微生物学考试重点笔记(精华).doc

微生物学本章节学习重点：掌握：微生物、病原微生物和医学微生物学概念、病原微生物的种类微生物:是广泛存在于自然界中的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电 子显微镜放大数百倍、数千倍甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称。微生物的分类：1）非细胞型微生物 2）原核细胞型微生物 3） 真核细胞型微生物本章节学习重点：掌握或熟悉细菌的基本形态、基本结构与特殊结构的特征与功能；熟悉细菌生长繁殖的条件与繁殖方式、人工培养方法以与与细菌鉴别和致病有关的代谢产物。细菌的结构1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞浆与核质。2、特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌细胞壁比较特 征 G+菌G-菌肽聚糖组成 聚糖、侧链、交联桥 聚糖、侧链 厚度 厚，2080nm 薄，510nm 肽聚糖含量多，可占胞壁干重5080% 少，占胞壁干重1020% 肽聚糖层数多，可达50层 少，13层 交联方式侧链间以肽桥交联 侧链间以肽键交联 交联率75100% 25%以下 结构三维空间（立体结构） 二维空间（平面结构） 强度较坚韧 较疏松 磷壁酸+外膜+细胞壁结构显著不同，导致G+菌与G-菌染色性、抗原性、致病性、对药物的敏感性等方面的很大差异细胞壁的功能:维持细菌的外形，对细菌起保护作用；参与细胞内外物质交换；具抗原性等。细胞膜的功能:细胞膜有选择性通透作用，与细胞壁共同完成菌体内外的物质交换。膜上有多种呼吸酶，参与细胞的呼吸过程。膜上有多种合成酶，参与生物合成过程。细菌细胞膜可以形成特有的结构。 荚膜的特点与功能：定义:细胞壁外一层透明黏液状物质。化学成分: 多数：多糖 少数：多肽观察：特殊染色法、 墨汁负染法；功能：（1）抗干燥作用：贮留水分（2）形成生物膜：荚膜多糖可使细菌彼此之间粘连，也可粘附于组织细胞或物体表面形成生物膜（3）抗吞噬作用：能保护细菌免受溶菌酶、补体、抗体、抗菌药物等有害物质的损伤，保护细菌抵抗宿主细胞的吞噬与消化作用，从而成为侵袭力的组成之一。（4） 荚膜抗原：分型依据。鞭毛的特点与功能:定义：某些细菌菌体表面附着有细长呈波状弯曲的丝状物化学成分:蛋白质 观察：染色加粗法；半固体培养基穿刺法；功能：运动器官致病性有关，如霍乱弧菌可以通过其鞭毛的运动穿过小肠粘液层，到达细胞表面生长繁殖，产生毒素而致病抗原性，可帮助鉴别细菌菌毛的特点与功能：定义:多数革兰阴性菌与少数革兰阳性菌的菌体表面有比鞭毛更细、更短的丝状物特征：菌毛只有在电子显微镜下才能见到化学成分:主要是蛋白质（菌毛蛋白)种类: 普通菌毛 性菌毛普通菌毛(ordinary pilus)特点：数目多：可 达百余根 细：直径仅为38nm，长0.22m。功能：黏附结构，抗原性（F抗原）：菌毛疫苗。性菌毛特点 ：仅见于少数革兰阴性菌 较普通菌毛粗大，数量少，一个菌只有14根。 由一种称为致育因子 (Fertility factor，F factor)的质粒编码 带有性菌毛的细菌 F+菌或雄性菌 无性菌毛细菌 F-菌或雌性菌。功能： F+菌可借助性菌毛与F-菌株进行遗传物质的接合转移 性菌毛也是一些噬菌体的吸附位点。芽孢的特点与功能：定义:细菌在一定环境条件下，胞浆脱水浓缩，在菌体内形成的多层膜状结构的圆形或卵圆形小体。 形成条件：缺乏营养物质，有害代谢产物堆积：休眠状态，不是繁殖方式功能:：鉴别细菌：大小、形状、菌体内的位置 对细菌起保护作用：多层膜包绕，通透性降低 作为灭菌是否彻底的指标：抵抗力强芽胞的特性：对高温、干燥、辐射、化学药物有强大的抵抗力。 含水量低、壁厚而致密，通透性差,不易着色，折光性强。芽胞内新陈代谢几乎停止，处于休眠状态，但保持潜在萌发力。一个芽胞萌发只产生一个繁殖体的细菌。本章节学习重点：1.掌握细菌的营养、生长繁殖的条件与繁殖方式。2.熟悉医学上具有重要意义的代谢产物。3. 掌握细菌在培养基内的生长现象 ，菌落的概念。4.了解细菌群体生长规律。细菌生长繁殖的条件1、营养物质：一般细菌所需要的营养物质有水分、无机盐类、蛋白胨(或氨基酸)和糖等。对营养要求较高的细菌还需要某些生长因子。这些营养物质是细菌进行新陈代谢的基础。人工培养细菌时，用培养基满足细菌对营养物质的需要。2、PH：营养物质的吸收、分解以与能量的产生，都需要酶来参与反应。酶活性必须在一定的酸碱度和温度下才能发挥作用。