微生物的培养与应用(我整理的基础习题)-5页精选文档.doc

如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流微生物的培养与应用(我整理的基础习题)【精品文档】第 5 页“微生物的培养与应用”知识归纳及试题 课题1 微生物的实验室培养1.培养基：按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供微生物生长繁殖的营养基质。按照物理性质不同可分为 和 ，这两种培养基的差别是是否加入 。 2培养基一般都含有 、 、 、 四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、 以及 的要求。3获得纯净培养物的关键是 。4消毒是指使用较为 的物理化学方法杀死物体表面或内部的 灭菌是指使用 的物理化学因素杀死物体内外 的微生物，包括 和5常用消毒方法 6，常用的灭菌方法 7.接种针，接种环或其他金属器皿的灭菌方法是 ，接种过程中试管口或瓶口容易被污染的部位，也通过 灭菌。培养基灭菌必须使用 灭菌。8.培养微生物的步骤（1）制备培养基：计算 溶化 分装包装 （2）接种：常用的方法是 和 。（3）培养：将接种后的培养基和 都放在适宜温度的恒温箱中培养适宜时间，分别 和 结果。9菌种的保藏：（1）临时保藏：将菌种接种到试管的 ，在合适的温度下培养， 长成后，放入 冰箱中保藏，以后每36个月，转移一次新的培养基。缺点是：保存时间 ，菌种容易被 或产生变异。（2）长期保存方法： 法，放在 冷冻箱中保存。课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1基础知识：(1)尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。(2)右图是分离土壤中分解尿素的细菌所用的培养基配方，根据配方回答以下问题： 惟一氮源， 碳源是 按物理性质归类为 培养基。（3）根据培养基的功能，该培养基属于 能筛选出分解尿素的细菌，抑制不能分解尿素的微生物生长。（4）菌落： 或 细胞在 培养基上繁殖形成的 。同种微生物表现出稳定的菌落特征，因此根据菌落的特征，可以 2.实验设计：（1）土壤取样： 去掉表层土，取距离地表层3-8cm的土壤层，原因是： (2)样品稀释： 测定土壤中细菌的数量一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，以保证能从中选出菌落数在 间的平板进行计数。（3）微生物的培养与观察将不同稀释度的等体积的土壤溶液接种到不同培养基平板上，接种方法是 将接种后的培养基平板和 的培养基平板（空白对照）放在适宜温度下培养1-2天，每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果（4）统计计数：常用来统计样品中活菌数目的方法是 。即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数，计数公式是 。利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 。一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为 。因此，统计结果一般用 而不是活菌数来表示。另外， 也是测定微生物数量的常用方法。3设置对照实验的主要目的是 ，提高实验结果的可信度4对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行一步的鉴定，还需要借助 的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性 ，PH 。因此，我们可以通过检测培养基 变化来判断该化学反应是否发生。在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂（鉴别培养基）。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 ，说明该细菌能够 。课题3 分解纤维素的微生物的分离1.基础知识（1）纤维素是 类物质，纤维素酶是一种 酶，一般认为它至少包括三种组分，即 、 和 ，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成 。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。（2）筛选纤维素分解菌可以用 法，这种方法能够通过 直接对微生物进行筛选。原理是： 可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的 和 发生这种反应。纤维素分解菌能产生 分解纤维素，从而使菌落周围形成 。2.实验设计流程：（1）土壤取样：在 的环境中采集土样。（2） 培养将土壤样液加入以 为唯一碳源的 的培养基中进行选择培养，以增加样品中分解纤维素菌的数量。（3）梯度稀释（4）将样品涂布到 的培养基上（5）挑选产生透明圈的菌落。3为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还学进行 的实验。纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量测定。 习题1. 有人通过实验探究某海藻的最佳培养条件，以获得最大生物量（注：生物量指单位体积的藻体干重）。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（1）在有光条件下培养海藻时，培养液中必须含有_,还需定时向培养液中通入空气，目的是提供 。海藻光合速率随着向光照强度的变化曲线如下图，图中B点表示最佳的_培养条件。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）该海藻的无光条件下仍能生长，但需在培养液中添加葡萄糖等有机物，目的是提供_。（3）向培养液中添加葡萄糖配成不同浓度的培养液，在一定光照条件下培养该海藻，测定海藻的生物量如下表：“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）要确定培养海藻的最佳葡萄糖浓度，还需设计_的实验。（4综合上述实验，获得该海藻最大生物量的培养条件是_。2.氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培养基配方如表1. “汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（1）配制号固体培养基时，除添加号液体培养基成分外，还应添加1%的_。（2）培养基配制时，灭菌与调PH的先后顺序是_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）从用途上来说，号培养基和号培养基分别属于_培养基和_培养基。在号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_。（5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养，得到生长曲线（如图2）。从图2可知SP1菌在_培养条件下最早停止生长，其原因是_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）3.莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程，影响NADP+形成，进而影响在中进行光合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津杂草，将它与敏感型植株杂交，结果见下表：杂交亲本后代中耐药型植株比例（%）后代中敏感型植株比例（%）耐药型×敏感型1000敏感型×耐药型0100由表推断，控制该耐药性状的基因位于。莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-1据图回答：由于莠去津的作用，在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。下图是AC瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是；从A瓶中应选择细菌生长处于期的菌液加入到B瓶中，培养效果会更好。在固体培养基中，无透明菌落利用的氮源主要是；有透明带菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌。OA瓶B瓶C瓶乙类细菌丙类细菌甲类细菌最大密度4.科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-7-55某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。6.乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：发酵预处理、水解玉米秸杆糖液酒精（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用 酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？ （多选）A酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为 （按功能分），培养基中的碳源为 。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-7-5（4）从生物体提取出的酶首先要检测 ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用 技术。（5）发酵阶段需要的菌种是 ，在产生酒精时要控制的必要条件是 。7.从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。 （3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行，接种前要进行，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。【答案】答案】1.（1）各种必需矿质元素（1分） CO2 （1分） 光照（1分）（2）碳源和能源（2分）（3）在0.2-0.6g/L之间更细分的浓度梯度 （2分）“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-（4）适宜光照，添加适宜浓度的葡萄糖 （2分）2.（1）琼脂 （2）先调PH，后灭菌 （3）通用 选择 硝酸铵（4）芽孢 （5）20mg/L氯苯 硝酸最早耗尽3. NADPH叶绿体基质 细胞质中“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） 自然选择初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并提高其密度培养液中缺少甲类细菌可利用的氮源或（和）有氧条件抑制了甲类细菌的生长对数 氮气莠去津同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）。4.(2)碳源 氮源(4)平板划线法 稀释涂布平板法(稀释混合平板法) 灭菌氮源（碳源不作要求） 碳源、无机盐、水（2）高压蒸汽灭菌（3）恒温培养箱 无菌水“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）多；高（5）盐（或NaCl），选择性培养基。5.（1）纤维素（酶） （2）B、E （3）选择培养基 纤维素（4）酶的活性（活力） 固定化细胞（固定化酶）（5）酵母菌 无氧（密闭、密封）