2022年pda培养基的配制方法流程 .pdf

1. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA培养基 ) 马铃薯 ( 去皮)200g 葡萄糖20g 琼脂20g 水1000mL pH值自然PDA培养基配制注意事项1. 培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养 24h，无菌生长者方可使用。2.PDA培养基一般不需要调pH 。对于要调节 pH的培养基，一般用 pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH 或 lmol/LHCL 溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH 或 HCl 溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。3. 培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。4. 培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L 培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。15:49:27 太珥日2016-4-26 15:49:27 PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。它属于固体培养基、半合成培养基。PDA 培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。PDA培养基的配制(1) 称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用 2 层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2) 加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂 1520g(提前搞碎 ) ，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。(3) 分装按实训要求， 将配制的培养基分装入试管或500ml 三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页，共 3 页 - - - - - - - - - 分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜; 半固体培养基以试管高度的1/3 为宜，灭菌后垂直待凝。(4) 加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。(5) 包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸， 以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞， 其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。母种培养基的配制同一种菌类培养基的配方虽然有多种多样，但必须含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱度。马铃薯、葡萄糖、琼脂作为各类母种的培养基最为普遍，菌丝都能正常生长。现将常用的培养基配方和配制方法举例介绍。1. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA培养基 ) 马铃薯 ( 去皮)：200g 葡萄糖： 20g 琼脂： 20g 水：1000mL pH值：自然2. 马铃薯蔗糖琼脂培养基 (PSA培养基 ) 马铃薯 ( 去皮)：200g 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页，共 3 页 - - - - - - - - - 蔗糖： 20g 琼脂： 20g 水：1000mL pH值：自然以上两种培养基广泛应用于各种菇、耳、猴头类食用菌的培养。 其具体制作方法是：将 200g马铃薯去皮，去芽眼，切成小条放入铝锅中，加入1000mL水，煮沸2030 分钟左右至马铃薯软而不烂时，用68 层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至 1000mL ，加入琼脂熔化，再加入糖搅拌均匀，趁热分装于试管中。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页，共 3 页 - - - - - - - - -