片3.滚揉机桶壁4.蒸煮桶/蒸箱/烟熏箱桶/箱壁5.压模盖机操作台面6.输送带带面b) 例图（不同项目检测区域）：传送带 水槽3.2 检测表面取样示例：a）规则表面规则表面用拭子头涂抹被测区域（30-45°角、10×10 CM表面）b）不规则表面不规则表面当不能取得10×10 CM表面积时，应该尽量涂抹足够的区域。3.3 Hygiena SystemSURE PlusTM荧光仪与UltrasnapTM拭子使用方式: 1. 使用UltrasnapTM 取样，用拭子头涂抹被测区域 （30-45°角、10×10 CM表面）2. 将涂抹完的拭子头插回管内3. 折断拭子头上端阀门，挤压两至三次，挤入反应液。4. 轻轻摇晃UltrasnapTM 拭子5秒钟。5. 将UltrasnapTM 拭子置入SystemSURE PlusTM荧光仪。（请在反应后1分钟内进行此步）6. 按OK键，15秒后测出反应结果。3.4 设置限定值:a) Hygiena推荐通用限定数值如果时间紧迫，需要立即建立ATP卫生监控程序，则Hygiena有一组推荐的通用限定数值。这些限定数值的设定是根据不同仪器设备、表面等的平板计数来确定的。（仅供参考）合格（Pass）不合格（Fail）警惕（Caution）检测结果（RLU）：10301030b)建立用户自己的限制值：l 标本应取自每次深层清洁后，肉眼看上去很干净的表面。l 重复检测5次，统计结果。范例1：l 以下为某检测表面5次清洁后检测结果数值：检测项目：输送带检测部位：带面编号：检测结果（RLU）：126229332419524l 首先计算这些结果（RLU）数值的平均值平均值为 （26+29+32+19+24）/ 5 = 26l 再计算这组数据的标准偏差（s.d） 公式为：标准偏差（s.d）的计算为 S = Sqr(xn-x平均值)2 /(n-1)= Sqr (26-26) 2+(29-26) 2+(32-26) 2+(19-26) 2+(24-26) 2 / (5-1)= Sqr (0+9+36+49+4) / (5-1)= Sqr 98 / (5-1)= Sqr 24.5= 4.95 （取整约等于5） 注备：Sqr 为开平方、 为求和、x为每个检测结果数值、 n为检测项目数量标准偏差（s.d）为一种量度数据分布的分散程度之标准，用以衡量数据值偏离算术平均值的程度。l 按以下方式设置限定值：结算公式结果合格（Pass） <= 平均值26不合格（Fail） >= 平均值 + 3倍的标准偏差(s.d)26+5*3=41警惕（Caution） >=平均值<平均值 + 3倍的标准偏差(s.d)2641 注备：如用户已有控制点菌落总数标准平板计数标准，可将ATP检测结果与之参照。但请注意ATP是来自于微生物或有机物残留，所以只能说ATP水平与微生物数目有着密切的相关性，ATP检测与平板计数结果间不能完全一一对应，但有密切的相关性。3.5 设置检测频率与周期a) 检测时机：1）ATP检测表面应为干燥表面。2）一般情况下，ATP检测应在使用消毒剂使用前进行。3）但部分CIP程序需在消毒剂使用后进行ATP检测，这种情况下，消毒剂的消毒接触时间为5分钟-15分钟。依照消毒使用规范，等待这段时间消毒剂干燥后，再进行表面取样检测。 注备：可通过高压蒸汽消毒配合ATP检测，可有效节省消毒剂的使用。b) 取样、检测频率：根据资金状况，选取适合的取样点数量，推荐以下策略：1）ATP检测应作为抽检和初筛手段。（结果可疑环节可进一步采样进行标准平板计数）2）检测方案（仅供参考）l 每座车间建立5-10个检测点。l 每个检测点每周抽检1-2次。l 定期将检出结果以图表形式进行总结和报告，为控制措施提供短期评价。l 提供季度或年度报告，对更长期数据进行分析。