胶体金免疫层析技术ppt课件.pptx

庄捷胶体金免疫层析技术就是以胶体金为显色媒介，利用免疫学中抗原抗体能够特异性结合原理，在层析过程中完成这一反应，从而达到检测的目的。+胶体金技术： 为诊断提供肉眼可见的显色媒介+膜技术 原料的固化载体，层析的动力来源+免疫学技术 特异性的检测样本中需要检测物质什么叫胶体金： 胶体金是一群以胶体状态，粒径在微米级以下的悬浮于水溶液中的金的颗粒。古代： 用于提炼长生不老药物； 玻璃染色。近现代： 19世纪50年代由Michael Faraday第一次人工合成纯胶体金 1971年胶体金被 第一次用于电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌 1974年Romano将胶体金标记在第二抗体（马抗人IgG）上，建立了间接免疫胶体金染色法 1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用+胶体金结构： 胶体金颗粒由一个基础金核（原子金Au）及包围在外的双离子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子（AuC12），外层离子层H+则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。染色不同粒径，不同颜色 胶体的特性充分的溶解性，良好的流动性吸附能力在不改变蛋白性质的情况下，稳 定迅速的吸附蛋白粒径粒径颜色颜色25nm橙色的1020nm酒红色3080nm紫红色+胶体金在电镜水平的应用+胶体金在光镜水平的应用+胶体金在流式细胞仪中的应用+免疫印迹技术 什么叫硝酸纤维素膜？ 以硝酸纤维素为基质，经过匀浆，滚筒铺膜，烘制成型从而制的一定孔径的硝酸纤维素膜。匀浆配方决定硝酸纤维素膜的性质。烘制速度决定硝酸纤维素膜的孔径。 硝酸纤维素膜的性质： 微孔性：层析动力的来源 多孔性：样本流动性 蛋白吸附能力： 样本过滤：孔径（孔径（M）流速流速(S/4cm)0.21800.451350.875 滤膜 分子杂交 核酸、蛋白转印 免疫层析 是机体识别“自身”与“非己”抗原，对自身抗原形成天然免疫耐受，对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常情况下，这种生理功能对机体有益，可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用 经验免疫学时期 在实践中创造性地发明了人痘苗 经典免疫学时期 由人体现象的观察进入了科学实验时期 近代免疫学时期出现了全新的免疫学理论 现代免疫学时期从分子水平对免疫系统进行研究抗原抗体钥匙和锁的关系抗体能够特异性的结合抗原的活性位点。基因工程指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性，从而获得新的品种货或产品。意义：可以稳定的获得人类所要的蛋白。 20世纪90年代初，第一个免疫层析产品诞生用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。 在其后的20年中，免疫层析产品得到了快速的发展：项目项目所占百分比所占百分比早孕检测90%以上毒品检测80-90%疾病检测30-40% 快速，定性 10分钟以内就可得到检测结果。 无需设备 一根检测条就能完成检测 准确、灵敏 灵敏度可以达到10-9数量级 应用范围不断扩大 疾病诊断，食品安全，药物检测，DNA检测 特异性，灵敏度不断提高 半定量，定量检测： 银染色胶体金免疫层析技术； 免疫荧光技术； 时间分辨荧光技术 HCG 检测检测灵敏度灵敏度特异性特异性样本样本早期HCG检测条2000mIU与LH等交叉尿液现在HCG检测条20mIU特异性检测HCG尿液，血清，全血 谢谢