霉菌污染的处理方法.docx

避开真菌污染的几个措施：1、严格的无菌操作；2、无菌间定期清扫、消毒，保持干燥；3、各种培育液、培育器皿的严格消毒；4、温箱中消毒水中放置过饱和的消毒的磷酸氢二钠或者硫酸铜。假如细胞好养或有存货的话，干脆从头作起，要是舍不得可以用PBS液洗3遍，在新的培 基中加两性霉素。比方霉菌包子感染可能这样，由于我的前面一批细胞就这样，培育基不混，细胞内有许多空 泡，且可见一些比细胞大得多无明显细胞结构的“圆形细胞”里面有许多小的空泡，假如是这 样的话，那就是霉菌污染（1）操作：做试验时应养成无菌观念（操作前用70%酒精榛手，试验时如吸管等物 品接触到台面应马上更换，并隔3-5分钟用酒精灯烧灼吸管）。（2）超净台：假如超净台使用时间过长（3-5年以上），应准时更换滤板。消毒的紫 外灯管也按时更换。在操作前用酒精或新洁尔灭榛拭台面。（3）孵箱：怀疑孵箱污染时，将孵箱关掉，然后用上述消毒剂消毒，之后用移动紫外 消毒车将紫外灯插入孵箱照耀30分钟以上。zrzhong6519：还有留意孵箱内的水盆，常常检查，如觉察有絮状物，马上更换灭 菌水，之前用75%乙醇擦拭，其次天要准时观察是否彻底，不彻底在按上述方法再来。天气酷热，霉菌也开头肆无忌惮的繁殖。想想去年这个时候，也被霉菌折腾得郁闷无 比。还好后来掌握住了。阅历如下：1、细胞培育室大扫除，水池、吸引器中的引流瓶等无一不是霉菌孳生的地方。然后室 内进行紫外灯照耀杀菌。2、培育箱消毒时是否留意了里面的几层钢板。紫外线照耀时得拿出来。我当时干脆就 放到180度烤箱里考过夜。3、处理培育箱时还有个要考虑的地方，培育箱内的细胞培育瓶。重新放回去的时候得 用酒精将瓶周搽洗数次，能换掉更好。4、培育箱搽洗时重点在箱底的四个角落。整个培育间用福尔马林和高镒酸钾熏蒸，孵箱内部包括托盘等全部用苯酚搽洗，封闭2天，基 本就没问题!但培育良好的无菌观念是前提！可能的缘由：1、天气太热，试验者在培育和接种或者换液时出汗（有空调稍好，但是手也出汗）。2、培育间里可能暗藏污染原。3、留意培育箱（这点最重要），认真检查培育箱里的隔板的下面，有可能有霉菌斑。（我遇到过）4、培育基污染多数是配置过程中造成的，认真检查配置过程用到的器具。5、血清过期一个月，假如保存的好应当没有问题，但是保存不好，新来的血清，用一 次就可能污染。血清过期和污染是否有必定的联系不好说，个人体会觉得其联系不大。解决方法：1、彻底清洁培育间，显微镜室。然后，紫外灯多照耀一端时间消毒空气。2、彻底清洁培育箱：（1）每个隔板认真清洗，火烤。（2）培育箱大换水，换成新奇 洁净的蒸储水。（3）培育箱内壁用酒精棉球或者稀过氧乙酸认真擦洗。（4）紫外灯长时 间照耀（一天）。3、试验用器械消毒：留意消毒时间和压力，有必要检查压力锅和校正压力表是否精确O4、一次性手套在翻开使用前一天放入无菌间照耀消毒。5、假如用双抗，应当现用现配。6、留意过滤器的消毒灭菌。7、过期的血清，可以做培育检查是否被污染。如有怀疑，建议不用。8、检查培育间和超净台的通风过滤网，假如脏了，需要更换。总之，潮湿闷热天气培育细胞特别简单污染，必需留意每一个环节。真菌多数是空气 中悬浮污染，所以除紫外线照耀外，每次进出培育间要用来苏或者新洁尔灭搽地，削减空气 悬浮颗粒及细菌1、用碘伏认真擦洗浮箱和操作台，地面，然后用紫外灯照1小时2、处理完细胞放回浮箱是用酒精棉擦培育瓶的底部避开污染，我认为：1、每次做完试验，超净台要用酒精喷擦；翻开紫外线照耀；2、严格无菌操作；3、孵箱定期清洗，换水；4、每次观看细胞后，酒精喷瓶口;1、我操作的时候，总是在灭菌同时超净台外侧窗口处，喷一些医用酒精，以掌握四周 四周的空气中漂移菌。2、在做完试验后，超净台里喷一遍医用酒精，然后严格根据紫外灭菌等操作。3、还有，超净台长时间使用了的话，要把里面的防尘过滤网拆下来，用吸尘器或者 其他东西吸净，洗净。