绝大多数细菌和放线菌生长最适宜的pH为中性或弱硷性(pH7.0-7.6)。个别细菌如霍乱弧苗在pH为7.8-8.0中生长最好，所以常利用碱性培养基(pH8.4-9.2)分离霍乱弧菌，因为碱性条件能抑制其它细菌生长，起到抑制作用。3、温度：细胞生长的温度极限为-790。各类细菌对温度的要求不同，可分为嗜冷菌,最适生长温度为（1020）；嗜温菌,2040;嗜热菌,在高至5660生长最好。病原菌均为嗜温菌，最适温度为人体的体温，即37，故实验室一般采用37培养细菌。有些嗜温菌低温下也可生长繁殖，如5冰箱内，金黄色葡萄球菌缓慢生长释放毒素，故食用过夜冰箱冷存食物，可致食物中毒。 4、气体环境：氧的存大与否和生长有关，专性需氧菌仅能在有氧条件下生长；微需氧菌：在低氧压（5-6）生长最好，氧压大于10对其有抑制作用。如空肠弯曲菌、幽门螺杆菌。兼性厌氧菌：兼有需氧呼吸和发酵两种功能，不论在有氧或无氧环境中均能生长，以有氧时较好。大多数病原菌属此类.专性厌氧菌有的只能在无氧环境下生长；而大多数病原菌在有氧与无氧的条件下均能生存。一般细菌代谢中都需CO2，但大多数细菌自身代谢所产生的CO2即可满足需要。有些细菌，如脑膜炎双球菌在初次分离时需要较高浓度的CO2（510%），否则生长很差甚至不能生长。 营养物质：1水：细菌湿重的8090%为水。细菌代谢过程中所有的化学反应、营养的吸收和渗透、分泌、排泄均需有水才能进行。2碳源：各种无机或有机的含碳化合物（CO2、碳酸盐、糖、脂肪等）都能被细菌吸收利用，作为合成菌体所必需的原料，同时也作为细菌代谢的主要能量来源。致病性细菌主要从糖类中获得碳，己糖是组成细菌内多糖的基本成分，戊糖参与细菌核酸组成。 3氮源：从分子态氮到复杂的含氮化合物都可被不同的细菌利用。但多数病原菌是利用有机氮化物如氨基酸、蛋白胨作为氮源。少数细菌（如固氮菌）能以空气中的游离氮或无机氮如硝酸盐、铵盐等为氮源，主要用于合成菌体细胞质与其他结构成分。4无机盐：钾、钠、钙、镁、硫、磷、铁、锰、锌、钴、铜、钼等是细菌生长代谢中所需的无机盐成份。除磷、钾、钠、镁、 硫、铁需要量较多外，其他只需微量。各类无机盐的作用为：构成菌体成份；调节菌体内外渗透压；促进酶的活性或作为某些辅酶组分；某些元素与细菌的生长繁殖与致病作用密切相关 5生长因子：很多细菌在其生长过程中还必需一些自身不能合成的化合物质，称为生长因子。生长因子必须从外界得以补充，其中包括维生素、某些氨基酸、脂类、嘌呤、嘧啶等。细菌的生化反应：细菌的分解代谢产物因各种细菌具备的酶不完全相同，而有所差异。各代谢产物可通过生化试验的方法检测，通常称为细菌的生化的反应。糖代谢测定糖发酵试验：细菌对各种糖的分解能力与代谢产物不同，可借以鉴别细菌。一般非致病菌能发酵多种单糖，如大肠杆菌能分解葡萄糖和乳糖，产生甲酸等产物，并有甲酸解氢酶，可将其分解为CO2和H2，故生化反应结果为产酸产气，以“”表示。伤寒杆菌分解葡萄糖产酸，但无解氢酶。故生化结果为产酸不产气，以“+”表示。伤寒杆菌与一般致病菌大都不能分解乳糖，以“-”表示。 甲基红试验：产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液pH5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液呈酸性pH5.4，指示剂甲基红呈红色，称甲基红试验（Methyl red test,MR）阳性。VP试验：大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖，为区分两菌可采用VP试验与甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称VP阳性。大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，VP阴性。枸橼酸盐利用试验（Citrate ultiliazation test）:能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，同时分解培养基的铵盐生成氨，由此使培养基变为碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝，此为枸橼酸盐利用试验阳性。蛋白质代谢测定（1）吲哚试验（Indol test）：含有色氨酸酶的细菌（如大肠杆菌、变形杆菌等）可分解色氨酸生成吲哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，与吲哚结合，形成玫瑰吲哚，呈红色，称吲哚试验阳性。 （2）硫化氢试验：变形杆菌、乙型副伤寒杆菌等能分解含硫氨基酸如胱氨酸、甲硫氨酸等，生成硫化氢。在有醋酸铅或硫酸亚铁存在时，则生成黑色硫化铅或硫化亚铁，可借以鉴别细菌。3尿素分解试验 变形杆菌具有尿素酶，可分解尿素产生氨，培养基呈碱性，以酚红为指示剂检测呈红色，由此区别于沙门氏菌。吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）、枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于鉴定肠道杆菌，合称之为IMViC试验。大肠杆菌呈“+ +”，产气杆菌为“+ +”。合成代谢产物1热原质：热原质即菌体中的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌产生的，是细胞壁的脂多糖（LPS)。注入人或动物体内能引起发热反应，故名热原质。2.毒素与侵袭性酶：毒素分为外毒素和内毒素。外毒素毒性强于内毒素。3.色素：分脂溶性和水溶性，有助于鉴别菌种。4抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死其他微生物或肿瘤细胞的物质。5.细菌素：6,维生素（二）根据培养基的物理性状，可分为：液体培养基、固体培养基、半固体培养基。细菌在培养基中的生长情况1液体培养基：兼性厌氧菌生长后使液体呈均匀混浊状态。链球菌等少数细菌可沉淀生长。专性需氧菌则多生长在液体表面，形成菌膜。2固体培养基：将细菌划线接种于固体培养基表面，在合适温度下培养一段时间后，在培养基表面出现由单个细菌分裂繁殖而形成的、肉眼可见的细菌集团，称为菌落挑取一个菌落转种到另一个新鲜培养基中则可获得该菌的纯种，称为纯培养。菌落的概念：将细菌划线接种于固体培养基表面，在合适温度下培养一段时间后，在培养基表面出现由单个细菌分裂繁殖而形成的、肉眼可见的细菌集团，称为菌落（colony）。本章节学习要点：1.掌握消毒、灭菌、无菌、无菌操作和防腐的概念。2.熟悉消毒灭菌的方法：物理法（热力灭菌（原理）：干热灭菌法，湿热灭菌法（巴氏消毒，高压蒸汽灭菌）；紫外线杀菌；滤过除菌）；3.了解化学法（常用化学消毒剂的种类, 用途） （P3742）消毒灭菌的概念：灭菌：杀灭物体上所有的微生物（包括细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物）的方法。消毒：杀灭物体上或环境中的病原微生物的方法。防腐:防止或抑制微生物生长繁殖的方法。无菌:物体上或容器内无活菌存在的意思。无菌操作是防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。消毒灭菌的方法 一般可分为物理方法和化学方法物理法有热力、辐射、滤过、干燥和低温等。化学法主要是使用化学消毒剂。热力灭菌原理：主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。此外，高温亦可导致胞膜功能损伤而使小分子物质以与降解的核糖体漏出。热力灭菌是最可靠而普遍应用的灭菌法，包括湿热灭菌和干热灭菌法。在同样的温度下，湿热的杀菌效果比干热好，其原因有：蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，湿热中细菌菌体蛋白质易于凝固。湿热灭菌过程中蒸气放出大量潜热，加速提高温度。湿热的穿透力比干热强。 高压蒸汽灭菌法：是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。其灭菌条件为：压力103.4KPa（1.05Kgcm2），温度121.3，1520分钟。适用于耐高温、耐水物品的灭菌。辐射杀菌法：紫外线杀菌紫外线：是一种低能量的电磁辐射，波长范围为240280nm,最适的波长为260nm，这与DNA吸收光谱范围相一致。其杀菌原理是紫外线易被核蛋白吸收，使DNA的同一条螺旋体上相邻的碱基形成胸腺嘧啶二聚体，从而干拢DNA的复制，导致细菌死亡或变异。紫外线的穿透能力弱，不能通过普通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面与空气、手术室、无菌操作实验室与烧伤病房，亦可用于不耐热物品表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛均有损伤作用，使用时应注意防护。滤过除菌法:将液体或空气通过含有微细小孔的滤器，只允许小于孔径的物体如液体和空气通过，大于孔径的的物体不能通过。