3.6 根据ATP快速检测结果制定纠偏措施检测结果结果判断检测值低于合格（Pass）值清洁合格检测值介于合格（Pass）值与不合格（Fail）值之间，需要警惕（Caution）下次清洁时应特别留意该区域清洁检测值高于不合格（Fail）值重新清洁3.7 ATP快速检测关键点控制列表例1（用户可参照下表建立相关关节控制表）：加工步骤控制环节危害关键限值预防措施监控程序纠偏行动记录/审核肉制品蒸、熏蒸箱/烟熏箱箱壁微生物污染、残渣1030（RLU）（仅供参考）清洁消毒ATP快速检测每周抽检2次，辅以平板记数检测1-2次。改善清洁消毒措施4. ATP快速检测Q&A： 1）为什么用ATP作为有效清洁的指标？ ATP存在于所有的有机物中，多数食品本身也都含有一定量的ATP，因此检测ATP可以作为判断是否洁净的指标。SystemSURE PlusTM荧光仪与UltrasnapTM 拭子配合使用，采用生物发光技术检测残留的ATP以作为表面清洁度的指标。表面ATP的存在表明表面没有充分清洗，有滋生细菌的可能。残渣中也可能含有某些有害物质如潜在的过敏原等。2）SystemSURE PlusTM荧光仪工作原理？ SystemSURE 系列荧光仪采用化学反应检测ATP，用Ultrasnap TM 拭子采集标本Ultrasnap TM 拭子被缓冲液浸湿，这样有助于从干燥或湿润的表面提取生物物质（ATP）。拭子也含有一种可以冲破生物膜的试剂，使其下可能存在的生物体暴露出来。标本采集后，拭子应浸泡在能将细胞内ATP释放出来的容剂中。而后细胞内部释放出的ATP、以及拭子从设备表面抹取的ATP再和UltrasnapTM 拭子独特的液体试剂一起反应。UltrasnapTM 拭子的液体试剂含有两种萤火虫酶-荧光素和荧光素酶，虫荧光素和虫荧光素酶在ATP存在的条件下会发光。发出的光可由SystemSURE PlusTM荧光仪进行检测。检测的发光量与ATP的总量成正比。数值越高，表明ATP的量越多，也就意味着表面的残留物越多。3）结果数字表示什么？ SystemSURE PlusTM荧光仪以RLU（相对光单位）数值显示结果。在UltrasnapTM 拭子中发生的ATP反应所产生的光以光子的形式发散出来。光子是微小的能量束，也是光的基本单位。SystemSURE对这些光子进行检测后直接以RLU数值的形式显示出来。SystemSURE PlusTM检测的光子数量越多，RLU的数值就越大。这种线性比例使得人们很容易在洁净与不洁表面之间做出判断。 SystemSURE PlusTM荧光仪检测的是总的ATP量，这些ATP来自细菌、酵母菌和霉菌体内以及食品加工设备表面的食物残渣中。所以RLU读数与微生物菌落形成单位（CFU）并不相同。由于SystemSURE PlusTM荧光仪检测总ATP，它不能分辨其显示的RLU读数是微生物体内的ATP检测值还是残留物中的ATP检测值，或者是两者的结合。因此不能在ATP/RLU数值和标准平板计数之间进行比较。在没有食物残渣存在的情况下微生物很容易被消毒剂杀死，所以如果设备表面不含ATP或ATP水平很低，表明没有或很少有食物残渣存在，此时消毒剂的使用效果最好。4）可以将RLU数和CFU计数进行对比吗？ Hygiena SystemSURE系列ATP荧光仪只能检测表面存在的总ATP，但它不能区分ATP是来自于微生物产生的亦或是因未充分清洗而残留在表面上的。所以不能直接将Hygiena SystemSURE系列ATP荧光仪测定的RLU读数与标准平板计数相对比。但是，ATP水平与微生物数目有着密切的相关性。5. ATP快速检测注意事项：l UltrasnapTM 拭子平时需2-8冷藏保存，另应避免强光直接照射。 l 不要用手触摸UltrasnapTM 拭子取样头，以免污染。l 如果待检表面可以用肉眼看到污物，则无需再浪费拭子进行检测。