0-224 游泳池水 大肠菌群的测定原始记录.docx

-J224游泳池水大肠菌群的测定原始记录第页共页工程编号温度（）|湿度（%RH）检测依据游泳池水微生物检验方法 大肠菌群测定GB/T 18204.10-2000仪器名称电热恒温培养箱口高压蒸汽灭菌器仪器型号仪器编号测定样品信息样品种类：游泳池水 口其他:样品状态： 液体；收样时间：样品编号一、多管发酵法1、向2个装有50mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的大试管或烧杯加入水样100mL； 2、向10支装有5mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的试管加入水样10mL； 3、 轻摇试管，使液体充分混匀，置369±1培养箱，培养24h： 4、观察是否产气，如不产气那么报告为大肠菌群阴性；假设产气为试验阳性，需进一步证实试验。口平板别离在阳性管中取一环接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36c±1培养箱培养18-24h,观察菌落形态，典型的大肠菌群菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽。口复发酵试验挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，于36c±1培养箱中，培养24h°操作步骤培养条件样品接种量（“+”阳性；“一”阴性。G+革兰氏阳性；G革兰氏阴性）报告结果MPN/1000mL100mLx2lOmLxlO三倍浓缩乳糖胆盐培养液hEMB平板典型菌落生长h革兰氏染色镜检乳糖S：发酵实验_h二、滤膜法1、滤膜灭菌：将滤膜放入蒸储水烧杯中，煮沸灭菌三次，每次15min。前两次煮沸后需要更换水洗涤2-3次，以除去残留溶剂。滤器灭菌：用121c高压 灭菌锅20min： 2、水样过滤：用无菌镒子夹取灭菌滤膜边缘局部，将粗糙面朝上，贴在滤床上。固定好滤器，将100ml水样注入滤器中，翻开滤器阀门， 进行抽滤；3、培养：水样滤完后，再抽气5s,关上滤器阀门，取下滤器。用灭菌镣子夹取滤膜边缘局部，移放在乳糖琼脂别离培养基上，滤膜截留细 曲面朝上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者之间不得留有气泡。然后将平皿倒置，放入36七±1恒温箱内培养18-24h；4、挑取滤膜上符合特征的菌落进行革兰氏染色，镜检；5、将革兰氏染色为阴性的无芽抱杆菌接种到乳糖蛋白陈培养液中，于36±1培养48h。产酸产气者为大肠菌群阳性。操作步骤培养条件空白对照样品平均菌落数大肠菌落数CFU/1000mL样品1样品2品红硫酸钠琼脂_h革兰氏染色、镜检乳糖蛋白陈培养基rh注：阳性；“一”阴性。G+革兰氏阳性；G革兰氏阴性。分析:复核:日期： 年 月 日-J224游泳池水大肠菌群的测定原始记录（续表）第页共页样品编号操作步骤样品接种量（“+”阳性;“一”阴性。G+革兰氏阳性;G-革兰氏阴性）报告结果MPN/l()(X)mL100mLx21 OmLx 10多 管 发 酵三倍浓缩乳糖胆盐培养液EMB平板典型菌落生长革兰氏染色镜检乳糖复发酵实验滤 膜 法操作步骤空白对照样品1样品2平均菌落数品红硫酸钠琼脂革兰氏染色、镜检乳糖蛋白陈培养基多 管 发 酵操作步骤样品接种量（“+”阳性；“一”阴性。G+革兰氏阳性；G-革兰氏阴性）100mLx21 OmLx 10三倍浓缩乳糖胆盐培养液EMB平板典型菌落生长革兰氏染色镜检乳糖复发酵实验滤 膜 法操作步骤空白对照样品1样品2平均菌落数品红硫酸钠琼脂革兰氏染色、镜检乳糖蛋白陈培养基多 管 发 酵操作步骤样品接种量（“+”阳性；“一”阴性。G+革兰氏阳性；G-革兰氏阴性）100mLx21 OmLx 10三倍浓缩乳糖胆盐培养液EMB平板典型菌落生长革兰氏染色镜检乳糖复发酵实验滤 膜 法操作步骤空白对照样品1样品2平均菌落数品红硫酸钠琼脂革兰氏染色镜检乳糖蛋白陈培养基分析:复核:日期： 年 月 日