优质课件精选——高中基因工程选修背诵.ppt

1、基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术 2、基因工程的基本工具：限制酶、DNA连接酶、运载体 3、限制酶来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 4、限制酶的功能：识别特定的核苷酸序列，并在特定位点切割磷酸二酯键。 5、限制酶切割的结果：黏性末端和平末端。 6、DNA连接酶功能：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 7、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低。 8、DNA聚合酶的作用部位是磷酸二酯键。,7、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低。 8、DNA聚合酶的作用部位是磷酸二酯键。 9、运载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 10、基因工程常用的载体有： 质粒 、 噬菌体 和 动、植物病毒 等。 11、最早应用的载体是质粒，它是细菌细胞中的一种很小的具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 12、基因的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 13、目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。,12、基因的基本操作程序：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 13、目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。 14、获取目的基因的方法是从自然界中已有的物种中分离出来，如何从基因文库中获取。人工合成法：反转录法和化学合成法。PCR扩增 15、取原核细胞的目的基因方法一般是：直接分离法。 16、获取真核细胞的目的基因一般是人工合成法。 17、基因文库包括基因组文库和部分基因组文库。包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基因组文库，只包含了一种生物的一部分基因的基因文库叫做部分基因文库（cDNA文库）。（课本第8页图16） 18、课本第10页生物技术资料卡：基因文库的构建，cDNA文库是如何构建的的？两种基因文库的主要区别有哪些？,17、基因文库包括基因组文库和部分基因组文库。包含了一种生物所有的基因的基因文库叫做基因组文库，只包含了一种生物的一部分基因的基因文库叫做部分基因文库（cDNA文库）。（课本第8页图16） 18、课本第10页生物技术资料卡：基因文库的构建，cDNA文库是如何构建的的？两种基因文库的主要区别有哪些？ 19、PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。 20、PCR原理是：DNA复制的原理。前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列。 21、PCR条件：模板、ATP、酶、原料（四种游离的脱氧核苷酸） 22、PCR酶：热稳定DNA聚合酶 （耐高温DNA聚合酶） 23、如果基因比较小，核苷酸序列又已知，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。,21、PCR条件：模板、ATP、酶、原料（四种游离的脱氧核苷酸） 22、PCR酶：热稳定DNA聚合酶 （耐高温DNA聚合酶） 23、如果基因比较小，核苷酸序列又已知，也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 24、已知某蛋白的氨基酸系列，获得目的基因的方法用人工合成法。 25、若已获得某蛋白的mRNA，可通过反转录法获取目的基因。该过程获得的目的基因无启动子、终止子、内含子。 26、基因工程的核心是：基因表达载体的构建。 27、基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因 28、构建基因表达载体的工具酶是限制酶和DNA连接酶。,27、基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因 28、构建基因表达载体的工具酶是限制酶和DNA连接酶。 29、构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 30、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA. 31、终止子使转录在所需要的地方停止下来。 32、标记基因的作用：鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 33、基因表达载体构建方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接形成重组质粒。 34、过程中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割的优点是防止目的基因自身环化。,33、基因表达载体构建方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接形成重组质粒。 34、过程中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割的优点是防止目的基因自身环化。,35、处理目的基因和载体的限制酶一般是相同的限制酶，目的是切割后形成相同的黏性末端。 36、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。 37、将目的基因导入植物细胞（一般选择植物体细胞）：最常用方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法。 38、农杆菌转化法原理： 农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物. 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。 