拭子是用来检测肉眼不能识别其洁净度的表面。l 不要用UltrasnapTM 拭子涂抹湿润表面，等表面干后再进行涂抹检测。6. SystemSURE 系列ATP荧光仪用户（肉制品加工企业）美国泰森食品公司美国泰森食品股份有限公司（Tyson Foods Inc.）创始于1935年，总公司位于美国阿肯萨州。泰森公司于2001年与美国IBP公司合并，目前是是全球最大的鸡肉、牛肉、猪肉供应商及生产商，也是最大的牛皮（盐/蓝湿皮）和猪皮生产商。在美国鸡肉市场占为25%。经历了70多年的稳健成长，现列世界财富500强中第二大食品公司。2004年度营业收入为 264亿美金，2004年度平均每周屠宰加工173,800头牛和362,343头猪。其中，12座牛肉屠宰分切厂，猪6座肉屠宰分切厂，9座制革厂，其中四座为蓝湿皮加工，总员工人数约为114,000名。美国卡夫公司美国卡夫食品国际公司(Kraft Foods Inc.)成立于1852年，是美国最大的食品和饮料企业，世界第二大食品公司，北美最大的食品生产商，现直属于菲利普·莫里斯公司-全世界最大消费品集团。卡夫已拥有100多年的历史，在全球68个国家拥有超过98，000名员工，6个全球研发中心，许多区域研发中心和约190家工厂。被公认为世界上最优秀的食品企业之一。1892年创立的麦斯威尔（Maxwell House）咖啡，一直以“Good to the last drop!”为目标，成为享誉全球的品牌。卡夫于1984年在中国设立了卡夫天美食品（天津）有限公司，1985年设立了卡夫广通食品有限公司（广州）。 丹麦科王集团Danish Crown 肉类和奶制品加工厂丹麦科王集团Danish Crown为欧洲第一，世界第二的肉制品加工企业。这个奶制品加工厂位于丹麦，建筑面积70平方英尺，在这个工厂里加工出来的肉制品及奶制品销售世界各地。 以上企业均采用SystemSURE PlusTM荧光仪与UltrasnapTM 拭子进行卫现场生快速监控，并取得良好效果。7. ATP快速检测综合示意图：选取关键点：例如每车间5个点每间车间，每月ATP检测预算1000 元以内关键点E关键点A关键点D关键点C关键点B制定检测周期：每个检测点每周抽检2次关键点B周二周四关键点A周一周三关键点E周五周日关键点D周四周六关键点C周三周五美凯纯www.microtrend-Tel: 021-65361317,18916777987结果统计重新清洁表面不通过警戒通过仍未通过重新评估清洁技术重新清洁和检测或继续继续清洁或不需采取更多措施ATP快速检测重新清洁工作肉眼检查污染肉眼清洁清洁后肉眼检查常规标准清洁清洁关键点12键清清检肉清污查工洁清检检措更清继检洁技清清评通通警通表表统 , - - / 凯点关清清常肉清清肉查肉作新重快 措多采续继检清重清重通警通重清多 新查清关 - 表通通清清更检工检清表新计统 , -0: . . : 周周点周周点周周点周周点五周点周五点周一点点点点点关点点关点一五周周周周点周 计计点 内关元 算预 月个间如点点点车：键图图综快 果果良控速场行 仪荧 均上地界销制品肉出工在英平面，麦工品个企品的第一欧 集王工品奶 王丹 ）州司品广卡年 ，有津品夫立设在 卡品全为，” ，咖 斯创 。之品秀界为。工0心中区，中全 名， 拥个 ，的0有夫团费消世公莫利于现商食大司公二，料品大美年 立. 公国食公夫名名 人员加湿为其革，分屠 厂屠座，其头, 和0 加宰每 0金 收度 。食二中财界长成的 历 为肉美。生）蓝/的是，产应猪肉的球是，司公国 0公森萨国位， 于始 司有股食公食业工制户用 列 测抹进后等面抹子 面表净别不检是拭行拭再无污到以表染染，子 手。射直避另藏 需平 项事测快 性关的有数平 比相板准 的仪荧列 接不所面留而充是的物生来 区但 的在测仪荧列 ？