DAPI溶液染色说明.doc

DAPI 溶液染色说明书华越洋-保存：-20避光保存。说明：华越洋的DAPI溶液(4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与 DNA 中大部分 A，T 碱基相互结合的荧光染料常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当 DAPI 与双链 DNA 结合时，最大吸收波长为 358nm，最大发射波长为 461nm。DAPI 的发射光为蓝色，且 DAPI 和绿色荧光蛋白 GFP 或 Texas Red 染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。DAPI溶液，纯度90%，为即用型工作液，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。使用方法：（仅供参考）1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行 DAPI 染色。2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。3， 室温染色 5-10 分钟。4， 吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。DAPI 溶液注意事项：DAPI 被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。1 剂说封明衰抗以光荧测成当后染题淬存融冻反并光染污交，手作性有遍 项意液 0-0长，观显于钟钟 每 洗水 、 液色 钟 0色染匀，染 积样待少，浮。品盖液 量入片或壁于色染 直，其要果色 后，光免进可荧疫需。固除洗定过样织细考供：色核的组定固以液工即0度液 色光荧上样单项这可分部长的染色红 或 光色 ，为光 波， 为大时结 双 。染胞固于可膜胞过可 为镜显荧常光结互 大 够是盐哚苯-脒 ( 的明存光-越