《体内药物分析实验》课程教学大纲（本科）.docx

体内药物分析实验（Bio-pharmaceutical Analysis Experiments）课程代码：16410047学分：1.0学分学时：32先修课程：分析化学实验B、药物分析实验A适用专业：药学专业、药物制剂专业教材或实验指导书：药物分析实验自编讲义一'课程性质与课程目标（-）课程性质体内药物分析是药学各相关专业教学计划中设置的专业课程，是实践性、技术性、应用性很强 的方法学科，其实验课程是教学中不可缺少的重要组成部分，是培养学生掌握基本操作技能和创新 能力的重要教学环节。通过实验巩固和加深学生对体内药物分析理论知识的理解，掌握生物样品（血 样、尿样）的预处理方法，掌握体内药物分析的常规分析方法（紫外分光光度法和高效液相色谱法） 的基本原理及操作，熟悉实验装置的结构、性能和操作步骤，培养学生独立思考的能力，发现并解 决问题的能力及实事求是的科学态度。（二）课程目标1.知识方面：课程目标1.1生物样品（血样、尿样）的预处理方法；课程目标1. 2紫外分光光度法的基本原理及使用；课程目标1. 3高效液相色谱法的基本原理及使用；课程目标1.4荧光分光光度法的基本原理及使用；2.能力与素质方面：课程目标2.1具备采集各类生物样品并合理进行预处理的能力；课程目标2. 2掌握常规分析仪器的工作原理及操作能力；课程目标2. 3具备独立完成实验数据的测定、分析和整理的能力；课程目标2. 4对实际工作中出现的问题能独立思考并解决问题的能力；二、本课程开设的实验项目注：1.类型：指验证性、综合性、设计性等;编号实验项目名称学时类型要求支撑的课程目标1紫外法测定扑热息通尿药浓度8综合性必做1. 1, 1. 2, 2. 1, 2. 2,2.3, 2.42双波长法测定氨茶碱的血药浓度8综合性必做1. 1, 1.2, 1.4, 2. 1,2. 2, 2. 3, 2.43HPLC法测定药物在小鼠体内的血药浓度8综合性必做1. 1, 1.3, 2. 1, 2.2,2.3, 2.44HPLC法测定药物在小鼠体内的组织分布8综合性选做1. L 1. 3, 2. 1, 2.2,2. 3, 2.45锹离子荧光增敏法检测恩诺沙星及其代谢物环内沙星8综合性选做1. 1, 1.4, 2.1, 2.2,2.3, 2.42.要求：指必做、选做。实验1.紫外法测定扑热息通尿药浓度(1)目的要求掌握扑热息痛尿药浓度的测定原理及方法；掌握扑热息痛尿药浓度的测定；(2)方法原理扑热息痛水解生成对氨基酚，对氨基酚在次漠酸钠的存在下，能与苯酚产生反应，生成靛兰染 料。(3)主要实验仪器及原料(略)(4)掌握要点尿样的预处理方法及注意事项；紫外分光光度法的使用及注意事项(5)实验内容尿药标准曲线的绘制；尿药浓度的测定；药时曲线的制备实验2.双波长法测定氨茶碱的血药浓度(1)目的要求了解氨茶碱学药浓度测定的意义；掌握血清样品的一般预处理方法；掌握氨茶碱血药浓度的测 定原理及方法。(2)方法原理茶碱偏酸性，因此在酸性条件下，血清中的茶碱可用有机溶媒提出，并同时沉淀血清蛋白，再 用碱液把茶碱自有机溶媒中提出，然后进行紫外测定，采用双波长法，即测定波长在274nm和波长298nm处的吸收度差值来定量。(3)主要实验仪器及原料(略)(4)掌握要点家兔血样的采集及注意事项；血清样品的制备及注意事项；双波长分光光度法的原理及应用。(5)实验内容标准曲线的绘制；血样的采集；血药浓度的测定。实验3. HPLC法测定药物在小鼠体内的血药浓度(1)目的要求掌握小鼠血浆样品的预处理方法；掌握HPLC法的基本原理及使用方法(2)方法原理高效液相色谱法的基本原理；内标法定量的原理(3)主要实验仪器及原料(略)(4)掌握要点小鼠血样的采集及血浆的制备，防止溶血的方法；内标法定量的原理和注意事项；HPLC使用注 意事项。(5)实验内容血样采集及血浆样品的制备；血药浓度的测定；数据处理及血药浓度经时曲线的绘制。实验4. HPLC法测定药物在小鼠体内的组织分布(1)目的要求掌握小鼠肝脏等组织脏器的预处理方法；掌握HPLC法的基本原理及使用方法(2)方法原理高效液相色谱法的基本原理；内标法定量的原理(3)主要实验仪器及原料(略)(4)掌握要点小鼠肝脏等组织脏器的采集及匀浆液的制备；样品与处理的方法及注意事项；HPLC使用注意事 项。(5)实验内容各组织脏器的采集及样品的预处理；组织中药物浓度的测定；数据处理及药物在组织中的分布。 实验5.钺离子荧光增敏法检测恩诺沙星及其代谢物环丙沙星(1)目的要求掌握血样和尿样的采集及预处理方法；掌握锹离子荧光增敏法检测的基本原理及实验注意事项。（2）方法原理恩诺沙星（或环丙沙星）有Q-酮酸结构，可与锢系离子中的钺（Tb3+）结合。恩诺沙星（或环 丙沙星）吸收外界给予的能量，再以能量转移的形式传给TV，,使之发出1V+特征荧光，在545nm处 的荧光强度最强。由于斯托克位移大，可有效排除制剂中的辅料、尿样和血样中内源性物质的干扰。（3）主要实验仪器及原料恩诺沙星原料药、恩诺沙星粉，氧化锹（Tb407）、盐酸、醋酸、醋酸钠（4）掌握要点血样（尿样）的采集及预处理；荧光分光光度计的使用。（5）实验内容激发光谱和发射光谱的测定；标准曲线的绘制；恩诺沙星粉含量测定；血药浓度或尿药浓度的 测定及数据处理。三' 考核与评定（-）实验项目考核要求.实验平时表现的要求（1）课前应做好预习，明确实验目的要求，弄懂实验原理及操作要点，每次实验课应有准备 地接受指导教师的提问。（2）在实验过程中严格遵守操作规程，规范实验操作，注意基本操作与实验现象的观察分析。（3）实验完毕做好各自实验台的清洁工作，公用试剂和仪器用后及时归位，玻璃器皿用后洗 净。1 .实验报告的要求按规定的格式独立完成实验报告，对实验现象和实验数据进行整理、分析，并根据实验结果 做出明确的结论。实验报告中要体现原始记录的书写。（二）实验课程成绩评定实验课程成绩的评定由两部分组成，其中平时表现占总成绩的50%,实验报告成绩占总成绩的50%,取所有实验成绩平均值作为最终成绩。考核形式考核要求考核权重备注实验报告报告书写规范、认真，数据处理结果准确50%平时表现预习认真，操作规范，结果正确50%注：1.考核形式包括实验报告、平时表现（预习、操作）、实验课程考试、答辩等;2.可根据专业课程实际情况进行适当安排或补充。四、大纲说明本实验课程安排在第6学期进行。前期应完成基础分析化学实验、药物分析实验课程的学习。实验内容可根据该学期药物储备情 况及动物健康情况略有安排。参考书目：体内药物分析，姚彤炜，浙江大学出版社，2012年，第1版药物分析实验，孙立新，中国医药科技出版社，2012年，第1版2016年7月1日