叶绿体色素的提取和分离.ppt

2制作人：吕凤凤目 录实验拓展实验拓展 实验步骤实验步骤高考解读高考解读实验原理实验原理 实验目的实验目的材料用具材料用具实验目的1（1）初步掌握提取和分离绿叶中色素的方法。（2）探索绿叶中有几种色素。实验原理2（1）提取原理：绿叶中的色素不溶于水，但可溶于无水乙醇等有机溶剂中。（2）分离原理：绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散的慢。过一段时间后，绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。材料用具实验材料新鲜的绿色叶片（如菠菜叶）实验试剂无水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸钙实验仪器干燥的定性滤纸、研钵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、试管、试管架、棉塞、药匙、量筒（10ml）、天平3要选用新鲜的颜色较深的叶片，以便使滤液中含较多的色素。烘干后研磨，效果会更好。试剂组成：由20份石油醚（60-90）、2份丙酮、1份苯混合而成；本质：一种脂溶性很强的溶剂。选择层析液的要求：不同色素在这种溶剂中的溶解度要有明显的差别，差别越大，层析效果越明显。挥发性强，应随用随配。防止研磨过程中色素被破坏。有助于材料研磨的充分。实验步骤4提取色素（1）称取5g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。（2）向研钵中放入少许二氧化硅、碳酸钙和10ml无水乙醇，迅速、充分研磨。（3）将研磨液迅速导入玻璃漏斗过滤。将滤液收集到试管中，并用棉塞封口。温馨提示：漏斗基部放一块单层尼龙布。实验步骤4（1）将干燥处理过的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条；在滤纸条的一端剪去两角。（2）用铅笔在距滤纸条尖端1cm处画一条细的横线。温馨提示：剪去滤纸条两角的目的是使色素在滤纸条上扩散均匀，得到的色素带整齐，便于观察实验结果。画细线的目的是做标记，以便使每次重复画的滤液细线在同一位置。制备滤纸条提取色素提取色素实验步骤4用毛细吸管吸少量的滤液，沿铅笔线均匀地画一条滤液线；干燥处理，重复画2-3次。温馨提示：重复画线可增加滤液细线上的色素含量，使实验效果更加明显。画滤液细线制备滤纸条提取色素制备滤纸条实验步骤4（1）将3ml层析液倒入试管中；（2）将滤纸条轻轻插入层析液中，并用棉塞塞紧试管口。温馨提示：（1）滤纸条放置要求：有滤液细线的一端朝下；滤液细线不能接触层析液。（2）封闭式管的目的：为了防止层析液中的丙酮、苯等有毒物质挥发出来。使烧杯中的层析液蒸汽处于饱和状态，有利于层析液的扩散。分离色素画滤液细线提取色素画滤液细线制备滤纸条实验步骤4观察结果分离色素提取色素分离色素制备滤纸条 画滤液细线实验拓展51、为什么研磨时要迅速、充分？（1）叶绿素极不稳定，能被活细胞中的绿叶素酶水解而破坏，故研磨要迅速。（2）为了使叶绿体完全破裂，从而能提取出较多的色素，故研磨要充分。实验拓展52、试分析滤纸上画的滤液细线不能触到层析液的原因。如果滤液细线浸没在层析液中，会使滤液细线中的色素溶解在层析液中，无法再滤纸上扩散开来。实验拓展53、画滤液细线时，为什么一定要细且直？这样可以防止色素带重叠，使色素分子均匀分布在一条直线上，做到扩散起点一致。实验拓展54、分析层析后， 滤纸条上出现4条不清晰色素带的原因。（1）选择实验材料时，没有选新鲜、浓绿的叶片，这样导致色素种类不全或含量不够；（2）在提取时研磨未充分、迅速，导致研磨过程中色素提取到的比较少；（3）在做色素分离时，层析液没及了滤液细线，使色素含量减少。实验拓展55、若用圆形滤纸代替滤纸条做层析实验，分析实验结果。用圆形滤纸进行实验时，应在圆心处点样，滤纸在圆形滤纸上的扩散原理与在滤纸条上一样，看到的结果是4个同心圆，由外向内依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。实验拓展56、对滤纸条上色素带的分析（1）扩散最快的是胡萝卜素；（2）色素带最宽的是叶绿素a；（3）两条色素带间距最大的是胡萝卜素和叶黄素。高考解读典例导悟典例导悟 考情分析考情分析强化训练强化训练通过本实验，应明确绿叶中色素的提取和分离的原理，初步掌握提取和分离叶绿体中色素的题本方法，知道各种试剂的作用，并能分析实验中出现的各种现象。近几年高考中，几乎年年涉及本实验内容。1.综观近三年各省市的高考试题，本部分内容主要以选择题形式出现；命题点主要有：（1）考查对实验原理的理解；（2）考查各种试剂的作用；（3）考查某种实验现象出现的原因。2.在今后的备考中，本实验仍是重点内容，结合光合作用及其他相关知识，通过创设情境、设置问题的方式命制判断及探究实验等方面的非选择题的可能性较大。（2011广东高考）中国的饮食讲究“色香味”，颜色会影响消费。小李同学拟研发“绿色”食用色素，他以生长很快的入侵植物水葫芦为材料进行如下实验。.提取叶绿素.探究PH对叶绿素稳定性的影响取一些叶绿素粗产品，配成一定浓度的溶液，于室温（约25）下进行实验，方法和结果如下表。注：叶绿素被破坏后变成黄褐色。根据所学知识和实验结果，请回答：（1）提取食用叶绿素的X应该为原因是（2）表中Y应该为 原因是 （3）若用作食品色素，天然叶绿素色素不适用于 食品，否则（4）小李想了解叶绿素粗产品中是否含有其他色素，请你提供检测方法并写出主要步骤。1.（2011江苏高考）某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带分析（从上至下），与正常叶片相比，实验结果是（ ）A.光吸收差异显著，色素带缺第2条B.光吸收差异不显著，色素带缺第2条C.光吸收差异显著，色素带缺第3条D.光吸收差异不显著，色素带缺第3条2.（2010海南高考）某同学从杨树叶片中提取并分离得到4中色素样品，经测定得到下列吸收光谱图，其中属于叶绿素b的是（ ）ABCD3.（2009福建高考）下列对有关实验的叙述，正确的是（ ）A.在观察洋葱细胞有丝分裂的实验中，将已经解离、漂洗、染色的根尖至于载玻片上，轻轻盖上盖玻片后即可镜检B.对酵母菌计数时，用吸管吸去培养液滴满血球计数板的计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机溶剂，如无水乙醇等D.检测试管中的梨汁是否有葡糖糖，可加入适量斐林试剂后，摇匀并观察颜色变化 生物是一门实践性较强的学科，但是由于受学校实验条件的限制，不能满足所有实验均能动手操作，所以“类虚拟仿真实验教学”应运而生。 本实验教学系统由东北师范大学生命科学学院胡建教授工作室制作，该系统基本包括了高中生物实验教学的基本内容。本教学系统主要服务于高中生物实验教学,可供高中教师、学生使用。 1. 根据我国法律，在因特网上发表的作品仍然受到同等的著作权保护。 2.本教学演示为编辑作品，整体著作权属首页显示制作人所有。本系统允许他人建立友情链接，但链接所指向的内容应是本演示系统首页。 3.本演示系统性质为非营利性，作品的著作权均为署名人所拥有。任何个人或组织如欲转载作品，应保持作品完整性、署本人名、标明转载来源。声 明28制作人：吕凤凤