动物细胞融合与单克隆抗体的制备课件.ppt

动物细胞融合与单克隆抗体抗体动物细胞融合与单克隆抗体抗体授课教师：武金兰牙克石市第五中学人民教育出版社 生物选修3 高二下学期治疗治疗HER2过度表达的转过度表达的转移性乳腺癌移性乳腺癌 用于血浆中的狂犬病毒和抗体水平的检测用于血浆中的狂犬病毒和抗体水平的检测 一、动物细胞融合一、动物细胞融合 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 动物细胞融合过程示意图动物细胞融合过程示意图不同DNA的两个细胞 灭活的病毒有丝分裂两个完整的杂交细胞已成功的动物细胞融合的实例已成功的动物细胞融合的实例 酵母菌与鸡的血红细胞酵母菌与鸡的血红细胞 人的腹水癌细胞与胡萝卜细胞人的腹水癌细胞与胡萝卜细胞 人的纤维肉瘤细胞与小鼠畸胎瘤细胞人的纤维肉瘤细胞与小鼠畸胎瘤细胞 抗原抗原刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏传统血清抗体的制备途径：传统血清抗体的制备途径：二、单克隆抗体二、单克隆抗体动物体动物体传统血清抗体的制备的缺陷：传统血清抗体的制备的缺陷：化学性质单一、纯化学性质单一、纯度高、特异性强度高、特异性强单个单个B B淋巴细胞通淋巴细胞通过克隆形成细胞群过克隆形成细胞群单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念二、单克隆抗体二、单克隆抗体一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能够无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能够无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞既能分泌一种既能分泌一种特异性抗体，特异性抗体，又能无限增殖又能无限增殖科学家米尔斯坦和科勒的设计方案：科学家米尔斯坦和科勒的设计方案：怎样解决怎样解决B淋巴细胞不能无限增殖的难题呢？淋巴细胞不能无限增殖的难题呢？ 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 注射抗原注射抗原B B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选，继续培养筛选，继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体科勒科勒米尔斯坦米尔斯坦荣获荣获19841984年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖单克隆抗体制备的过程单克隆抗体制备的过程1、细胞融合后得到哪些杂交细、细胞融合后得到哪些杂交细胞胞 ？哪种是我们需要的？哪种是我们需要的？骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞、B B淋巴细胞与淋巴细胞与B B淋巴细胞、骨髓瘤细胞与淋巴细胞、骨髓瘤细胞与B B淋巴细胞。淋巴细胞。2、对得到的杂交瘤细胞需要做、对得到的杂交瘤细胞需要做哪些处理？哪些处理？筛选、克隆化培养、专一抗体检验筛选、克隆化培养、专一抗体检验3、在单克隆抗体制备的过程中要、在单克隆抗体制备的过程中要经过几次筛选，作用是什么？经过几次筛选，作用是什么？第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞第一次筛选：筛选出杂交瘤细胞第二次筛选：再筛选出能产生特第二次筛选：再筛选出能产生特异性抗体的细胞群异性抗体的细胞群第一次第一次筛选筛选第二次第二次筛选筛选单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。，优越性十分明显。应用主要有：应用主要有：1 1、临床诊断、临床诊断2 2、作为载体，运载抗癌药物，形成、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹生物导弹”治疗肿治疗肿瘤瘤资料资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内体内“病灶病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。及心肌梗塞的诊断。 生物导弹=单克隆抗体+化学药物 （导向作用） （杀死癌细胞）本课小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法 灭活的病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势