主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、支原体和细菌的L型。化学消毒剂按其杀菌能力可分为三类：1、高效消毒剂：可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。适用于不能耐受热力灭菌，但要进入人体内的物品，如内窥镜、塑料外科器材等的消毒。1）含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯异氰酸尿酸钠、漂白粉等，用于物品表面、饮用水、皮肤、地面、排泄物和污水等消毒，对金属制品有腐蚀作用。2）过氧化物消毒剂：过氧化氢、过氧乙酸、二氧化氯等，适用于皮肤、物品表面、空气的消毒。3）醛类消毒剂：戊二醛，适用于精密仪器、内窥镜的消毒。4）环氧乙烷2、中效消毒剂：不能杀灭细菌芽胞，但能杀灭细菌繁殖体、真菌和大多数病毒。适用于纤维内窥镜、喉镜、阴道窥镜、麻醉器材等。1）含碘消毒剂：碘酊、碘伏等，多用于皮肤粘膜、体温计与其他物品表面的消毒。2）醇类消毒剂：乙醇、异丙醇，适用于皮肤、医疗护理器械的消毒与浸泡体温计。3、低效消毒剂：可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀灭细菌芽胞、结核杆菌与某些抵抗力强的真菌和病毒。1）季铵盐类消毒剂：苯扎溴铵（新洁尔灭）用于皮肤、粘膜、物品表面、地面的消毒。2）氯已定（洗必泰）：用于皮肤、粘膜、物品表面、地面的消毒。3）高锰酸钾：用于皮肤、粘膜冲洗、浸泡消毒以与食（饮）具、蔬菜、水果的消毒。本章节学习要点：1、掌握细菌变异机理：表型变异（诱导酶）和基因型变异（突变，基因的转移和重组包括转化、转导、溶原性转化和接合）；掌握细菌耐药性的定义2、熟悉常见细菌变异现象与其在医学实践上的意义。熟悉细菌耐药的控制策略；3、了解噬菌体、溶原性细菌和溶原性状态的概念；了解抗菌药物的种类，耐药的产生机理。遗传变异的物质基础：1.染色体 2.质粒 3.转座因子 4.整合子 5.噬菌体基因组基因转移与重组的方式：转化、转导、接合、溶源性转换、原生质体融合。一、转化转化是受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段，通过与染色体重组，获得了供体菌的部分遗传特性。转化的DNA可以是细菌溶解后释放的，也可用人工方法抽提而获得。 二、接合细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质从供体菌转给受体菌的方式称为接合。这一过程不是在所有细菌之间均可发生。只有那些具有F因子或类似F因子传递装置的细菌才能接合。接合中，有F因子的细菌相当于雄性菌。因此接合看作是细菌的有性生殖过程，又称为细菌杂交。除F因子外，耐药性质粒R因子中有些亦可通过接合而传递，另一些则不能传递。可通过接合转移的这类R质粒中除有耐药决定子（r-det）外，还有耐药传递因子(RTF)。RTF决定性菌毛的形成，通过接合而传递（如肠道杆菌）。如果只有r-det而无RTF则不能通过接合传递耐药性（如金葡菌）。必须经传递性质粒带动、噬菌体转导或以转化方式转入受体菌。三、转导以噬菌体为媒介，把供细菌的基因转移到受体菌内，导致后者基因改变的过程称为转导。 分为普遍性转导和局限性转导。四、溶原性转换或原生质体融合有些温和噬菌体携带的基因接在细菌染色体上，可相当于遗传物质，也能决定细菌的某些特性。由噬菌体基因决定细菌的某些生物学特性称为溶原性转移。 原生质体融合：将两者不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行融合的过程。细菌的耐药性变异：病原微生物对某种药物由敏感变成耐药的变异，称为耐药性或抗药性变异。细菌耐药性获得：突变、转化、转导、接合细菌耐药性转移：转化、转导、接合本章节学习要点：掌握：人体正常菌群的概念和意义；条件致病菌的概念和致病的条件；侵袭力的概念；细菌致病的物质基础；外毒素和内毒素的性质比较；感染的类型。几种血症的概念。熟悉：传染、致病性、病原微生物的概念；感染发生的条件；感染的来源（外源、内源）；医院感染概念和来源; 医源性感染的概念；了解：抗感染免疫类型。P6876正常菌群的概念：在人类的体表和与外界相连通的腔道，存在着不同种类与数量的微生物，一般情况下对人体无害，称为正常微生物群（正常菌群） 。功能：1生物拮抗：寄居的正常菌群发挥生物屏障作用。拮抗机制：受体竞争、产生有害代谢物产物、营养竞争。2营养作用正常菌群参与宿主的物质代谢、营养物质转化和合成。