制细菌标本片采取的制片方法是脱落细胞标本制片及染色操作规程.doc

制细菌标本片采取的制片方法是脱落细胞标本制片及染色操作规程脱落细胞标本制片及染色操作规程 1      取材和制片： （1）      浆膜腔穿刺液的制片： 1.穿刺液抽出后应立即送检，可加入等量的95%的酒精或1/16量的福尔马林固定。 2.标本收到后先肉眼观察，记述其颜色、性状。如有组织碎屑或纤维蛋白凝胶，取出做组织学切片。液体置离心管中以3880rpm离心4分钟。弃上清液，将沉淀物用吸管打匀，吸出滴在玻片上，每片1-2滴，用另一玻片推成厚薄均匀的涂片2片。 3.含有多量血液的标本，经离心后取红细胞层上面的一层淡黄色细胞层做涂片。 4.如果标本凝固不宜再用。可重新抽取，并在标本瓶内加入适量的抗凝剂。 5.如沉淀物较多，涂片后可将剩余部分用滤纸包裹做石蜡切片。 （2）      尿液标本的采集及制片： 收集新鲜晨尿，最好是清晨第二次排出的尿，不少于50ml，用3880rpm离心4分钟，弃去上清，将沉淀物用吸管打匀，吸出滴在玻片上，每片1-2滴，用另一玻片推成厚薄均匀的涂片2片。 二、涂片的固定： 涂片制成后，立即浸于95%酒精固定液中固定15分钟。 三、染色： （一）苏木素伊红染色： 1.涂片经95%酒精固定后用蒸馏水冲洗2-3分钟。 2.苏木素染液5-10分钟。 3.水洗。 4.1%盐酸酒精（70%酒精99ml，浓盐酸1ml）分化数秒钟。 5.自来水返蓝5分钟。返蓝后，显微镜下检查细胞核染色是否恰当，如果染色过深，需要重复分化；如果过淡，则可重复染色。 6.伊红染液2分钟。 7.水洗。 8.70%酒精片刻，80%酒精半分钟，无水酒精两次共5分钟，二甲苯两次共5分钟，最后将涂片周围擦净，在涂片上滴加适量的中性树胶，盖上盖玻片。 （二）巴氏染色： 1.涂片经95%酒精固定后用蒸馏水冲洗2-3分钟。 2.根据所选用试剂的厂家不同染色方法有所不同。如_建成科技有限公司的超快速无毒改良巴氏染液：将涂片置于试剂一核染液染缸中染色30秒-2分钟。 3.水洗30-60秒。 4.移入试剂二浆染液染缸中染色约20秒-2分钟。 5.移入试剂三增色液染缸中染色约10秒。 6.无水酒精两次共5分钟，二甲苯两次共5分钟，最后将涂片周围擦净，在涂片上滴加适量的中性树胶，盖上盖玻片。 第 3 页 共 3 页