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组织胚胎学 绪论 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life, there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望提提 要要 组织学的内容和意义组织学的内容和意义 组织学发展史和当代组织学组织学发展史和当代组织学 组织学的学习方法组织学的学习方法 组织学技术简介组织学技术简介一、组织学的内容和意义一、组织学的内容和意义人体解剖学人体解剖学光学显微镜光学显微镜 放大放大40倍倍 组织学研究哪些内容？组织学研究哪些内容？放大放大400倍倍细胞细胞什么是组织？ 细胞群+细胞外基质上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌组织肌组织神经组织神经组织：四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官。：四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官。 器官器官小肠HE切片组组 织织学好组织学的意义学好组织学的意义 促进了生理学的进步促进了生理学的进步 是病理学的基础是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解促进人类对自身的深入了解二、组织学发展史和当代组织学二、组织学发展史和当代组织学1、光学显微镜、光学显微镜简称光镜（简称光镜（light microscope，LM） 1590年前后，荷兰眼镜年前后，荷兰眼镜匠詹森（匠詹森（H.Janssen）发）发明了世界上第一台光学显明了世界上第一台光学显微镜微镜 。 1665年英国科学家罗伯年英国科学家罗伯特特胡克改进了复式显微镜，胡克改进了复式显微镜，并发现了植物细胞结构。并发现了植物细胞结构。cell 意大利人马尔比基观意大利人马尔比基观察了脾、肺、肾、表察了脾、肺、肾、表皮；皮； 列文虎克发现红细胞、列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；精子、肌纤维； 格拉夫发现卵泡格拉夫发现卵泡 1801 年比沙提出年比沙提出“组组织织”概念概念精子涂片精子涂片卵泡光镜图卵泡光镜图红细胞血涂片红细胞血涂片提出：施万、施莱登（提出：施万、施莱登（1838、1839）内容：细胞是一切动、植物体的基本结构内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生应；新细胞由原有细胞产生2、细胞学说、细胞学说3、电子显微镜、电子显微镜简称电镜（简称电镜（electron microscope, EM） 发明：发明：1932 年年 卢斯卡、卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到科诺尔，使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片术（超薄切片术（5080nm） 超微结构超微结构（ultrastructure）：即细）：即细胞膜、细胞器、染色体等胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构亚细胞结构4、当代组织学、当代组织学 新仪器、新技术的发明和应用新仪器、新技术的发明和应用 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平织学引入分子水平 组织工程学技术拓展了组织学的临床应组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景用前景审视角度审视角度 组织水平组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能的超微结构）及功能2. 形态和结构相统一形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现结构是功能的基础，功能是结构的必然表现3.3.培养培养观察能力：观察能力：重视实习课和图像观察重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像三、如何学好组织学三、如何学好组织学四、组织学技术简介四、组织学技术简介（一）光镜技术（一）光镜技术 石蜡切片术石蜡切片术（paraffin sectioning）：）：取材、固定、脱取材、固定、脱水、包埋、切片（水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色厚）、染色 苏木精苏木精- 伊红染色法伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法染色法）：）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色色 嗜酸性嗜酸性（acidophilia) )： 易被酸性染料着色的结构易被酸性染料着色的结构 嗜碱性嗜碱性(basophilia) )：易被酸性染料着色的结构易被酸性染料着色的结构 特殊染色特殊染色 HE HE染色，垂体远侧部染色，垂体远侧部（二（二 ）电镜技术）电镜技术1、透射电镜术、透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM） 用于观察组织细胞的超微结构用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定戊二醛、锇酸双重固定树脂包埋树脂包埋超薄切片（超薄切片（50 80nm 厚）厚）电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）透射电镜图，浆细胞透射电镜图，浆细胞2、扫描电镜术、扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片立体感，无需制备切片图图8 8 扫描电镜扫描电镜图图，血细胞，血细胞 1、一般组织化学术：一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。糖类：糖类： PAS（过碘酸（过碘酸-希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色。紫红色。 （三）组织化学术（三）组织化学术过碘酸过碘酸紫红色的反应产物紫红色的反应产物糖糖 多醛多醛品红硫酸复合物品红硫酸复合物 （希夫试剂，无色）（希夫试剂，无色）图图9 PAS9 PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒2 2、免疫组织化学术、免疫组织化学术：图图10 10 免疫组织化学原理模式图免疫组织化学原理模式图图图11 11 免疫组织化学（荧光素标记）免疫组织化学（荧光素标记）毛细血管内皮细胞呈毛细血管内皮细胞呈vWFvWF阳性阳性 图图12 12 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）胰岛胰岛B B细胞呈胰岛素阳性细胞呈胰岛素阳性图图13 13 免疫组织化学电镜免疫组织化学电镜图图示上皮细胞膜示上皮细胞膜MAMMAM6 6蛋白蛋白 （A A 胶体金标记胶体金标记 B B 辣根过氧化物酶标记）辣根过氧化物酶标记）图图14 14 原位杂交原位杂交 主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNAmRNA阳性阳性即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）3、原位杂交术、原位杂交术图图17 17 体外培养的体外培养的HeLaHeLa细胞相差显微镜图细胞相差显微镜图4、细胞培养、细胞培养图图18 18 体外培养的平滑肌细胞体外培养的平滑肌细胞 （免疫组织化学染色显示肌动蛋白）（免疫组织化学染色显示肌动蛋白）图图19 19 实验中的组织工程耳实验中的组织工程耳5、组织工程、组织工程