如肠道内脆弱类杆菌和大肠杆菌可产生Vit K、B，乳杆菌和双歧杆菌等可合成烟酸、叶酸与Vit B等。3免疫作用：正常菌群作为抗原既能促进宿主免疫器官的发育，又能刺激其免疫系统发生免疫应答，产生的免疫物质对具有交叉抗原组分的致病菌有一定程度的抑制和杀灭作用 4 抗衰老作用肠道正常菌群中的双歧杆菌、乳杆菌等许多细菌具有抗衰老作用条件致病菌：当正常菌群与宿主间的生态平衡失调时，不致病的正常菌群会成为机会致病菌而引起宿主发病。机会致病菌引起的感染常是慢性消耗性或免疫性疾病的致死原因。条件致病菌的致病条件：1、正常菌群的寄居部位改变2.宿主免疫功能低下3.菌群失调；大量长期使用抗生素细菌的致病作用：致病性：细菌对宿主感染致病能力。毒力：细菌致病能力的强弱。一般采用半数致死量（LD50）和半数感染量（ID50）作为测定毒力的指标。病原菌的致病作用与其毒力、侵入机体的数量、侵入途径与机体的免疫状态密切相关。构成细菌毒力的物质基础主要包括侵袭力和毒素侵袭力包括粘附素、荚膜、侵入性物质和细菌生物被膜等，主要涉与菌体的表面结构和释放的侵袭蛋白和酶类。毒素主要包括内毒素和外毒素。侵袭力的概念：指致病菌突破宿主皮肤、粘膜生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖扩散的能力。 荚膜粘附素 侵袭力 侵入性物质 毒力 细菌生物被膜 毒素 内毒素 外毒素区别要点外毒素内毒素来源G+菌与部分G-菌G-菌编码基因染色体基因或质粒或前噬菌体染色体基因存在部位从活菌分泌出，少数菌崩解后释出细胞壁组分，菌裂解后释出化学成分蛋白质脂多糖稳定性6080，30分钟破坏160,24h才被破坏毒性作用强，对组织器官有选择性毒害作用，引起特殊临床表现较弱，各菌的毒性效应相似，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等全身反应抗原性强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液处理脱毒形成类毒素弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛液处理不形成类毒素内毒素主要特点：1）产生于G-菌细胞壁2）化学性质为LPS3）对理化因素稳定；这一性质具有重要临床实践意义。4）毒性作用相对较弱，且对组织无选择性。5）不能用甲醛脱毒制成类毒素。内毒素主要生物学作用：1）发热2）白细胞反应：使白细胞数量显著增多。但伤寒杆菌内毒素使血循环中白细胞总数减少，机制不明。3）内毒素血症与内毒素休克P85感染类型(一)隐性感染(亚临床感染)：不出现或不明显的临床症状。因免疫力强、菌数量少、毒力弱。(二)显性感染：临床上根据病情缓急分为急性感染和慢性感染；根据感染部位和表现分为局部感染和全身感染。细菌全身性感染的类型：1）毒血症：菌不入血，外毒素入血，引起中毒症状。2）内毒素血症：G-侵入血流，并大量繁殖，崩解后释放大量的内毒素，或病灶内菌死亡，释放内毒素入血。3）菌血症：菌入血，但在血中一般不繁殖，短暂一过性经血循环到达体内适宜部位后在繁殖致病。如伤寒病早期。4）败血症：菌入血，在血中大量繁殖并产生毒素，引起严重的全身中毒症状，可出现高热、皮肤黏膜出血、肝脾肿大。5）脓毒血症：化脓性病原菌进入血流，在血中大量繁殖，并随血流转移到其他器官引起化脓性病灶。为多发性脓肿。革兰氏染色法：步骤：结晶紫 初 染 碘液 媒 染 酒精 脱 色 复红复染结果：紫色为G+，红色为G-。意义：鉴别细菌；研究致病性；指导临床用药。根椐革兰染色性不同，分为两类：革兰阳性球菌：有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等；革兰阴性球菌：有脑膜炎奈氏菌和淋病奈氏菌等。除球菌引起化脓性感染外，杆菌也会，如大肠杆菌，绿脓杆菌。本章节学习要点：掌握常见细菌的主要生物学性状、主要的发病原理与所致疾病以与特异性防治原则。了解一般微生物学检查法，掌握某些有特殊价值的诊断法。一、金黄色葡萄球菌（一）生物学性状1、形态与染色 ：球形，直径1um左右，不规则、葡萄串状排列。在液体培养基中生长后，常呈单个、成双或短链状排列。无鞭毛，无芽胞，一些金黄色葡萄球菌株可形成荚膜。革兰阳性，但在衰老、死亡或被中性粒细胞吞噬后常呈革兰阴性。 2. 培养特性：营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适温度是37，pH为7.4。在普通琼脂平板上可形成圆形、光滑、湿润、不透明、边缘整齐的凸起菌落。不同菌种产生不同脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色等，仅使菌落显色，培养基不变色。