猪细小病毒病诊断与及预防.docx

猪细小病毒病诊断与及预防猪细小病毒病概述猪细小病毒病也称猪繁殖障碍病，主要危害繁殖母猪，病原体为猪细小病毒，目前该病在本地广为流行，其病症特征主要表现在妊娠母猪特别是初产母猪，当母猪妊娠受到感染后，会引起流产、产死胎、胚胎死亡、木乃伊化胎儿和产弱仔、母猪发情不正常、久配不孕等临床症状。一般妊娠猪在怀孕前期感染多出现木乃伊化胎儿；怀孕7周后感染多出现产死胎；怀孕10周后感染多出现流产；怀孕后期感染的母猪多正常产仔，但这些仔猪带毒或带有抗体。猪细小病毒病一般呈地方性流行或散发，多发生于春、夏或母猪产仔和交配的一段时间。肉眼可见病变，母猪子宫内膜有炎症，胎盘有融化现象，胎儿在子宫内有被溶解、吸收等现象等。对于未感染过该病的猪场，应杜绝引进带毒猪；发病猪场对初产母猪在配种前5-6周应进行疫苗接种；配种前3-4周再进行第二次免疫接种。流行特点几乎所有猪群都感染此病，不同品种、性别、年龄的猪都易感，后备母猪比经产母猪易感染，传染源是带毒的公猪和母猪，流产和死胎、活胎及子宫分泌物中含有大量病毒，而带毒猪所产的活猪可能带毒排毒时间很长甚至终生。临床症状猪群暴发此病时常与木乃伊、窝仔数减少、母猪难产和重复配种等临床表现有关。在怀孕早期30-50天感染，胚胎死亡或被吸收，使母猪不孕和不规则地反复发情。怀孕中期50-60天感染，胎儿死亡之后，形成木乃伊，怀孕后期60-70天以上的胎儿有自免疫能力，能够抵抗病毒感染，则大多数胎儿能存活下来，但可长期带毒。防治严格执行卫生防疫制度，在污染的猪场用疫苗接种或采取自然感染结合，推迟初配日龄的方法。猪细小病毒病诊断自1967年Cartwright等首次报道PPV病以来，有关该病诊断方法的研究报告较多，从最初的病毒分离鉴定，到血凝及血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验等免疫学方法，直到核酸探针、聚合酶链式反应等分子生物学技术应用到PPV病的诊断中。病毒分离和鉴定用于诊断PPV感染的最大优点是结果准确可靠，可以作为最后确诊。用于分离PPV的病料，一般为流产或死产胎儿的脑、肾、肝、肺、睾丸、胎盘及肠系膜淋巴结等，其中以肠系膜淋巴结和肝脏的分离率最高。虽然此方法是最准确的诊断方法，但是其费时费力，并且需要一定的技术条件和设备，另外，其感染力会随着胎儿死亡时间而降低从而限制了临床应用；红细胞凝集试验(HA)操作简便易行，且能进行快速、大量的诊断，但是其灵敏度低、特异性不强，只能作为辅助诊断方法。血凝抑制(HI)试验是检测PPV抗体最常用的经典方法，一般采用试管法和微量法。利用HI试验检测人工感染PPV的猪，发现感染后5天即可检测到相应抗体，1214天抗体滴度高达10244096，并能持续多年检出抗体。待检血清进行HI试验时需要首先进行热灭活处理，然后再用红细胞吸附，以除去血清中的非特异性血凝素，进一步用高岭土吸附以除去或减少血清中非特异性抑制因子。目前，该方法在国内外已得到广泛应用。血清中和试验(SN)也是检测PPV抗体的方法之一，其原理是利用被检血清的抗体中和PPV，然后根据培养细胞的病变情况来计算血清抗体的滴度。SN的特异性比HI高，但是SN的操作较为复杂，首先要进行病毒感染力的测定，而PPV在低剂量时并不引起细胞病变，从而限制了该方法的使用。1988年，Hohdatsu等率先建立了PPV的ELISA诊断方法并用于检测PPV的血清抗体，我国姜永厚等(1997)建立了双抗体夹心ELISA用于检测PPV的抗原，可建立的ELISA诊断方法非特异性较强。邵振华、田海燕(中国兽药监察所)用滤纸采集猪血样，加入到预先用PPV抗原处理的微孔板小孔内，进行免疫间接过氧化物酶染色试验检测PPV抗体，在2-3小时内即可观察结果。对比试验证实比HI敏感(高7.4%)，特异性更强。就操作过程而言，该方法比HI要简单，且具有采血方式新颖、送样方便以及抗原软板可随意剪取、不需要特殊的仪器设备等优点，但该方法中抗原的保存时间有限，因此限制了该方法的普及应用。