39、将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。,39、将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 40、导入目的基因的植物体细胞可通过植物组织培养技术培育成完整植株。 41、将目的基因导入动物细胞：显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。 42、选受精卵做受体的原因：具有发育的全能性。 43、将目的基因导入微生物细胞：Ca处理法，目的：使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。Ca处理的细胞称为感受态细胞。 44、选用微生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,43、将目的基因导入微生物细胞：Ca处理法，目的：使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。Ca处理的细胞称为感受态细胞。 44、选用微生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 45、将目的基因导入水稻（单子叶植物）方法是：基因枪法或花粉管通道法 46、目的基因的检测与鉴定是检查基因工程是否做成功的一步。 47、目的基因检测与鉴定首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。 48、DNA分子杂交技术杂交的双方是：转基因生物的基因组DNA与用放射性同位素标记的目的基因；目的基因成功插入的标志是出现杂交带。,48、DNA分子杂交技术杂交的双方是：转基因生物的基因组DNA与用放射性同位素标记的目的基因；目的基因成功插入的标志是出现杂交带。 49、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交技术。杂交的双方是：转基因生物的mRNA与用放射性同位素标记的目的基因；目的基因成功转录的标志是出现杂交带。 50、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原抗体杂交技术。目的基因已形成蛋白质产品的标志是出现杂交带。 51、以上三种是分子水平上的检测。 52、有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫或抗病的接种实验、基因工程产品与天然产品功能进行活性比较等。 53、目的基因成功表达的标志：受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质（具体题目写出具体的蛋白质）。,52、有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫或抗病的接种实验、基因工程产品与天然产品功能进行活性比较等。 53、目的基因成功表达的标志：受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质（具体题目写出具体的蛋白质）。 54、从结构上分析，为什么不同生物的DNA能够连接在一起？具有共同的DNA双螺旋结构同种限制酶切割后形成的粘性末端相同（或粘性末端可以碱基互补配对） 55、目的基因能在受体细胞中表达的原因？不同的生物共用一套遗传密码,1、基因工程什么水平上进行设计和施工的？又叫做？ 2、基因工程的基本工具？ 3、限制酶来源？ 4、限制酶的功能？ 5、限制酶切割的结果？ 6、DNA连接酶功能？ 7、连接两种末端的是哪种DNA连接酶？ 8、DNA聚合酶的作用部位? 9、运载体具备的条件? 10、基因工程常用的载体? 11、质粒的特征？ 12、基因工程的基本操作程序？ 13、目的基因一般是指什么？ 14、获取目的基因的方法？人工合成法包括哪两种？ 15、取原核细胞的目的基因方法一般是？ 16、获取真核细胞的目的基因一般是？,17、基因文库包括哪两种？部分基因文库（cDNA文库）包含了多少基因？（课本第8页图16） 18、课本第10页生物技术资料卡：基因文库的构建，cDNA文库是如何构建的的？两种基因文库的主要区别有哪些？ 19、PCR原理是？ PCR的前提是？PCR条件？ 22、PCR过程用到的酶是什么？ 23、如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过什么用化学方法直接人工合成。 24、已知某蛋白的氨基酸系列，获得目的基因的方法？ 25、已获得某蛋白的mRNA，通过什么方法获取目的基因？该过程获得的目的基因有启动子、终止子、内含子么？ 26、基因工程的核心是？ 27、基因表达载体的组成？ 28、构建基因表达载体的工具酶？ 29、构建基因表达载体的目的是？,30、启动子作用？终止子作用？ 31、32、标记基因的作用？ 33、基因表达载体构建方法？ 34、为什么选用两种限制酶切割目的基因？ 35、处理目的基因和载体的限制酶一般是相同的限制酶的目的？ 36、什么是转化？ 37、将目的基因导入植物细胞选择什么样的细胞做受体细胞，导入方法是？ 38、农杆菌转化法原理？ 39、为什么要把目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上？ 40、导入目的基因的植物体细胞培育成完整植株可通过什么技术？ 41、将目的基因导入动物细胞的方法及受体细胞是？ 42、选受精卵做受体的原因？ 43、将目的基因导入微生物细胞的方法是？,44、选用微生物作为受体细胞的优点？ 45、将目的基因导入水稻（单子叶植物）方法是？ 46、什么是检查基因工程是否做成功的一步？ 47、目的基因检测与鉴定首先要检测什么？采用什么方法检测？ 48、DNA分子杂交技术杂交的双方是？目的基因成功插入的标志是？ 49、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，采用的方法是？杂交的双方是？目的基因成功转录的标志是？ 50、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用的方法是？目的基因已形成蛋白质产品的标志是？ 51、以上三种是什么水平上的检测？ 52、有时还需进行什么水平的鉴定？如抗虫或抗病的接种实验、基因工程产品与天然产品功能进行活性比较等。 53、目的基因成功表达的标志：？ 54、从结构分析为什么不同生物的DNA能够连接在一起？ 55、目的基因能在受体细胞中表达的原因？,