致病性葡萄球菌在血平板上还可产生3.生化反应：能缓慢发酵葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。致病菌株能分解甘露醇，其它菌株则不分解。触酶试验阳性，与链球菌相区别。4. 抗原构造 葡萄球菌含有荚膜多糖、蛋白质以与肽聚糖-磷壁酸复合物等重要结构。其中重要的抗原为葡萄球菌A蛋白（SPA），1）SPA：存在于细胞壁表面，90以上的金黄色葡萄球菌有此抗原。SPA与细胞壁肽聚糖共价结合，SPA可与人和多种哺乳动物血清中IgG（除IgG3）的Fc段发生非特异性结合，其Fab段则与相应抗原发生特异性结合.耐盐性强意义：（1）SPA可作为血清学和实验室诊断的重要试剂，作协同凝集试验，简易、快速检测多种细菌抗原（2）SPA与IgG结合后的复合物具有抗吞噬作用（与吞噬细胞的Fc受体争夺Fc段，降低了抗体的调理作用），促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物学活性。2）荚膜多糖：有利于细菌黏附。3）多糖抗原：存在于细胞壁，具有群特异性。5葡萄球菌分类： 根据色素和生化反应的不同，葡萄球菌分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌三种。6 .抵抗力：葡萄球菌对理化因素抵抗力强，为无芽胞菌中抵抗力最强。耐干燥、耐热，加热60加热1小时或8030min才被杀死。对许多抗菌药物易产生耐受（二）致病性1致病物质 金黄色葡萄球菌可产生多种侵袭性酶和外毒素，故毒力强。（1）凝固酶：绝大多数致病菌株产生此酶，非致病菌株一般不产生。此酶作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。凝固酶使周围血液或血浆中的纤维蛋白等沉积于菌体表面，一方面保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏，另一方面使葡萄球菌引起的感染易于局限化和形成血栓。（2）葡萄球菌溶血素作用：对有溶血作用，还对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用；溶血素抗原性强，经甲醛处理可制成类毒素。（3）杀白细胞素：杀伤中性粒细胞和巨噬细胞。白细胞的死亡成分可形成弄栓，加重组织损伤（4）肠毒素（enterotoxin）：除肠毒素F型外，均能引起急性胃肠炎，即食物中毒。当产毒菌株污染食物后，在2022经810h即可产生大量肠毒素。肠毒素耐热，10030min仍保存部分活性，能抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用。 （5）表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）：也称表皮溶解毒素（epidemolytic toxin），引起葡萄球菌烫伤样皮肤综合征，又称剥脱性皮炎，多见于新生儿、婴幼儿与免疫功能低下的成人（6）毒性休克综合征毒素1（TSST1）：能引起毒性休克综合征（TSS）TSST1是金黄色葡萄球菌在生长过程中分泌的一种外毒素。可引起发热、休克与脱屑性皮疹。其特点是起病急，高热、呕吐、腹泻、肌痛、猩红热样皮疹、心、肾功能衰竭引起的低血压，为累与多个器官的严重症候群。感染的特点：（1）侵袭性疾病： 1）皮肤与软组织感染：如毛囊炎、疖（一个毛囊与所属的皮脂腺感染）、痈（几个毛囊与所属的皮脂腺感染）、蜂窝织炎（疏松的结缔组织感染）、伤口化脓等，多由金黄色葡萄球菌引起，少数由表皮葡萄球菌引起。特点：其脓汁黄而粘稠，化脓灶多局限，与周围组织界限明显， 缘于血浆凝固酶。 2）内脏器官感染：有肺炎、胸膜炎、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等。3）全身性感染：由于外力挤压疖、痈，或过早切开未成熟的脓肿，其局限性被破坏，细菌可以淋巴和血流向全身扩散。在机体抵抗力低时，可在血中大量繁殖引起败血症，或细菌随血流转移到肝、肾、肺、脾等器官，引起多发性脓肿和炎症，即脓毒血症。主要是金黄色葡萄球菌引起。 （2）毒素性疾病1）食物中毒：食入含污染葡萄球菌肠毒素食物18h后，病人出现恶心、呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状，以呕吐为主，严重者虚脱或休克。病后12天可自行恢复，预后良好。