比行 和 将好果使毒消存物有或表低水或 面设以，毒易物生况渣物在较间之准和 / 此。结是值 留还检 的微数 示分不 测仪 。不 成菌微读 。渣食表工食以和酵菌 些这 的测光 。断间之与洁很们比种。就 ，量光检 来式值 直测进这 。位光，能微子出发子以生应 生拭 。示显单相 以荧 ？字数多物留表意多量 ，值数成 发测测进荧 出。下件存在光虫光酶素光荧虫种有试子 。起剂的子 取表从拭 的出内而剂来出 细在应子采。出物在能下试物冲种有拭。（物提的湿燥助，液被拭 标子 ，测应用光系 ？原作荧 等原过如物有可渣。的滋，充面表的 。的清面以 测检光用用子 荧 。指否判作 测因 量含身品数机有在？指洁效 ：检快措消次-检板辅 检快消考参 残、箱熏熏、蒸品审行程措限危环步）节立下可用列控点检 清） 不清域意别 需之） 合值 于合）（于判结措偏制检 据析分数期，年价期提措，告行式图结次 检每点点0立考考（测数板标样一节可（手初检作检略下推数取的，金率测样用的消效可 毒蒸高备测样面行燥毒间这，使毒依 分 接的毒况这检 后使在程 部行前剂用在 下般面表应表 机测检周与频 性相密，一全间数平检 关切有数微 说以，残有微来 意照之果 可标数平落制已备 (的 值平均 = .偏准 ） 均 = 结公值限式度的值术 _" . / 偏数以用标分分数一 （数数检 值检为、开 ： 于整 . / / + -( ( - -() ( - )平 ( 的）（为公 （差标组 = + （均的） 果这 ） （号带：送：值值结洁面检 果结，面表干上肉清深每值限自立 ） （ 考参。确数的面设同据定数限这限的组一 则控 即要间数数荐 值限设果结测 ， 步行进后在。荧 置 钟钟 轻液反挤三两阀头断折管插子完涂面表0×、 0域测头拭， 使 式子 光荧 域的抹表时面 0取不表表规面表 0角 表区测抹用面表表例示面 水 ）区目同图带送 台盖 箱熏/蒸 桶揉 叶片切 、片、拌/ 位目号考考:控区接食工品隙和、的不及管环斗包洗难区品或液灰可、物有域触域域染直会污那域接面表接和品括区品区清和区食主的点控和控确措纠制检快据施措定结速 周与检期与测置).(+ > 合 >惕（ =）（值值式以 . 格 . 关+ < ）警 = ：定式下定的立节检况情据值定己节环不身自 偏标值数 （这） 差准均的） 些算0检重检卫 行上控次0测检测控 进点每 0 0值定参户为 间 00 <不 算格预：定了提间用 度点清最车以三重图表洁彻立 的值果 立定控测 制行制关制点 点和点立 建 程 价评均洁清测、销平水品生过及检在毒英消工境生麦器品围范企全品的品食果欧消清 的指业集荧 奶 丹 荧州消品范广器境检 过、洁津 建点制设制定的卡洁三全最用提”格0 为定0 ，检测上卫 些）斯差这 。偏自品不己据为节定式 心 区警 < 格名 值个） （ 0 团> )测公检周利措快现纠控控食清公区品，面域品污域触年可或难包及 不 隙食区考号食/公片片揉名桶熏 员图区湿 ， 面例用厂测角 ，规其取 时 的 宰 每 ，拭 00表完 断。两反 中 钟 界 荧后 进，结为值 美数即控 蓝的限的定设的产考 肉 ）是自每清表， 检0洁：萨（ 的 始+ 标 为）司()- 公- (制 户 / 整 ：开抹为值数等一分以偏 / _表术度值不结 是 偏拭 均污 制染数果，意 残 数 数手全，射 周测另应下 需用 使 检况接事依，毒 面备毒可的数样平率的略比检（可标 （立仪0 图行 措价 ，据 接措于合于留合需 是别域物） 列可区节步措的审、箱仪残参快 辅- 措检 ？指在机量和 判将指 荧 消用存 清 或面滋。水有原 设作 光毒应 物 渣液燥提物间拭冲准能物应/在出而拭结表 剂起留 子虫素的虫存数出 进不 数测 量留 数 荧单。 拭生子菌微光读 这进 表 光，以种很酵之断12