最新医院感染控制与微生物学监测--于拥军精品课件.ppt
医院感染控制与微生物学医院感染控制与微生物学监测监测-于拥军于拥军 随着现代医疗技术的进步和社会人群构成的老龄化，免疫功能低下者日益增多，感染宿主由健康人群逐步转向免疫功能低下人群，条件致病微生物逐步替代了毒力强的病原微生物而成为主要病原体，感染的主流已倾向于医院感染。医院感染严重威胁住院患者的身心健康和预后，直接关系到医疗质量与患者安危及医疗费用,目前已成为国际医学界极为关注的重要问题,控制医院感染是现代化医院质量管理的重要目标之一。医院感染控制的重要性医院感染控制的重要性 大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌占据医院感染病原菌的前三位。 以上为总的分布特点，不同医院可能略有差异。第三节第三节 医院感染的微生物学监测医院感染的微生物学监测 检测项目及方法医院感染监控中常用的检测方法 1、空气的微生物学监测 2、物体表面的微生物学监测 3、医务人员手的微生物学监测 4、使用中消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测 5、血液净化系统的微生物学检测 6、内窥镜消毒灭菌效果的微生物学检测 7、医疗用品的微生物学监测 采样及检查原则： 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测。 1空气的微生物学监测 （1） 采样方法：沉降法、固体撞冲法（撞击式、离心式）、液体冲击法和滤过法。 （2） 采样时间： 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 （3） 采样高度： 与地面垂直高度80150 cm。 （4） 布点方法： 室内面积30 m2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处取一点；室内面积30 m2 ，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 采样方法： 用90mm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5 min后送检培养。 （5）细菌菌落总数检查：将平板置37温箱内培养24 h计数菌落。 空气细菌菌落总数（cfu/m3）= 50000N/ AT 式中：A平板面积 （cm2 ） T平板暴露时间 （min） N平均菌落数 （cfu/平板） （6） 判断标准：见表6-3-1。6cm7.5cm9cm5min35422615710min1771137915min118765230min593826环境空气监测的结果计算（自然沉降法） 2物体表面的微生物学监测 ( 1 ) 采样方法：棉拭子采样法、压印法及破坏法。 （2）采样时间：消毒处理后4 h内采样。 （3）采样面积： 被采表面100 cm2 ， 取全部表面；被采表面100 cm2，取100 cm2 。 （4）采样方法： 用5cm5 cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有灭菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样式14个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子入装10ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 （5）细菌菌落总数检查： 1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通 营养琼脂作倾注培养， 放35温箱内培养2448 h计数菌落。 物体表面细菌菌落总数（cfu/ cm2）= 平板上菌落数采样液稀释倍数 采样面积（cm2） （6）判断标准：见表6-3-1。 3医务人员手的微生物学监测 （1）采样时间： 在接触患者或从事医疗活动前进行采样。 （2）采样面积及方法： 被检人五指并拢，将浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米 (cm2) 计算。 （3）细菌菌落总数检查： 1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35温箱内培养2448 h计数菌落。 手细菌菌落总数（cfu/ cm2）= 平板上菌落数采样液稀释倍数 302（ cm2 ） （4） 判断标准： 见表6-3-1。 4使用中消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测 （1） 采样时间： 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 （2 ） 采样方法：涂抹法: 用无菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入9.0ml含有相应中和剂的采样管内混匀,用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml,滴于干燥普通琼脂平板,每份样品同时做2个平行样,一平板置200C培养7天,观察霉菌生长情况,另一个平板置350C温箱培养72h,记数菌落数,同时检测致病菌 消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数50倾注法: 用无菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入到9.0ml含有相应中和剂的无菌生理盐水采样管内混匀,分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内,加入已溶化的45480C的营养琼脂1518ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固,一平板置200C培养7天,观察霉菌生长情况,另一个平板置36 10C温箱培养72h,记数菌落数,同时检测致病菌 消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数20 （3）判断标准：使用中消毒剂，细菌菌落总数100 cfu/ ml，病原微生物不得检出；无菌器械保存液必须无菌。 （4）注意事项：采样后1小时内检测。常用消毒液的相应中和剂消毒剂（浓度消毒剂（浓度 ）中和剂（浓度中和剂（浓度 ）含氯（碘）消毒剂（含氯（碘）消毒剂（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-1.0）过氧乙酸（过氧乙酸（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-0.5）过氧化氢（过氧化氢（1.0-3.0）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5-1.0）福尔马林（福尔马林（1.0）（1）双甲酮（）双甲酮（1.0）与吗啉（）与吗啉（0.6）混合）混合液；（液；（2）亚硫酸钠（）亚硫酸钠（0.1-0.5）；（）；（3）氢氧化铵（氢氧化铵（25.0）戊二醛（戊二醛（2.0）甘氨酸（甘氨酸（1.0）季胺盐类消毒剂（季胺盐类消毒剂（0.1-0.5）吐温吐温80（0.5-3.0）+卵磷脂（卵磷脂（1.0-2.0）洗必泰（洗必泰（0.1-0.5）同季胺盐类同季胺盐类酚类消毒剂（酚类消毒剂（30.0-50.0）吐温吐温80（0.5-3.0）汞类消毒剂（汞类消毒剂（0.002-0.5）巯基醋酸钠（巯基醋酸钠（0.2-2.0）碱类消毒剂碱类消毒剂等当量酸等当量酸酸类消毒剂酸类消毒剂等当量碱等当量碱 采样时间：采样时间： 血液净化系统监测应在透析用水和透析液血液净化系统监测应在透析用水和透析液制做好后即将进行透析前。制做好后即将进行透析前。 采样方法：采样方法： 用灭菌注射器吸取透析用水或透析液用灭菌注射器吸取透析用水或透析液25ml,放入无菌管中送检。放入无菌管中送检。 5 血液净化系统的微生物监测 检测方法检测方法 用无菌吸管吸取用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿待检样品接种于灭菌平皿,每一样每一样本接种本接种2个平皿个平皿,内加入已溶化的内加入已溶化的4548 的营养琼脂的营养琼脂1518ml,边倾注边摇匀边倾注边摇匀,待琼待琼 脂凝固脂凝固,置置361 温箱培温箱培养养48h,计数菌落数。计数菌落数。 结果计算结果计算 透析用水透析用水/透析液细菌总数透析液细菌总数(CFU/ml)=2个平板上的菌落总个平板上的菌落总数数稀释倍数。稀释倍数。 卫生标准卫生标准 透析用水细菌数透析用水细菌数200 CFU/ml,每个月监测每个月监测1次次,结果超出范结果超出范围时围时,应再复查应再复查,当怀疑或确定患者在透析过程中有热原反当怀疑或确定患者在透析过程中有热原反应、菌血症状时应随时进行监测。应、菌血症状时应随时进行监测。 透析液细菌数透析液细菌数2000 CFU/ml，每个月监测，每个月监测1次，当怀疑有透析液污染或发生严重的感次，当怀疑有透析液污染或发生严重的感染病例时，应增加采样点。如原水口、反染病例时，应增加采样点。如原水口、反渗水出口、储水箱出口、透析液配比机和渗水出口、储水箱出口、透析液配比机和浓缩透析液等。浓缩透析液等。6 内窥镜消毒灭菌效果的微生物监测内窥镜消毒灭菌效果的微生物监测 采样时间：在消毒灭菌后、使用前进行采样。 采样方法：用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的棉拭子，在被检内窥镜上从镜头至镜身反复涂擦，剪去手接触部位，将棉拭子投入到5ml含相应中和剂的生理盐水采样管中，立即送检。 结果判定：灭菌后内窥镜，未检出任何微生物为合格。消毒后的内窥镜，细菌总数20cfu/件，并未检出致病菌为合格。 7压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测 （1）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。 （2）布点方法：小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂，置最底层中央；中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂，上层中央放一个，下层前后各一个；大型灭菌器选5个包装物品放入指示剂，上、中层中央各放1个，下层前、中、后部各放1个。 （3）监测方法：采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC 7953，ATCC 12980）作为生物指示剂。各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准表6-3-1环境类别 范 围 细菌菌落总数 空气 物体表面 医护人员手 (cfu/ m 3) ( cfu/ cm 2 ) (cfu/ cm 2 ） 类 层流洁净手术室、层流洁净病房 10 5 5 类 普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、 普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤 病房、重症监护病房 200 5 5 类 儿科病房、妇产科检查室、注射室、 500 10 10 换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、 实验室、各类普通病房和房间 类 传染病科及病房 15 15 注：， 不要求 开展医院感染的监测，能使我们及时的发现医院感染存在的问题、医院感染的危险因素、易感人群、医院感染的发展趋势等，为医院感染的预防和控制提供科学依据，同时能及时发现是否有医院感染的聚集性发生或暴发流行，以便及时采取控制措施，将其消灭在萌芽之中。所以，医院感染监测是医院感染控制的基础，没有监测为依据的控制措施是盲目的，没有控制行动的监测是无目的、无意义的监测。因此要加强临床、微生物实验室、监控部门三位一体的紧密联系的工作关系，从而促进医院感染的预防和控制，有利于医疗质量的提高和确保医疗安全。谢谢！ 32 结束语结束语