2）假膜性肠炎：正常人肠道内金葡少，当抗菌药物抑制或杀死脆弱类杆菌、大肠杆菌等优势菌时，耐药的葡菌大量繁殖，引起以腹泻为主的症状。为一种菌群失调，肠黏膜被一层由炎性渗出物、肠黏膜坏死块和细菌组成的炎性假膜所覆盖。3）烫伤样皮肤综合征：由产生剥脱性毒素的金黄色葡萄球菌引起。疾病开始皮肤有红斑，12天表皮弥漫红斑、起皱，继而出现大疱，最后表皮脱落。4）毒性休克综合征：由TSSTl引起的毒性休克综合征，病死率高，多见于月经期使用阴道塞的女性。可从患者阴道、阴道塞、伤口或其他局部感染能分离出与TSS相关的金黄色葡萄球菌，但血流中找不到。此外，血浆凝固酶阴性的葡萄球菌也可引起疾病，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌可引起妇女的尿道感染。链球菌属（streptococcus）是另一类常见的化脓性球菌。大多为人体正常菌群，少数为致病性链球菌，对青霉素敏感，故由链球菌引起的败血症只占2%。 链球菌分类：根据溶血现象分类：根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为三类：甲型（）溶血性链球菌：菌落周围有狭窄草绿色溶血环，称之甲型溶血或溶血，亦称为草绿色链球菌。此草绿色物质可能是细菌产生的过氧化氢，使血红蛋白氧化成正铁血红蛋白所致。甲型链球菌为条件致病菌，对心脏瓣膜有损伤或先天性缺陷者，可引起亚急性细菌性心内膜炎。 乙型（）溶血性链球菌：菌落周围有宽大透明的溶血环（环内红细胞完全溶解），称为乙型溶血或溶血，亦称为溶血性链球菌。这类链球菌致病力强，常引起人类多种疾病 。 丙型型链球菌：菌落周围无溶血环，故亦称为不溶血链球菌。无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔引起感染。一、A群链球菌（一）生物学性状1形态与染色：球形或卵圆形，直径0.61.0 um，链状排列，长短不一。在固体培养基中常呈短链，在液体培养圣中呈长链，无芽胞和鞭毛，多数链球菌株在培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜，随培养时间延长而逐渐消失。有菌毛样结构，部分由M蛋白组成，被脂磷壁酸所覆盖。脂磷壁酸对链球菌附着上皮细胞起重要作用。革兰染色阳性，衰老、死亡或被吞噬细胞吞噬后可呈革兰阴性。 2培养特性：营养要求较高，在含血液、血清、葡萄糖的培养基中才生长良好。需氧或兼性厌氧，少数为专性厌氧，在血清肉汤中易形成长链而絮状沉淀于管底；在血琼脂平板上形成灰白色、表面光滑、透明或半透明的细小菌落，不同菌株溶血情况不一3.生化反应：触酶阴性。一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性常被用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。 4. 抗原结构：链球菌有多种抗原：多糖抗原，又称C抗原，为群特异性抗原。根据多糖抗原不同，将链球菌分为20个血清群（AH，Kv）。对人致病的链球菌菌株90左右属A群。 蛋白质抗原：位于多糖抗原的外层，又称为表面抗原。表面抗原分为M、R、T、S四种。与致病性有关的主要是M蛋白核蛋白抗原：或称P抗原，无特异性，各种链球菌均相同。 （二）致病性1、致病物质（1）胞壁成分：1）粘附素：包括脂磷壁酸和F蛋白，与细胞膜有高度亲和力，是细菌定值的主要侵袭因素。脂磷壁酸（在M蛋白外）与M蛋白共同组成A群链球菌的菌毛结构。2）M蛋白：是A群链球菌的主要致病因子，有抗吞噬和杀菌作用； M蛋白与人心肌、肾小球基底膜有共同抗原，可引起超敏反应性疾病。 3）肽聚糖：有致热、溶解血小板、提高血管通透性和诱发关节炎等作用。（2）外毒素1）致热外毒素（SPE）：曾被称为红疹毒素或猩红热毒素，是引起猩红热的主要毒性物质，为耐热蛋白质。对机体具有致热作用和细胞毒作用，引起发热，咽炎和全身弥漫性鲜红色皮疹。抗原性强，刺激机体产生抗毒素，抗毒素可中和外毒素的毒性作用。 也是一种超抗原。2）链球菌溶血素：是由乙型溶血性链球菌产生。根据其对氧的稳定性分为两类： 链球菌溶血素O（SLO）：绝大多数A群链球菌株能产生SLO，对红细胞溶解作用强。对氧敏感，SLO对中性粒细胞有破坏作用，使细胞死亡，细胞内释放的水解酶类可破坏邻近组织，加重链球菌的感染。心脏对SLO极度敏感，SLO引起心肌损伤，并能极大加重病毒性心肌炎的病变。SLO抗原性强，不耐热，在链球菌感染23周至病愈后数月到一年内的机体内可检出SLO抗体。 链球菌溶血素S（SLS）：为小分子糖肽，无抗原性，对氧不敏感。链球菌在血琼脂平板上菌落周围出现的溶血环是SLS所致。SLS对白细胞、血小板和多种组织细胞有破坏作用。（3）胞外酶：即侵袭性酶。有三种胞外酶，它们以不同的作用方式，促进细菌在组织间扩散1）透明质酸酶又名扩散因子。能分解细胞间质的透明质酸，使细菌易在组织中扩散。2）链激酶：亦称链球菌纤维蛋白溶酶。能使血液中纤维蛋白酶原转化为纤维蛋白酶，使之溶解血块或阻止血浆凝固，有利于细菌扩散。3）链道酶：亦称链球菌DNA酶。能分解脓汁中具有高度粘稠性的DNA，使脓液稀薄，促进细菌扩散。感染特点：A群链球菌引起的疾病约占90的人类链球菌疾病，引起的疾病分为化脓性、中毒性和变态反应性三类。1、化脓性炎症：皮肤皮肤伤口感染，引起皮肤与皮下组织化脓性炎症，如丹毒、脓疱疮、蜂窝织炎、痈等，细菌易经淋巴管扩散，引起淋巴管炎和淋巴结炎。特点：炎症病灶与正常组织界限不清，脓汁稀薄带血性，有明显扩散倾向，因有侵袭性酶。上呼吸道感染， 引起扁桃体炎、咽喉炎、鼻窦炎，并可扩散引起中耳炎、脑膜炎等。经产道感染引起产褥热。全身性感染：败血症。 2、猩红热中医又称“喉痧”，是由产生致热外毒素的A群乙型链球菌引起的小儿急性传染病，是链球菌感染引起的中毒性疾病。经飞沫传染，主要特征为发热、咽炎、全身弥漫性鲜红皮疹，疹退后出现明显脱屑。 3、变态反应性疾病主要有风湿热和急性肾小球肾炎。扁桃体炎或咽峡炎后2-3周，可发生。1）急性肾小球肾炎：常见于儿童和青少年，多数由A群链球菌引起。临床表现为蛋白尿、浮肿、高血压。2）风湿热：可由多种型别的A群链球菌引起，发病机制尚未十分清楚，可能与M蛋白与心肌有共同抗原而引起的型、型超敏反应所致，SLO损伤心脏。临床表现以心脏炎和关节炎为主。4、亚急性细菌性心内膜炎甲型链球菌是条件致病。当拔牙或摘除扁桃体时，口咽部的甲型链球菌乘机侵入血流，若心脏先天缺陷或心瓣膜损伤，细菌在损伤部位增殖，可引起亚急性细菌性心内膜炎。 （三）免疫性感染链球菌后，可获得一定的免疫力，主要是抗M蛋白抗体，可增强吞噬细胞的吞噬作用。因其型别多，各型之间无交叉免疫力，故常发生反复感染。猩红热病人可产生同型的致热外毒素抗体，对同型菌有较牢固的免疫力。肠杆菌科多为肠道的正常菌群。如大肠杆菌，少数为致病菌，如伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、致病性大肠埃希菌等，可导致人类某些肠道传染病。埃希菌属一、生物学性状 1. 形态与染色中等大小(0.40.7)×（13）um，革兰阴性杆菌，多数菌株有周身鞭毛，致病性菌株有菌毛。2.培养特性：兼性厌氧，营养要求不高。在液体培养基中呈浑浊生长，在普通培养基上生长良好，形成直径23mm的圆形、凸起、灰白色、边缘整齐的光滑（S）型菌落。有些菌株在血琼脂平板上呈溶血。 3、生化反应：分解多种糖类，产酸产气。在肠道鉴别选择培养基上（含乳糖，37，24h），因分解乳糖产酸使菌落带色为非致病性菌，若菌落无色为致病性菌。吲哚和甲基红试验阳性， VP和枸橼酸盐利用试验阴性，即IMViC试验结果为、。 4.抗原构造 主要有O，H、K三类抗原。5. 抵抗力：无芽胞，故不强。较其他肠道杆菌强。对胆盐和煌绿敏感，对磺胺、链霉素、氯霉素敏感，但易产生耐药性。 二、致病性与免疫性大肠杆菌为正常菌群，一般不致病。两大原因可以致病：1、条件致病：细菌居住部位改变引起的肠外感染，尿路感染最常见。2、致病菌株：某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染。（二）所致疾病1、肠道外感染（内源性感染）：1）化脓性感染定位转移 腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等。2）泌尿道感染病原菌来自病人肠道（上行性） 占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等）。2胃肠炎：即肠内感染外源性感染，不同菌株致病性不同。如，EHEC曾引起多地的流行肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC肠致病型大肠埃希菌（EPEC）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）大肠杆菌的2个卫生学指标：卫生细菌学常检查细菌总数和大肠菌群数。细菌总数是指每毫升或每克样品中所含的细菌数。大肠菌群数是指1升饮水或每100mL（g）其他样品中的大肠菌群数，大肠菌群是指在24h发酵乳糖产酸产气的大肠杆菌、枸橼酸杆菌、克雷伯菌和产气杆菌等。我国卫生标准：每毫升饮水、汽水、果汁细菌总数不得